灵孢多糖对过氧化氢致SH-SY5Y细胞凋亡及线粒体功能障碍的调控

背景:目前研究证实,灵孢多糖可促进神经退行性相关疾病的神经再生。神经退行性疾病的发生与线粒体功能失调密切相关,但灵孢多糖对神经退行性疾病的细胞凋亡及线粒体功能的调控作用尚不明确。目的:探索灵孢多糖对过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞凋亡及线粒体功能障碍的调控作用及机制。方法:SH-SY5Y细胞分为3组:对照组,过氧化氢组,灵孢多糖组。对照组细胞正常培养,过氧化氢组细胞用300μmol/L过氧化氢处理24 h,灵孢多糖组先用300μg/μL灵孢多糖干预一两个小时,然后加入300μmol/L过氧化氢干预24 h,干预结束后用JC-1试剂盒检测线粒体膜电位,TUNEL染色试剂盒检测细胞凋亡情况,丙二醛试剂盒和超氧化物歧化酶试剂盒检测丙二醛和超氧化物歧化酶活性,免疫荧光染色法和Western blot法检测凋亡、线粒体动力学相关蛋白的表达。结果与结论:①与对照组相比,过氧化氢组线粒体膜电位和超氧化歧化酶活性显著降低,细胞凋亡率、丙二醇水平显著增高,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组线粒体膜电位和超氧化歧化酶活性显著增高,细胞凋亡率、丙二醛水平显著下降,差异均有显著性意义(P<0.05);②与对照组相比,过氧化氢组促凋亡蛋白Bax和Caspase-3的表达显著增加,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著下降,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组促凋亡蛋白Bax、Caspase-3的表达显著降低,抗凋亡蛋白Bcl-2的表达显著增加,差异均有显著性意义(P<0.05);③与对照组相比,过氧化氢组线粒体分裂蛋白Fis1与线粒体动力学蛋白p-Drp1的表达均显著增高,线粒体融合蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达均显著降低,差异均有显著性意义(P<0.05);与过氧化氢组相比,灵孢多糖组线粒体分裂蛋白Fis1与线粒体动力学蛋白p-Drp1的表达显著降低,线粒体融合蛋白OPA1、Mfn1、Mfn2的表达显著增高,差异均有显著性意义(P<0.05);④以上结果证实,灵孢多糖可通过改善线粒体功能障碍以减轻过氧化氢诱导的SH-SY5Y细胞氧化应激损伤和细胞凋亡。

灵孢多糖在神经炎性变性疾病中的保护作用及其机制研究进展

神经炎性变性疾病(NIDs)以神经元进行性变性和坏死为特征,包括阿尔茨海默病(AD)、帕金森病(PD)、运动神经元疾病等。目前的疗法只能缓解症状,还没有方法来阻止这些疾病的进行性加重。NIDs具有神经炎症、氧化应激、线粒体功能障碍、自噬、凋亡等共同病理机制。灵孢多糖(GLPS)是灵芝的主要活性成分,由于其抗炎、抗氧化和神经保护活性,已被广泛用于NIDs的研究。通过系统综述GLPS在体外和体内NIDs模型中的作用,探讨其在抗神经炎症、氧化应激等方面的作用机制,为NIDs的治疗和GLPS的研究应用提供新的方案。

灵杆菌多糖对内毒素所致小鼠休克死亡的保护作用及其机制研究

目的探讨灵杆菌多糖对内毒素所致小鼠休克死亡的保护作用及其机制。方法昆明小鼠分别腹腔注射铜绿假单胞菌脂多糖(内毒素)60mg/kg或10mg/kg制作内毒素中毒休克死亡模型和内毒素血症模型,灵杆菌多糖提前0.5h预防性腹腔注射给药,观察内毒素中毒休克死亡模型动物3d内的死亡情况,以及内毒素血症模型动物3h后血清中细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-α含量的变化。以内毒素(10μg/ml)体外刺激小鼠腹腔渗出细胞,观察灵杆菌多糖对内毒素诱导IL-1β、IL-6、TNF-α表达的抑制作用。细胞因子含量的检测采用ELISA法。结果内毒素中毒休克死亡模型中,灵杆菌多糖(50、100U/kg)预处理动物的存活率(70%、55%)明显高于未经预处理者(10%,P<0.01);同样剂量下,灵杆菌多糖可明显抑制内毒素血症模型小鼠血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量的升高(P<0.05)。体外实验显示,20U/ml灵杆菌多糖可轻微刺激小鼠腹腔渗出细胞分泌IL-1β、IL-6、TNF-α(P<0.05),而10U/ml及20U/ml灵杆菌多糖可明显抑制由内毒素诱导的小鼠腹腔渗出细胞IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌(P<0.05)。结论灵杆菌多糖本身可轻微促进IL-1β、IL-6、TNF-α的分泌,但与内毒素同时存在时可抑制后者刺激促炎细胞因子分泌的作用并拮抗后者的毒性作用。

灵孢多糖对MPP^+损伤PC12细胞的保护作用

【目的】观察灵孢多糖(GLPS)对甲基-苯基-吡啶离子(MPP+)诱导损伤的PC12细胞的保护作用。【方法】将MPP+或GLPS加入体外培养的PC12细胞中,建立多巴胺能神经元损伤模型,用四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞活力的变化;以乳酸脱氢酶(LDH)检测法检测培养上清液中LDH水平的改变;通过酪氨酸羟化酶(TH)免疫细胞化学法检测TH阳性细胞数及蛋白的表达。【结果】MPP+处理48h后,细胞活力降至对照组的52%,经GLPS(100、200、300!g/mL)预处理后,细胞活力明显提高,分别为65%,75%,79%(P<0.05)。MPP+处理48h后,上清液中LDH水平较对照组明显提高,经不同浓度的GLPS预处理后,上清中LDH水平有所下降(P<0.05),且TH阳性细胞数及表达强度明显高于MPP+组。【结论】灵孢多糖对MPP+诱导损伤的PC12细胞具有保护作用。

灵杆菌多糖与灵杆菌素

灵杆菌多糖与灵杆菌素容易混淆,文章从历史原因、化学本质、物理性状、药理活性以及临床应用等方面对二者进行了分析与区别,供药学、医学及相关专业的学者在教学和科研工作中参考。

灵孢多糖对脂多糖诱导的原代多巴胺能神经元变性的保护作用

目的观察灵孢多糖对脂多糖诱导的原代多巴胺能神经元变性的保护作用。方法建立原代中脑多巴胺能神经元与胶质细胞的共培养,随机分为6组:对照组、脂多糖组(20ng/mL);单纯灵孢多糖组、脂多糖+灵孢多糖(50,100,300!O/mL)3组。通过免疫组化检测酪氨酸羟化酶,OX-42的阳性细胞数,以RT-PCR检测TNF-αmRNA和iNOSmRNA表达。结果灵孢多糖(100,300!O/mL)组的酪氨酸羟化酶阳性细胞数明显多于脂多糖组,分别为(30.1±3.1,34.2±3.2,23.4±2.8)。脂多糖组激活的小胶质细胞体积增大,细胞数量增多(30.6±4.5),TNF-αmRNA和iNOSmRNA表达增高,但经较大剂量灵孢多糖(100,300!O/mL)预处理后,小胶质细胞的激活被抑制,总的细胞数量显著减少(26.4±5.1,25.1±4.6),TNF-αmRNA和iNOSmRNA表达量降低(P<0.01)。结论灵孢多糖预处理对脂多糖诱导的原代中脑多巴胺能神经元变性具有保护作用,可能是由于灵孢多糖的预处理阻断了由脂多糖诱导的小胶质细胞的激活,从而减少了TNF-αmRNA和iNOSmRNA的表达。

灵武长枣水提多糖结构特征及理化性质

运用红外光谱仪、旋光计、黏度计等对灵武长枣水提多糖进行结构特征及理化性质初探。红外光谱扫描图表明:6种灵武长枣水提多糖均含有典型多糖结构功能基团。旋光度实验表明:6种多糖的比旋光度分别为:+44.0、+27.0、+30.0、+19.0、+36.0、+22.0。溶解性实验表明:6种多糖的溶解性受温度的影响较大,且低温下不容易溶解,而pH值的影响较小。黏度实验表明:6种多糖溶液的黏度随其溶液质量浓度的增大而增大;随温度的升高而降低,但温度对其影响有一定的可逆性;随着剪切时间的增加而下降。

聚酰胺柱层析法去除西藏灵菇胞外多糖发酵液中蛋白质的研究

研究在西藏灵菇胞外多糖提取过程中,用聚酰胺树脂吸附西藏灵菇发酵液中的蛋白质,确定吸附时间为12h,采用蒸馏水洗脱收集多糖,洗脱液体积为原发酵液体积的5倍,使用量为180g/L,脱蛋白率达81.59%,总糖回收率为87.75%,粗多糖回收率为28.32%。

灵杆菌多糖对内毒素诱导小鼠肺损伤的保护作用

目的:探讨灵杆菌多糖对内毒素(LPS)所致小鼠肺损伤的保护作用。方法:提前0.5 h给小鼠腹腔注射灵杆菌多糖,然后尾静脉注射LPS(30 mg/kg),3 h后ELISA法测定肺组织白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量;6 h后测量肺湿重干重比(W/D)、髓过氧化物酶(MPO)活力、丙二醛(MDA)含量。结果:灵杆菌多糖(100 U/kg)可部分抑制由LPS引起的IL-1β、IL-6、TNF-α的增加(P<0.05),降低肺W/D(P<0.05);剂量为100、50 U/kg时,可部分抑制MPO活性(P<0.05)及MDA含量(P<0.01)的增加。结论:灵杆菌多糖预防性给药对内毒素所致小鼠肺损伤有一定的保护作用。

灵孢多糖对α-鹅膏毒肽中毒小鼠肝肾的保护作用

目的:研究灵孢多糖对α-鹅膏毒肽中毒小鼠肝肾的影响并探索其对α-鹅膏毒肽中毒小鼠肝肾的影响是否存在量效关系。方法:将昆明雄性小鼠48只随机分为六组,即空白组、毒模组、灵孢多糖治疗1～4组,每组8只,复制α-鹅膏毒肽中毒模型4h后,空白组、毒模组腹腔注射生理盐水0.5mL,4个治疗组分别腹腔注射灵孢多糖0.5、1.0、2.0、4.0mL/kg,每天1次,连续3d。观察动物的行为表现及生存状况,实验72h小鼠摘眼球取血后对其进行解剖,计算肝肾脏器系数;检测ALT、AST、BUN、SCR;光镜下观察肝肾的病理组织改变。结果:与毒模组比较,灵孢多糖治疗组小鼠行为表现较好,肝肾脏器系数降低(P<0.05),ALT、AST、BUN、SCR较毒模组下降明显(P<0.05),肝肾病理损害程度减轻。结论:灵孢多糖对α-鹅膏毒肽中毒小鼠的肝肾具有保护作用,在本实验中灵孢多糖对α-鹅膏毒肽中毒小鼠的肝肾保护存在量效关系。

粘质沙雷氏菌产生的灵菌红素和灵杆菌脂多糖中英文释义

粘质沙雷氏菌能产生具有免疫调节、抗肿瘤等活性的灵菌红素和灵杆菌脂多糖,引起了研究人员的广泛兴趣。目前中文文献中存在对粘质沙雷氏菌、灵菌红素、灵杆菌脂多糖相关概念使用不合理或者混淆的情况,容易造成读者的误解。通过专业期刊数据库、电子词典等网络资源的检索,总结粘质沙雷氏菌、灵菌红素和灵杆菌脂多糖相关名称的使用情况,对粘质沙雷氏菌、灵菌红素和灵杆菌脂多糖相关中英文名称的合理使用给出建议。

灵孢多糖对M146L细胞APP mRNA表达的影响研究

目的:探讨灵孢多糖(GLPS)对M146L细胞APP mRNA表达的影响,寻找潜在的能够抑制Aβ分泌的中药单体,以达到治疗阿尔茨海默病(AD)的目的。方法:以可过表达β淀粉样蛋白42(Aβ_(42))的β淀粉样蛋白前体蛋白(APP)/突变型早老素1(PS1)双转基因的CHO细胞(M146L细胞)为体外AD治疗药物筛选模型。经不同浓度的GLPS(100,200,300μg/mL)处理后,采用MTT比色法检测细胞活性;应用逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测灵孢多糖对M146L细胞APP mRNA表达的影响;蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测M146L细胞中APP,Aβ_(42),Bax,Bcl-2等蛋白表达情况;酶联免疫吸附法(ELISA)检测M146L细胞外Aβ_(42)的表达情况。结果:低、中剂量GLPS组细胞活性与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);高剂量GLPS组相比于对照组,细胞活性明显下降(P<0.05)。相比于对照组,低、中、高剂量GLPS组APP mRNA,APP,Aβ_(42),Bax表达水平及细胞外Aβ_(42)浓度均降低(P<0.05),Bcl-2表达水平均升高(P<0.05),且呈一定浓度依赖性(P<0.05)。结论:GLPS可抑制M146L细胞表达APP mRNA,具有成为治疗AD药物的潜质。

藏灵菇多糖提取工艺的优化

以藏灵菇为试验材料,采用单因素试验和正交试验设计以多糖提取率为考察指标,对藏灵菇多糖的提取工艺进行优化.结果表明:藏灵菇多糖的最佳提取工艺为提取时间4h,提取温度85℃,料液比1∶60,提取次数4次.在此条件下,藏灵菇多糖的提取率为20.96%.其中浸提温度对藏灵菇多糖的提取率影响极显著(P<0.01),料液比对藏灵菇多糖的提取率影响显著(P<0.05),经红外光谱分析表明提取的物质具有糖类特征峰,且该杂多糖样品中含有吡喃糖苷键.

灵杆菌多糖对小鼠免疫调节功能的影响

目的研究灵杆菌多糖对荷瘤小鼠免疫调节功能的影响。方法建立免疫抑制S180荷瘤小鼠模型,观察腹腔注射灵杆菌多糖对小鼠白细胞数、瘤体质量及免疫器官指数的影响。结果灵杆菌多糖提高荷瘤小鼠脾脏指数,对免疫低下小鼠白细胞计数下降具有对抗作用。结论灵杆菌多糖对肿瘤生长具有抑制作用,且可提高免疫抑制小鼠的免疫功能。

注射用灵杆菌多糖联合克拉霉素缓释片及甲硝唑注射液治疗慢性盆腔炎的效果观察

目的探讨注射用灵杆菌多糖联合克拉霉素缓释片及甲硝唑注射液治疗慢性盆腔炎(CPID)患者的临床效果。方法选取130例CPID患者,按随机数字表法分为2组,对照组(65例)给予克拉霉素缓释片及甲硝唑注射液(连续给药7d为1个疗程)治疗,观察组(65例)给予注射用灵杆菌多糖(2次·周^-1,5次为1个疗程)联合克拉霉素缓释片及甲硝唑注射液治疗,共给药2个疗程。比较2组的疗效、治疗2个疗程后炎症因子[肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-2(IL-2)、IL-4、C反应蛋白(CRP)]水平、症状缓解时间和不良反应。结果观察组总有效率为96.92%,高于对照组的86.15%(P<0.05);观察组治疗2个疗程后TNF-α、CRP水平低于对照组,IL-2、IL-4水平高于对照组(均P<0.01);观察组症状缓解时间短于对照组(P<0.05);2组均未发生明显不良反应。结论注射用灵杆菌多糖联合克拉霉素缓释片及甲硝唑注射液治疗CPID,能改善机体免疫功能与炎症状态,促进病情改善,疗效显著。

灵孢多糖通过抑制TLR4/NF-κB通路改善EAE小鼠的髓鞘脱失

目的探究灵孢多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLPS)对多发性硬化(multiple sclerosis,MS)动物模型实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)小鼠的保护作用及机制。方法将C57BL/6小鼠30只随机平均分为3组:正常对照组、EAE模型组、GLPS组(5 mg·kg^(-1))。采用结核分枝杆菌和MOG35-55建立小鼠EAE模型,观察GLPS对EAE小鼠体质量及神经功能障碍评分的影响;采用固蓝染色和HE染色观察小鼠脊髓冰冻切片髓鞘组织病理情况、免疫荧光观察MBP表达变化;利用流式细胞术检测小鼠脾脏、淋巴结中IL-17、Foxp3含量;通过Western blot检测小鼠脊髓组织中TLR4/NF-κB通路蛋白表达水平。结果与正常对照组比较,EAE模型组小鼠神经行为学评分升高,并且伴随体质量降低,脊髓组织大范围髓鞘脱失,呈现大量炎性细胞浸润,髓鞘标志蛋白MBP表达下调,TLR4/NF-κB通路蛋白表达水平升高。经GLPS干预后,EAE小鼠神经功能评分降低、体质量上升,髓鞘脱失改善,炎性细胞浸润减少,Foxp3的表达增加,IL-17的含量降低,TLR4/NF-κB通路蛋白表达降低。结论GLPS能够抑制MS动物模型EAE的发病进程,其作用机制可能是通过抑制TLR4/NF-κB炎症通路改善髓鞘脱失,从而发挥对中枢神经系统的保护作用。

一种准确测定灵孢多糖含量的方法

目的:建立准确测定灵孢多糖含量的方法。方法:采用蒽酮硫酸法,紫外分光光度计在620nm检测吸收度,以测得的吸收度与其对应的浓度计算回归方程,回归曲线的相关系数不得低于0.99。对此方法改进,摸索出影响含量结果不稳定的因素,准确测定含量。结果:重复性,精密度均符合规定。结论:本方法可用于准确测定灵孢多糖的含量。

灵孢多糖联合格列吡嗪对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病小鼠认知功能障碍的保护作用

探讨灵孢多糖联合格列吡嗪对STZ诱导的糖尿病认知功能的影响。方法 将雄性小鼠随机分为5组,其中1组为对照组,另4组采用STZ诱导糖尿病小鼠模型,造模成功后,各组给予相应药物灌胃。进行行为学测试,检测胰高血糖素样肽-1(GLP-1)、葡萄糖依赖性促胰岛素多肽(GIP)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量。结果 体质量与A组相比,B组显著下降(P<0.05),与B组相比,C、E组均明显改善,且E组改善优于C组(P<0.05);空腹血糖与A组相比,B组显著上升(P<0.05),与B组相比,C、E组均明显改善,且E组改善优于C组(P<0.05)。随天数增加,各组小鼠逃逸距离、逃避潜伏期均呈下降趋势;逃逸距离、逃避潜伏期,与A组相比,B组明显增加(P<0.05);与B组相比,D、E组均显著减少(P<0.05),且E组减少幅度大于D组(P<0.05);各组小鼠游泳速度无明显统计学差异(P>0.05)。GLP-1、GIP含量与A组相比,B组明显减少(P<0.05),与B组相比,C、E组GLP-1、GIP含量明显上升(P<0.05),且E组高于C组(P<0.05)。SOD活性与A组相比,B组明显降低(P<0.05),与B组相比,D、E组明显上升(P<0.05),且E组高于D组(P<0.05);MDA含量与A组相比,B组明显增多(P<0.05),与B组相比,D、E组明显减少(P<0.05),且E组低于D组(P<0.05)。结论 灵孢多糖联合格列吡嗪可调控GIP、GLP-1含量及抗氧化能力,改善糖尿病致使的认知功能障碍。

灵杆菌多糖联合常规治疗带状疱疹疗效观察

目的:观察灵杆菌多糖联合常规治疗手段治疗带状疱疹的疗效。方法:116例患者随机分为两组,A组给予常规治疗手段,B组加用灵杆菌多糖治疗。结果:A组痊愈率46.7%,总有效率73.3%;B组痊愈率83.7%,总有效率93%。两组痊愈率、总有效率比较差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:灵杆菌多糖联合常规治疗手段治疗带状疱疹的疗效显著,且无明显不良反应,值得临床应用。