不同植物精油对草莓灰霉病菌的体外抑菌效果研究

为筛选出对草莓灰霉病菌具有显著抑菌作用的植物精油,采用熏蒸法,研究茶树精油、牛至精油等6种植物单方精油及其复配精油对草莓灰霉病菌的体外抑菌效果。结果表明:牛至精油的抑菌效果最佳,其次为1-辛烯-3-醇和茶树精油,其抑菌效果明显优于肉桂精油、桉叶精油和茉莉酸甲酯;茶树精油、1-辛烯-3-醇和牛至精油的最低抑菌浓度(MIC)分别为200、100、100 mg/L;茶树精油与牛至精油复配具有协同增效作用,且二者以质量比1∶4进行熏蒸时,对草莓灰霉病菌的抑制作用最强。综上,牛至精油、1-辛烯-3-醇、茶树精油及茶树精油与牛至精油复配(质量比1∶4)对草莓灰霉病菌的抑菌效果较优。该研究结果可为新型草莓保鲜剂的开发利用提供新的研究思路。

河南省番茄灰霉病病原菌鉴定、生物学特性分析及杀菌剂筛选

番茄灰霉病是番茄生产上的重要病害之一。本试验以河南商丘市蔬菜大棚内疑似患灰霉病番茄植株叶片为试材,采用组织分离法纯化获得3株病原菌菌株,其形态特征一致,选择一株代表性菌株命名为SQBC1。对该菌株rDNA-ITS序列、CHS-1、tubA基因进行测序、比对和系统进化分析,结合菌株培养性状、显微形态学观察、致病性分析,将河南商丘番茄灰霉病致病病原菌确定为灰葡萄孢菌Botryotinia cinerea。生物学特性研究表明28℃为最适生长温度,12 h光照12 h黑暗为最适光照条件,6.0为最适pH值,乳糖为最适碳源,蛋白胨为最适氮源。测试了7种杀菌剂对灰霉菌菌丝生长的抑菌效果,其中嘧菌酯和吡唑醚菌酯的抑菌效果最好。该研究为番茄灰霉病的有效防治提供一定的参考依据。

砖红镰刀菌菌株Pa2对草莓灰霉病的抑制作用

由灰葡萄孢菌Botrytis cinerea引起的草莓灰霉病是草莓栽培中最具破坏性的病害之一,严重降低食用以及经济价值。本研究以“红颜”草莓为试验材料,测定砖红镰刀菌Fusarium lateritium Pa2对草莓灰霉病菌的抑菌活性、防治效果以及草莓病程相关基因表达水平的影响。结果表明,菌株Pa2对草莓灰霉病菌具有显著的抑菌活性,其上清液可以破坏草莓灰霉病菌菌丝细胞膜,导致细胞内容物泄露。离体接种试验结果表明菌株Pa2对草莓叶片灰霉病、草莓果实灰霉病防治效果分别为79.13%、54.29%。经菌株Pa2上清液处理24h后草莓果实病程相关基因FaPR1、FaPR4、FaGR分别上升19.05、24.64、3.69倍。综上所述,砖红镰刀菌菌株Pa2是一种防治草莓灰霉病的新型生防菌资源。

芽胞杆菌JZB30-1的鉴定及其对番茄灰霉病的生防作用

为获得对番茄灰霉病具有良好防效的生防芽胞杆菌,采用对峙培养、双层平板以及生防相关特性检测等方法筛选高活性拮抗菌株,根据形态学、生理生化特性及多基因测序进行菌株种类鉴定,通过离体果实和盆栽试验明确供试菌株的防病促生效果。结果表明,芽胞杆菌JZB30-1对番茄灰霉病菌等10余种植物病原真菌和细菌具有广谱抑菌活性;该菌株具有合成蛋白酶、纤维素酶、脂肽类物质,分泌铁载体、生长激素及溶磷等特性,经鉴定其为解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens;菌株JZB30-1无菌发酵滤液50倍液喷施处理,对番茄果实灰霉病防效为95.0%,发酵液10倍稀释液灌根,番茄株高、鲜重分别较对照增加25.7%和28.4%。相关结果为利用解淀粉芽胞杆菌JZB30-1进行番茄灰霉病生物防治提供理论依据。

草莓灰霉病病原菌分离鉴定及拮抗微生物筛选

草莓灰霉病是草莓种植过程中的主要病害之一。通过对连云港市东海县和徐州市贾汪区草莓基地草莓灰霉病病原菌进行分离纯化,获得一株生长优势病原菌,命名为A03。经过形态学观察、分子生物学鉴定,鉴定其为灰葡萄孢属(Botrytis cinerea)富克葡萄孢盘菌(Botryotinia fuckeliana)。利用平板对峙生长法筛选出一株对A03具有拮抗作用的微生物,命名为ZXY-1,通过分子生物学鉴定为海洋解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。ZXY-1对A03抑菌圈半径达12.67 mm, ZXY-1发酵上清液对A03孢子萌发相对抑制率为58.92%,结果显示ZXY-1发酵液对草莓果具有明显的保鲜作用。海洋解淀粉芽孢杆菌ZXY-1在草莓种植和生长中具备应用潜力。

两种矿物源农药与化学农药混配对百合灰霉病菌抑菌增效作用评价

【目的】为明确矿物源农药与化学农药混配对百合灰霉病的防治效果。【方法】采用菌落生长速率法、黄瓜子叶法及喷雾法测定了氧化亚铜、石硫合剂分别与3种化学农药混配对百合灰霉菌的抑菌增效作用、离体防效、室内盆栽防效及持效期和对百合的安全性。【结果】混配剂86.2%氧化亚铜WP∶70%噁霉灵SP(9∶1)及混配剂29%石硫合剂AS∶75%百菌清WP(9∶1)抑菌活性最强,EC50分别为99.90μg/mL、105.58μg/mL,CTC分别为130.65、122.28,表现为增效作用,其中混配剂86.2%氧化亚铜WP∶70%噁霉灵SP以9∶1混配时对百合灰霉病的防效最好,保护作用防效为87.01%,治疗作用防效为81.81%,室内盆栽防效测定表明第7天防效最大,为76.18%,持效期为7 d。【结论】试验所选药剂对兰州百合安全,86.2%氧化亚铜WP∶70%噁霉灵SP(9∶1)混剂防效高于单剂防效,而29%石硫合剂AS∶75%百菌清WP(9∶1)混剂的防效则低于其单剂防效。

酥梨采后灰霉病生防菌株的鉴定及抑菌作用

以微生物拮抗病原菌是防治病害安全高效的可行手段。通过对果实表面微生物进行筛选鉴定,以期得到一株可以有效抑制灰霉病的生物防治菌株。对拮抗菌株H-1进行形态学特征、生理生化特性分析,结合16S r DNA序列分析和gyrB基因序列分析构建系统发育树;采用平板对峙法结合果实伤口试验考察拮抗菌H-1在体外及梨果表面的抑菌作用。结果表明:经鉴定H-I菌株为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis);B.velezensis H-1在体外条件下可显著抑制灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)、细极链格孢(Alternaria tenuissima)和串珠镰孢菌(Fusarium verticillioides)的菌丝生长,其中对灰葡萄孢霉菌丝的抑制作用最强;果实伤口试验表明,1×1011CFU/mL的B.velezensis H-1可完全抑制梨果表面灰霉菌生长。由此可见,B.velezensis H-1可以有效抑制梨果采后灰霉病的发生。

啶酰菌胺和咯菌腈对番茄灰霉病联合毒力及田间防效

为筛选出啶酰菌胺和咯菌腈最佳配比,对番茄灰霉病的防治能达到最优程度,本文采用离体叶盘法测定啶酰菌胺与咯菌腈单剂及9个复配组合对番茄灰霉的毒力,从中选出最佳组合,进行田间药效试验。结果为啶酰菌胺与咯菌腈对番茄灰霉的EC50值分别为0.7481、0.397μg/mL,啶酰菌胺与咯菌腈5∶1、4∶1、3∶1、2∶1、1∶1、1∶2、1∶3配比下表现为增效作用,其中啶酰菌胺:咯菌腈配比为2∶1时增效作用最明显,SR值为1.91。田间药效试验结果显示,30%啶酰菌胺·咯菌腈悬浮剂1500倍液,50%腐霉利可湿性粉剂600倍液和50%异菌脲可湿性粉剂600倍液,对番茄灰霉病的防效分别为87.32%、74.35%和78.43%,啶酰菌胺·咯菌腈和异菌脲防效差异不显著,但显著高于腐霉利。因此,本文推荐30%啶酰菌胺·咯菌腈悬浮剂在番茄灰霉上使用。

9种杀菌剂对苹果炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌的抑制效果

为明确能有效防控苹果炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌的杀菌剂,本文从田间发病叶片中分离得到了苹果炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌,借助形态学观察和分子生物学手段进行了鉴定,测试了9种常见杀菌剂对苹果炭疽病菌和黄瓜灰霉病菌的抑制效果,同时选取初筛抑制率高的杀菌剂进一步测试了EC50值。结果表明,抑制复合体Ⅲ细胞色素bc1氧化酶的甲氧基丙烯酸酯类杀菌剂吡唑醚菌酯可有效防治苹果炭疽病菌,抑制甾醇生物合成脱甲基化酶的三唑类杀菌剂戊唑醇可有效防治黄瓜灰霉病菌。

2种生物杀菌剂及其助剂对葡萄灰霉病菌室内抑制效果评价

[目的]为达到降低农药抗性及减少农药用量的目的,筛选防治葡萄灰霉病的有效生物杀菌剂及增效的农药助剂。[方法]研究采用菌丝生长速率法测定不同浓度的多抗霉素和小檗碱单剂使用及分别与加倍强、有机硅2种助剂复配对葡萄灰霉病病菌的室内毒力。[结果]生物杀菌剂多抗霉素抑菌效果较好,在有效浓度是8 mg/L时抑菌率最高,达(86.67±1.11)%;小檗碱的抑菌效果相对较差,最高抑菌率仅(35.93±1.28)%。结果还表明:2种助剂均能起到较好的增效作用,其中加倍强的增效作用更明显;有效浓度为4 mg/L的多抗霉素复配助剂加倍强5000倍液时,抑菌率可达到100%;小檗碱复配加倍强5000倍液后,抑菌率均在85%以上,比单剂抑菌增效60%以上,其中有效浓度为0.8 mg/L的小檗碱复配加倍强5000倍液抑菌效果最佳,达(97.04±2.57)%。[结论]生产中可直接选择10%多抗霉素1000倍液防治葡萄灰霉病;也可选用添加农药助剂加倍强的小檗碱250倍液防控葡萄灰霉病。

30%啶菌·威悬浮剂防治黄瓜灰霉病田间药效试验

通过对比不同浓度的30%啶菌·威悬浮剂在防治黄瓜灰霉病上的田间药效来分析该药剂在黄瓜灰霉病上的防效、安全性和实际推广价值,同时对比的还有25%啶菌恶唑乳油和65%万霉灵可湿粉。结果表明:1)30%啶菌·威悬浮剂在防治黄瓜灰霉病上具有一定的防效,平均防效70.16%,推荐使用量为22.2~88.8 g.mL/667 m^(2),且防效随用药量的增加而提高;2)30%啶菌·威悬浮剂用药量合理,对黄瓜安全,且未见药害;3)25%啶菌恶唑乳油和65%万霉灵可湿性粉剂防治黄瓜灰霉病的最后一次调查防效为76.40%、73.41%,防效较高,增产率为17.12%、15.31%,增产效果较为明显,且方差分析表明,25%啶菌恶唑乳油和65%万霉灵可湿性粉剂与30%啶菌·威悬浮剂之间无明显差异,可考虑与30%啶菌·威悬浮剂复配或交替使用,以此来增强药效、减轻抗药性。

茶香螺烷对草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)抑菌活性研究

研究茶香螺烷对草莓灰霉病菌(Botrytis cinerea)抑菌活性的影响,以期为开发醉蝶花提取物防治草莓灰霉病提供依据。结果表明,茶香螺烷对草莓灰霉病菌具有显著抑菌活性,其中熏蒸处理效果优于直接接触的抑菌活性。茶香螺烷在最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)处理下对菌丝表面造成损伤,胞外电导率分别升高31.20%和44.66%,麦角固醇合成量分别降低8.18%和12.58%,丙二醛含量分别升高0.335和0.373μmol·L^(-1);茶香螺烷处理后草莓灰霉病菌致病力BcPDR1基因和过氧化物酶BccatA基因显著下调,细胞壁降解酶Bcpg5基因相对表达量显著上调。

0.3%丁子香酚可溶液剂防治菜豆灰霉病田间药效评价

菜豆灰霉病又称芸豆灰霉病,是菜豆上常见的重要病害。病原菌为灰葡萄孢菌,属半知菌亚门真菌,可随病残体、水流、气流、农具及衣物传播,为害时叶片呈水渍状下垂,根茎处产生云纹斑,豆荚发病病斑初呈淡褐至褐色后软腐,湿度大时伴随有白色或灰色毛霉层。菜豆灰霉病在我国各地均有发生,主要发病盛期在4—9月,近年为害呈上升趋势。当前,0.3%丁子香酚可溶液剂主要登记用于防治番茄灰霉病,其他作物上登记鲜见。为了探索0.3%丁子香酚可溶液剂对菜豆灰霉病的防治效果,按照农业农村部农药检定所的批复。

哈茨木霉对番茄灰霉病菌的拮抗作探析

木霉菌Trichoderma spp. 属于半知菌类常见的土壤丝孢菌,至少对18个属29种病原真菌表现出拮抗作用。采用平板对峙培养与室内防效相结合的方法,研究木霉菌株TM对番茄灰霉病的防治效果。结果如下:TM菌株对灰霉病菌有明显的抑制作用,TM菌株在与病原菌的对峙中,形成对抗局面。TM菌株对番茄灰霉病的抑菌率在第6天为62.05%,拮抗系数表现为Ⅰ~Ⅱ级。木霉菌对番茄灰霉病的防治效果明显,对接种灰霉病孢子悬浮液和菌饼的防效分别达33.66%和69.44%。

辽宁省韭菜灰霉病菌的分类鉴定及生物学特性研究

以辽宁省北镇市中安镇采集的湿腐型韭菜灰霉病菌为研究对象,采用形态学特征及分子生物学方法进行病原菌鉴定,并研究其生物学特性。结果表明,辽宁省韭菜灰霉病菌为葱鳞葡萄孢(Botrytissquamosa),菌丝生长最适碳源为葡萄糖,适宜氮源为牛肉膏、蛋白胨和酵母膏,最适生长温度为25℃,最适pH为6.0;pH为5.0~11.0及10~30℃温度条件下均能生长,超过30℃菌丝生长缓慢,35℃停止生长;菌核产生对pH和光照敏感,pH为5.0~6.0、12h/12h光暗交替培养均有利于菌核产生,pH>6.0及24h连续光照则抑制菌核产生。

生物药剂对草莓灰霉病的防效与评价

为筛选出适防草莓灰霉病的药剂,选择了5种供试生物药剂,分别开展了室内抑菌实验和田间防效试验。研究结果表明,供试药剂抑制菌丝生长效果明显,生物类药剂显著优于化学类药剂(腐霉利对照),其中,多抗霉素WP和香芹酚AS抑菌效果明显,其次是枯草芽孢杆菌WP和丁子香酚SLX、哈茨木霉菌WP。田间药效结果表明,第1次施药后7d显著低于第2次施药后14d效果,各药剂处理防效得到显著提升,多抗霉素WP和香芹酚AS防效最高,防效分别为86.12%和82.32%;枯草芽孢杆菌WP和丁子香酚SLX防效次之,防效分别为75.36%和72.77%;哈茨木霉菌WP防效最差,防效为65.20%,与其它处理差异显著。生物类药剂持效性更佳,显著好于化学类药剂,故可推荐多抗霉素WP、香芹酚AS、枯草芽孢杆菌WP和丁子香酚SLX 4种药剂作为防控草莓灰霉病的生防理想药剂,旨在为徐州地区绿色发展新理念提供技术支撑。

拮抗灰霉病菌的低温型木霉菌株的分离鉴定

木霉是一种具有良好生防潜力和应用前景的灰霉病防治菌,但是目前的木霉菌株大多是在常温条件下筛选获得,造成其对冬季低温条件下发生的灰霉病防治效果较差.筛选鉴定耐低温且拮抗效率高的木霉菌株对低温地区灰霉病的防治具有十分重要的意义.采集冷凉地区的土壤样品,利用马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA培养基)在16℃低温条件下分离培养木霉,共获得88株具有良好低温适应性的木霉菌株;利用平板对峙法对这些木霉菌株在低温条件下拮抗灰霉病菌的效率进行了研究,获得3株高效拮抗灰霉病菌的木霉菌株J4-1,J4-5,C2-7;经分子生物学与形态学相结合的方法鉴定,J4-1为棘孢木霉(Trichoderma asperellum),J4-5为非洲哈茨木霉(Trichoderma afroharzianum),C2-7为拟康宁木霉(Trichoderma koningiopsis).获得的低温环境下高效拮抗灰霉病菌的木霉菌株将为北方冷凉地区植物灰霉病的防治工作奠定基础.

韭菜灰霉病菌对嘧霉胺和咯菌腈抗性评价及抗性菌株适合度分析

为研究韭菜灰霉病菌对嘧霉胺和咯菌腈的抗性水平及抗性菌株适合度的影响,在甘肃不同区域采集并分离出54株韭菜灰霉病菌,采用抗药性MIC法(最低抑制浓度法)、菌丝生长速率法分别测定嘧霉胺和咯菌腈对灰霉病菌的最低抑制浓度及抗性菌株的敏感性,以此划分敏感菌株和抗性菌株,确定其抗性水平,分析抗性菌株的遗传稳定性及适合度。结果表明,嘧霉胺和咯菌腈对54株灰霉病病菌的最低抑制浓度分别为4.80和0.15μg·mL^(-1),抗性频率分别为35.19%和9.26%。灰霉病菌对嘧霉胺和咯菌腈的抗性分别表现为中抗、高抗和低抗水平;低抗菌株抗嘧霉胺特性不能稳定遗传,转代培养后有向敏感菌株发展的趋势。对嘧霉胺产生抗性的菌株,其适合度显著低于敏感菌株,在与敏感菌株的竞争中不占优势;对咯菌腈产生抗性的低抗菌株,其适合度与敏感菌株相当。

枯草芽孢杆菌WR菌株对番茄灰霉病的生防潜力

为评估WR菌株对番茄灰霉病的生防潜力,测定了WR对番茄灰霉病菌的离体和活体活性。平板对峙培养和发酵液带毒培养试验表明,WR对番茄灰霉菌落生长的拮抗率达98.2%,WR发酵上清液的30倍稀释液对灰霉菌落生长的抑制率达94.5%。喷施带菌发酵液及其50倍稀释液,对采后番茄果实灰霉病发生的保护作用和治疗作用均达100%,果面光洁;而对照果实上灰霉菌生长旺盛,菌落平均直径1.10~1.13 cm,病害周围果实软化,碰触有臭味汁液流出。WR发酵上清液经11种不同性质的树脂吸附后的残液抑菌活性在2.2%~70.7%,表明发酵液抑菌活性成分丰富,D201和001×7均可作为活性成分富集树脂。经16S rDNA核苷酸序列鉴定,WR为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis),具有防治番茄灰霉病的潜力。

氟酰羟·咯菌腈在草莓灰霉病上的应用效果

为明确氟酰羟·咯菌腈对草莓灰霉病的防治效果,以啶菌噁唑、嘧环·咯菌腈、唑醚·氟酰胺为对照药剂,开展田间试验。灰霉病始发期,4种杀菌剂各按一定浓度喷施,隔7 d二次防治。结果表明,400 g·L^(-1)氟酰羟·咯菌腈悬浮剂对草莓灰霉病防治效果佳,随浓度降低,防治效果下降,差异显著,建议田间施用浓度为750倍~1000倍;25%啶菌噁唑悬浮剂750倍防治效果与400 g·L^(-1)氟酰羟·咯菌腈悬浮剂1000倍相近,差异不显著;62%嘧环·咯菌腈悬浮剂与42.4%唑醚·氟酰胺悬浮剂防治效果较差。因此,可用400 g·L^(-1)氟酰羟·咯菌腈悬浮剂,与25%啶菌噁唑悬浮剂轮换防治草莓灰霉病,以延缓抗药性的产生。