灵芝制剂治疗APP/PS-1阿尔茨海默病转基因小鼠模型的病理学改变

目的探讨灵芝制剂对APP/PS-1转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠的病理学改变。方法选用4月龄APP/PS-1转基因小鼠,分为AD模型组、灵芝高剂量[2250 mg/(kg·d)]组和灵芝中剂量[750 mg/(kg·d)]组,阳性对照组用盐酸多奈哌齐药物[2 mg/(kg·d)],正常组选用C57BL/6J野生鼠。动物给药4个月后解剖观察组织病理,应用苏木素-伊红(HE)染色、免疫组织化学、特殊染色及电子显微镜超微结构观察并比较各组组织病理形态及结构差异。结果病理形态学改变:灵芝制剂组小鼠脑内老年斑降解、减少或消失;神经元纤维缠结减少或消失;淀粉样蛋白血管病明显减少;海马和齿状核的幼稚神经细胞数量比AD模型组显著增多(海马:F=1.738,P=0.016;齿状核:F=1.924,P=0.026);灵芝制剂高、中剂量组小鼠小脑浦肯野细胞较模型组丢失少(F=9.46,P=0.007;F=9.46,P=0.010);灵芝制剂组DCX免疫组织化学染色阳性显示小脑神经干细胞出现早而且数量多。电镜观察灵芝制剂组小鼠海马神经细胞较AD模型小鼠完整,核膜完好,胞质内的线粒体、内质网、高尔基体、微管结构、突触完整。小胶质细胞无异常。灵芝制剂治疗组小鼠在整个实验中未见到细胞和组织学的毒性表现。结论灵芝制剂可使AD小鼠脑内老年斑和神经元纤维缠结降解、减少或消失及淀粉样蛋白血管病变减少。

灵芝制剂对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病模型小鼠的行为学、生物化学和自身免疫指标的影响

目的评估灵芝制剂对APP/PS1双转基因阿尔茨海默病(AD)小鼠行为学、生物化学和自身免疫指标的影响。方法将44只4月龄APP/PS-1双转基因AD小鼠随机分为AD模型组、安理申组、灵芝中剂量组和灵芝高剂量组4组,每组11只,以10只4月龄C57BL/6小鼠为对照组。水迷宫实验观测小鼠的行为学变化情况,Western blot法检测脑组织蛋白表达水平,间接免疫荧光法检测自身免疫指标。结果定位航行实验结果显示,从第2天起,对照组、灵芝高剂量组和中剂量组寻找平台时间呈现逐渐缩短趋势,AD模型组寻找平台时间呈现逐渐增加趋势;第5天,对照组(t=5.607,P=0.000)和灵芝高剂量组(t=2.750,P=0.010)寻找平台时间较模型组明显缩短。空间探索实验结果显示,AD模型组小鼠穿越目标平台所在象限的次数(t=2.452,P=0.025)和在目标象限内滞留时间(t=2.530,P=0.020)明显少于对照组小鼠,穿越目标平台次数较灵芝组高剂量组(t=2.317,P=0.030)和灵芝中剂量组明显减少(t=2.443,P=0.030),且目标象限停留时间较灵芝高剂量组明显减少(t=2.770,P=0.020);灵芝高剂量组小鼠穿越目标平台所在象限的次数(t=2.493,P=0.022)和在目标象限内滞留时间(t=2.683,P=0.015)明显多于安理申组小鼠。Western blot检测结果显示,灵芝高、中剂量组小鼠脑组织中Apo A1表达水平显著高于AD模型组(P<0.01,P<0.05);灵芝高剂量组Aβ-40表达水平显著低于AD模型组(P均<0.05);灵芝高剂量组小鼠脑组织中的Sty1、Apo E、ABCA1水平显著高于模型组(P<0.01,P<0.05)。安理申组(t=30.945,P=0.000)、灵芝中剂量组(t=25.639,P=0.000)和灵芝高剂量组(t=4.689,P=0.001)的血浆Ig G水平明显高于对照组。结论灵芝制剂可能改善AD小鼠行为学障碍,促进Apo A1、Apo E和Syt1的表达,抑制Aβ-40蛋白的表达,改善小鼠的自身免疫功能。

复方灵芝制剂对小鼠改善睡眠的实验研究

目的探讨复方灵芝制剂的改善睡眠作用。方法以0.16 g.kg-1BW、0.33g.kg-1BW和1.00g.kg-1BW 3个剂量组对小鼠每日经口灌胃,模型对照组给予蒸馏水。将动物分为3个实验组:直接睡眠实验和延长戊巴比妥钠睡眠时间实验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠实验、巴比妥钠睡眠潜伏期实验,灌胃30d,至完成各项测定。结果复方灵芝制剂对延长戊巴比妥钠睡眠时间实验结果为阳性;对戊巴比妥钠阈下催眠实验结果为阴性;对巴比妥钠睡眠潜伏期试验结果为阳性;对小鼠的体重增长无影响。结论复方灵芝制剂具有改善睡眠的作用。

高效液相色谱测定灵芝孢子油番茄红素复合制剂中麦角甾醇含量的方法及验证

建立了用高效液相色谱分析灵芝孢子油番茄红素复合制剂中麦角甾醇的方法。采用ZORBAX Eclipse Plus色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以甲醇为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为282 nm。方法学验证结果表明,麦角甾醇在1.01~100.75 mg·L^(-1)内呈良好的线性关系,R^(2)为0.9999,样品加标平均回收率为102.26%,RSD为1.28%。该方法简便,精密度和稳定性良好,可为灵芝孢子油番茄红素复合物制剂及其相关产品的质量控制方法提供参考。

复方虫草灵芝制剂缓解体力疲劳的研究

[目的]研究复方虫草灵芝制剂缓解体力疲劳作用。[方法]动物选用ICR小鼠,每批动物按体量随机分为低、中、高(0.166、0.333、1.000g/kg)3个剂量组和1个阴性对照组,每组10只。每天灌胃1次,连续经口给予受试物30d后,分别进行负重游泳试验、血清尿素测定、肝糖原测定和血乳酸测定。[结果]中、高剂量组小鼠负重游泳时间(sec)(分别为850±80、771±125)长于对照组(657±116),差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高3个剂量组肝糖原含量(mg/100g)(分别为1347±50、1852±134、1638±580),高于对照组(1275±306),其中中剂量组肝糖原含量与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高3个剂量组小鼠运动时血乳酸曲线下面积(mmol/L)(89.49±18.86、95.26±17.64、83.04±17.12)小于对照组(123.03±19.31),差异均有统计学意义(P<0.05),而各剂量组小鼠运动时血清尿素水平与对照组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。[结论]提示本品能延长小鼠负重游泳时间,增加小鼠肝糖原的含量和减少血乳酸曲线下面积;复方虫草灵芝制剂在本实验条件下具有缓解体力疲劳的作用。

复方灵芝制剂防治化学性肝损伤实验研究

目的通过实验操作探讨复方灵芝制剂防治化学性肝损伤的作用。方法分0.33、0.67、2.00g/kg3个剂量组对小鼠每日经口进行灌胃,受试样品为复方灵芝制剂,空白对照组和模型对照组给予蒸馏水。30d后将各组动物禁食16h,模型对照组及各剂量组动物按0.01mL/g一次灌胃给予四氯化碳(CCl4)染毒,各受试组染毒4h后继续给予受试样品。染毒24h后摘取眼球取血,分离血清,测定ALT、AST,同时处死动物,取肝脏进行组织病理学检查。结果模型对照组小鼠的ALT、AST含量比空白对照组高(P<0.05),低、中剂量组的ALT、AST值与模型对照组比较,有下降,差异呈显著性(P<0.05)。结论复方灵芝制剂具有防治CCl4化学性肝损伤的作用。

灵芝孢子油提取物复合制剂对酒精性肝损伤的保护作用

探讨灵芝(Ganoderma lucidum)孢子油提取物复合制剂对小鼠急性酒精肝损伤的保护作用。分别设定0.167 g·kg^(-1)、0.333 g·kg^(-1)、1.00 g·kg^(-1)三个剂量组,以及乙醇模型对照组和空白对照组。各剂量组经口灌胃给予受试物,溶剂对照组和乙醇模型组给予食用植物油。30 d后,用乙醇建立急性酒精性肝损伤小鼠模型。16 h后处死动物,测定肝组织中甘油三酯(TG)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA),同时取肝脏进行组织病理学检查。结果表明样品可以降低3个剂量组小鼠急性酒精性肝损伤后第16小时肝组织中TG含量和中剂量组MDA含量,肝脏组织病理学检查发现,乙醇模型对照组动物肝损伤程度高于溶剂对照组(P<0.05)。结论证明灵芝孢子油提取物复合制剂对急性酒精肝损伤具有辅助保护功能。

纳豆红曲灵芝复方制剂对高脂血症模型大鼠血脂、血凝及肠道菌群的影响

目的探讨纳豆红曲灵芝复方制剂对高脂血症模型大鼠血脂、血凝及肠道菌群的影响。方法高脂饲料喂养大鼠建立混合型高脂血症动物模型,设空白对照组、模型对照组,纳豆红曲灵芝复方制剂三个剂量组(0.33、0.67、2.0g·kg^(-1)),12只/组,空白对照组和模型对照组均给予同体积的灭菌纯化水,连续灌胃30d后,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)和高密度脂蛋白(HDL-C)的含量并计算动脉粥样硬化指数(AI)和冠心指数(R-CHR);测定血浆凝血四项:活化部分凝血活酶时间(APTT)、凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、纤维蛋白原(FIB);对各组大鼠粪样中乳酸杆菌及双歧杆菌的数量进行比较。结果与模型对照组相比,复方制剂低、中剂量组均可使大鼠血清TC、TG、LDL-C的含量及AI、R-CHR明显降低,高剂量组大鼠血清TG含量显著下降;中剂量组大鼠PT、TT显著延长,FIB含量明显降低;各剂量组大鼠粪便中乳酸杆菌和双歧杆菌的数量均显著增加。结论纳豆红曲灵芝复方制剂可降低高脂血症大鼠血脂,改善血凝系统,调节肠道菌群。

灵芝多糖工业分析方法的研究

先用乙醇沉淀法分离灵芝制剂中的灵芝多糖，用９０％乙醇洗涤后，以苯酚－硫酸法显色，产生的橙黄色物质在４９０ｎｍ波长处有最大吸收。溶液含糖量在０～８０μｇ／ｍｌ范围内，糖浓度与吸光度之间呈良好的线性关系。吸光度在显色后３８ｈ内稳定。本法具有试剂稳定，样品不需预先酸水解，操作简便，灵敏度高，精密度与准确度较好等优点，尤其适用于制剂中少量灵芝多糖的测定。

灵芝免疫药理研究进展

目的 综述灵芝免疫药理学方面的研究进展 ,为对灵芝免疫调节作用进一步深入研究和开拓其应用范围提供参考依据。方法 以近年来国内大量有代表性的文献为基础 ,并参阅国外相关资料 ,进行分析、整理和归纳 ,按照其药用部位 ,主要成分分别评述。结果 灵芝水煎提取制剂、灵芝发酵液、灵芝孢子粉、灵芝多糖及某些灵芝蛋白等均具有显著的免疫增强作用和免疫恢复作用 ,同时也有一定的免疫抑制作用。其中 ,对灵芝多糖的研究较多 ,尤其是对其细胞及细胞因子的免疫作用研究较为深入 ,基本上阐明了灵芝免疫调节作用的机理 ,揭示出灵芝“滋补强壮、扶正固本”的原因。结论 灵芝这味珍奇老药在提高机体免疫功能、抑制免疫损伤、增强体质、防治疾病方面 。

灵芝复方颗粒制剂改善睡眠的功效研究

目的探讨灵芝复方颗粒制剂改善睡眠的功效。方法将192只SPF雄性ICR小鼠随机分成1.60、1.07、0.53 g/kg BW 3个剂量组及阴性对照组,每组12只,分别进行直接睡眠试验、延长戊巴比妥钠睡眠时间试验、戊巴比妥钠阈下剂量催眠试验、巴比妥钠睡眠潜伏期试验4项试验,各试验剂量组小鼠灌胃(0.2 ml/10 g BW)给予灵芝复方颗粒制剂,阴性对照组灌胃给予等量蒸馏水,连续灌胃30 d。通过给予灵芝复方颗粒制剂观察小鼠直接睡眠时间;观察戊巴比妥钠诱导催眠基础上的小鼠睡眠时间;观察戊巴比妥钠协同作用下小鼠的入睡数(30 min内);观察巴比妥钠催眠基础上的小鼠入睡潜伏期。结果经口给予小鼠不同剂量的灵芝复方颗粒制剂30 d,对照组及3个剂量组均未发现有直接睡眠现象,与阴性对照组比较,1.60 g/kg BW组能使戊巴比妥诱导的小鼠睡眠时间明显延长(P<0.01),小鼠睡眠发生率无显著性差异(P>0.05),但呈现剂量反应关系,巴比妥钠诱导的小鼠睡眠潜伏期睡缩短(P<0.01),1.07 g/kg BW组能使戊巴比妥诱导的小鼠睡眠时间延长(P<0.05)。结论灵芝复方颗粒制剂对小鼠具有改善睡眠的作用。