灵芝及灵芝孢子提取物的抗肿瘤及对DNA拓扑异构酶作用的研究

目的:观察灵芝子实体水提物及醇提物混合品(灵芝提取物)、灵芝孢子粉提取物(油)的体内外抗肿瘤作用,并测定它们对DNA拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ的作用。方法:台盼蓝计数法、MTT法观察体外对肿瘤细胞的抑制作用;应用小鼠移植瘤模型研究体内抗肿瘤作用,同时测定荷瘤小鼠的胸腺指数及脾指数;DNA超螺旋解旋法测定拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ活性。结果:灵芝提取物对K562、HL60、SGC-7901细胞作用24h的IC50值分别为0.44mg/ml、0.39mg/ml、0.90mg/ml,灵芝孢子油对K562、HL60、SGC-7901细胞作用24h的IC50值分别为1.13mg/ml、2.27mg/ml、6.29mg/ml;体内实验中,对S180、H22移植瘤株的抑制率灵芝提取物4g/kg分别为39.1%、44.6%,灵芝孢子油1.2g/kg分别为30.9%、44.9%;灵芝提取物1g/kg和2g/kg对S180的抑制率分别为15.6%和19.0%,对H22的抑制率分别为28.8%和38.5%;灵芝提取物对荷瘤小鼠的免疫功能有一定的上调影响,灵芝孢子油则无明显作用;两者对拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ的活性均有抑制作用。结论:灵芝提取物、灵芝孢子油均具有体内外抗肿瘤作用,二者的抗癌机制与抑制拓扑异构酶Ⅰ、Ⅱ的活性有关。

灵芝孢子提取物对肺腺癌细胞顺铂化疗敏感性及TAZ表达的影响

目的探讨灵芝孢子提取物对肺腺癌H1299细胞顺铂化疗敏感性及具有PDZ结合域的转录共激活因子(TAZ)表达的影响。方法将肺腺癌H1299细胞分为H1299细胞组、顺铂组(顺铂40.0μg/ml)、灵芝孢子提取物组(灵芝孢子提取物80.0μg/ml)以及联合组(顺铂40.0μg/ml+灵芝孢子提取物80.0μg/ml);上述各组细胞置于37℃,5%CO 2培养箱培养。细胞计数试剂盒8检测细胞增殖,结晶紫染色检测细胞克隆形成数目,凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡情况,Transwell室检测细胞侵袭水平,伤口愈合试验测定细胞迁移率,RT-PCR法及Western blot法测定TAZ mRNA和蛋白表达水平。结果与H1299细胞组比较,顺铂组、灵芝孢子提取物组、联合组的OD值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜细胞数、迁移率、TAZ mRNA和蛋白表达水平明显降低,而凋亡率明显升高(P<0.05);与顺铂组和灵芝孢子提取物组比较,联合组的OD值、存活率、细胞克隆形成数目、穿膜细胞数、迁移率、TAZ mRNA和蛋白表达水平明显降低,而凋亡率明显升高(P<0.05)。结论灵芝孢子提取物对肺腺癌细胞顺铂化疗具有增敏作用,机制可能与灵芝孢子提取物能增强顺铂对肺腺癌细胞TAZ mRNA和蛋白表达的抑制有关。

灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物对小鼠急性胃溃疡的保护作用

目的探讨灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物对小鼠急性胃溃疡的影响。方法雄性ICR小鼠随机分为12组:对照组,模型组,奥美拉唑(阳性药,4 mg·kg^(−1))组,灵芝孢子提取物低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 g·kg^(−1))组,破壁灵芝孢子粉低、中、高剂量(0.6、1.2、2.4 g·kg^(−1))组,灵芝孢子油低、中、高剂量(0.2、0.4、0.8 g·kg^(−1))组,每组20只。ig给药,每天1次,对照组和模型组给予等体积的生理盐水。连续给药7 d后,禁食12 h,除对照组外,每组随机选取10只小鼠ig无水乙醇(10 mL·kg^(−1))建立急性胃溃疡模型,1.5 h后取材;每组余下10只小鼠ig吲哚美辛(40 mg·kg^(−1))建立急性胃溃疡模型,3 h后取材。观察小鼠的一般状况、胃出血和溃疡情况,进行胃损伤评分,计算损伤抑制率和损伤发生率。结果各组小鼠给药过程中无异常。小鼠给予无水乙醇后,模型组和奥美拉唑组10 min后开始出现行动变缓,肢体活动不协调,呼吸加深、频率减慢等症状,而给予灵芝孢子提取物、破壁灵芝孢子粉和灵芝孢子油的小鼠在30 min后才陆续出现症状;给予吲哚美辛的小鼠自主活动减少,各组之间无差别;对照组小鼠行为活动如常。与对照组比较,小鼠经无水乙醇、吲哚美辛ig导致非常明显的胃溃疡,胃损伤评分显著升高(P<0.01),损伤发生率为100%;与模型组比较,预防性给予灵芝孢子提取物、破壁灵芝孢子粉、灵芝孢子油可明显降低胃出血或溃疡等胃黏膜损伤,其中灵芝孢子提取物高剂量组、破壁灵芝孢子粉组、灵芝孢子油组的胃损伤评分显著降低(P<0.01),损伤抑制率显著提高(P<0.01),损伤发生率明显降低。结论灵芝孢子油、破壁灵芝孢子粉及灵芝孢子提取物能有效抑制小鼠急性胃溃疡的发生,灵芝孢子油效果最佳,破壁灵芝孢子粉次之,并且对于无水乙醇导致的急性胃溃疡抑制作用尤为显著。

灵芝孢子油及灵芝提取物孢子油对乳腺癌血管生成调节因子的作用

目的探讨灵芝孢子油及灵芝提取物孢子油对人源高恶性乳腺癌血管生成调节因子的作用。方法不同剂量的灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油分别刺激体外培养的人源高恶性乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞及MDA-MB-231细胞制作的荷廇小鼠,Western blotting检测表皮生长因子受体(EGFR)的蛋白表达变化,Real-time PCR检测肿瘤血管生成相关因子EGFR、血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶(MMPs)、血小板反应素-1(TSP-1)、血小板衍生因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)转录水平的基因表达变化。结果灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油均可在体内和体外抑制人源高恶性乳腺癌细胞MDA-MB-231的EGFR蛋白表达,且有剂量依赖性;均可在体内和体外抑制VEGF RNA表达,增强血管生成抑制因子TSP-1 RNA表达;灵芝提取物孢子油比灵芝孢子油的作用更为显著。结论灵芝孢子油、灵芝提取物孢子油均有抑制肿瘤血管生成因子表达和促进血管生成抑制因子表达的作用,其中灵芝提取物孢子油比灵芝孢子油的作用更为显著。

赤灵芝孢子粉水溶性提取物(肌生注射液)对小鼠的催眠镇静作用

目的 :研究赤灵芝孢子粉水提物 (肌生注射液 )对小鼠中枢神经系统的作用。方法 :以翻正反射消失出现时间作为睡眠时间 ,观察不同剂量和给药方式下肌生液对小鼠戊巴比妥钠和巴比妥钠睡眠时间及自主活动等的影响。结果 :皮下注射肌生液可明显延长小鼠戊巴比妥钠和巴比妥钠睡眠时间 ,且有剂量效应关系。肌生液亦可诱导注射阈下剂量的戊巴比妥的小鼠入睡。每日注射具有镇静作用剂量的肌生液一次连续 8天不产生依赖性 ,而安定连续给药 8天后产生依赖性。肌生液可明显减少小鼠的自主活动。结论 :灵芝孢子粉水提物对小鼠中枢神经系统具有镇静催眠的效果。

灵芝孢子油提取物复合制剂对酒精性肝损伤的保护作用

探讨灵芝(Ganoderma lucidum)孢子油提取物复合制剂对小鼠急性酒精肝损伤的保护作用。分别设定0.167 g·kg^(-1)、0.333 g·kg^(-1)、1.00 g·kg^(-1)三个剂量组,以及乙醇模型对照组和空白对照组。各剂量组经口灌胃给予受试物,溶剂对照组和乙醇模型组给予食用植物油。30 d后,用乙醇建立急性酒精性肝损伤小鼠模型。16 h后处死动物,测定肝组织中甘油三酯(TG)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA),同时取肝脏进行组织病理学检查。结果表明样品可以降低3个剂量组小鼠急性酒精性肝损伤后第16小时肝组织中TG含量和中剂量组MDA含量,肝脏组织病理学检查发现,乙醇模型对照组动物肝损伤程度高于溶剂对照组(P<0.05)。结论证明灵芝孢子油提取物复合制剂对急性酒精肝损伤具有辅助保护功能。

灵芝孢子粉破壁技术、质量分析与深加工相关研究进展

破壁灵芝孢子粉为一种灵芝深加工产品,具有多种药理学活性,更易被人体吸收。灵芝孢子的破壁方法包括生物化学法、物理法和机械法等,工业生产多综合利用多种方法。破壁灵芝孢子粉的质量分析还没有统一的国家标准,灵芝孢子粉质量可以参考地方标准进行综合评价,还可以参考近期发表的一些分析方法。灵芝孢子粉提取物产品以孢子油为主,其它产品也有研发并推出市场。药理学研究表明,灵芝孢子油、灵芝孢子粉水提物和醇提物均具有抗癌活性,有良好的应用前景。

免疫增强调节对2型糖尿病肾病Ⅲ期微炎症状态的影响

目的观察免疫增强调节治疗对2型糖尿病肾病Ⅲ期患者微炎症状态的影响。方法选取54例2型糖尿病肾病患者，随机分为对照组26例和治疗组28例。对照组注射诺和灵30R，口服ACEI或ARB；治疗组在对照组治疗的基础上口服阿法骨化醇及灵芝孢子提取枥疗程均为24周。观察治疗前后患者CRP、IL-6、IL-10、TGF—β表达水平，IgA、IgM、IgG、C3、C4的变化。结果经24周治疗，治疗组CRP、IL-6、TGF—B水平显著降低，IL-10升高显著，IgA、IgM、IgG、C3、C4指标升高，与对照组比较，差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论免疫增强调节治疗可提高2型糖尿病肾病Ⅲ期患者免疫功能，抑制微炎症状态。