苯酚-硫酸法测定灵芝菌丝多糖含量的研究

目的:建立紫外-可见分光光度法测定灵芝菌丝中多糖含量的方法。方法:以无水葡萄糖为对照品,苯酚和硫酸为显色剂,在485nm波长处测定灵芝菌丝体中多糖含量。结果:灵芝菌丝中多糖含量0~0.11520 mg范围内线性关系良好(R2=0.9992),精密度RSD为1.42%。样品溶液在配制后12 h内稳定性较好,平均加标回收率为100.61%,RSD为0.97%。结论:该方法方便快捷,重现性好,结果可靠,适用于测定灵芝菌丝体中多糖含量。

灵芝菌丝水提物活性成分分析研究

目的:研究分析灵芝菌丝水提物的活性成分及含量。方法:按照国家药典及有关标准检测方法,检测灵芝菌丝水提物多糖、三萜及甾醇、灵芝酸、腺苷、氨基酸、微量元素、农药残留及毒素的含量。结果:灵芝菌丝水提物多糖质量分数为0.43%,三萜及甾醇质量分数为0.18%,灵芝酸A、D、F、G及腺苷质量分数分别为7.2μg/g、6.9μg/g、32.0μg/g、12.6μg/g、42.1μg/g,含有16种氨基酸,总质量分数为13.7 g/100 g,含硒、硼、锌等12种微量元素,农药残留及黄曲霉毒素未检出。结论:灵芝菌丝水提物无毒安全,含有多糖、三萜、甾醇、灵芝酸等多种活性成分,可被开发为一种食品新资源。

灵芝菌丝体多糖含量的准确测定

灵芝菌丝体由于从培养基中夹带一定的糖类物质 (主要是蔗糖 ,淀粉 ) ,其有效灵芝多糖含量的测定受到较大影响 ,该文介绍I2 DMSO溶液法除淀粉 ,先用CaCl2 溶液糊化淀粉 ,再用I2 DMSO溶液在超声、6 5℃条件下溶解淀粉 ,后继用去离子水在 85℃下提取灵芝多糖 ,最后用标准灵芝菌丝体求得校正系数来校正溶解在I2 DMSO溶液中的灵芝多糖 ,从而比较准确地测定灵芝多糖的含量。

灵芝菌丝体深层液体发酵培养基研究

探讨了灵芝 (GanodermaLucidum)菌丝体深层液体培养所需的营养条件。结果表明 ,最适碳源单糖为葡萄糖 ,二糖为蔗糖 ,多糖为玉米粉、小麦面粉、麸皮粉或土豆粉 ;最适氮源为硫酸铵、黄豆饼粉、花生饼粉或蛋白胨 ;最佳碳氮比为 (2 3.6～ 31.1)∶1;K+、Mg2 +、P5+、VB1、VB2 是菌丝体生长的必需营养成分 ;碳源、氮源最适浓度组合为玉米粉 5 %、黄豆饼粉 0 .5 6 2 5 %、葡萄糖 5 %、蛋白胨 0 .5 2 6 5 %、蔗糖 5 % ,按此培养基进行培养 ,灵芝菌丝体的产量为 2 8.317g/L。

灵芝菌丝体富硒条件优化及其硒多糖抗氧化活性研究

利用正交试验对灵芝菌丝体液体发酵富硒条件进行优化,研究培养基中不同碳源、氮源和亚硒酸钠浓度对菌丝体生物量、硒含量、富硒率以及胞外酶活性的影响,此外还对硒多糖的抗氧化活性进行了初步研究。结果表明:当培养基中碳源为20%马铃薯、氮源为2%麸皮、Na2SeO3浓度为5 mg/L时,培养基中菌丝生物量最高达到3.86 g/L,硒含量最高为0.576 mg/g,富硒率也达到最高为44.47%。Na2SeO3对菌丝生长的影响大于碳源和氮源;同样的Na2SeO3对胞外酶活性的影响最大,最优组的POD和PPO酶活性都较其他组高,且随着Na2SeO3浓度的升高,其酶活性逐渐降低。富硒灵芝菌丝体粗多糖都具有较强的体外抗氧化活性,通过相关性分析发现,其粗多糖的抗氧化活性与硒含量、富硒率具有显著的正相关。显示硒多糖在食品和药品等领域具有良好的开发利用前景。

灵芝菌丝体多糖通过增强小鼠巨噬细胞功能诱导HL-60细胞凋亡

目的探讨灵芝菌丝体粗总多糖（ＭＧＬＰ１）、总多糖（ＭＧＬＰ２）作用的小鼠腹腔巨噬细胞培养上清对ＨＬ－６０细胞凋亡的影响。方法ＭＧＬＰ１、ＭＧＬＰ２作用于小鼠腹腔巨噬细胞，生物法检测培养上清中ＴＮＦ－α的活性；再将共培养上清（ＭＧＬＰ１－ΜΦ－ＣＭ、ＭＧＬＰ２－ΜΦ－ＣＭ）作用于ＨＬ－６０细胞，ＭＴＴ法检测ＭＧＬＰ１－ΜΦ－ＣＭ、ＭＧＬＰ２－ΜΦ－ＣＭ对ＨＬ－６０细胞增殖的抑制作用；琼脂糖凝胶电泳法和流式细胞检测法定性定量检测它们对ＨＬ－６０细胞凋亡的诱导作用。结果ＭＧＬＰ１、ＭＧＬＰ２作用于腹腔巨噬细胞后，可以明显增强培养上清中ＴＮＦ－α的活性；其共培养上清可以明显地抑制ＨＬ－６０细胞的增殖并诱导该细胞凋亡（Ｐ＜０．０１）。结论ＭＧＬＰ１、ＭＧＬＰ２可以通过小鼠腹腔巨噬细胞，促进ＴＮＦ－α分泌，诱导ＨＬ－６０细胞凋亡。

灵芝菌丝发酵提取液减肥作用的初步探讨

目的 :对灵芝菌丝发酵提取液的减肥作用进行初步研究。方法 :用高营养饲料建立营养性肥胖小鼠模型后 ,治疗组用灵芝菌丝发酵提取液灌胃 ,对照组用无菌生理盐水 ,观察体重变化。结果 :灵芝菌丝发酵提取液能明显降低肥胖小鼠体重。讨论 :灵芝菌丝发酵提取液具有减肥、降低体重作用。

灵芝菌丝体多糖的化学组成和溶液性质

用磷酸盐缓冲液在 80℃时从灵芝菌丝体中提取出多糖 -蛋白质缀合物 LM-A.成分分析表明 ,GLM-A主要由葡萄糖组成 ,蛋白质含量为 1 3 % . GLM-A在 1∶ 1水稀释的饱和镉乙二胺溶液中 3 0℃时的特性粘数 [η]和均方根旋转半径〈S2 〉1 /2 的分子量依赖关系分别为 [η]=5.1× 1 0 - 2 M0 .6 0w ( cm3· g- 1 )和〈S2 〉1 /2 =3 .9×1 0 - 2 M0 .5 0w ( nm) .按照 Yamakawa-Fujii-Yoshizaki蠕虫状圆筒模型的粘度理论和 Bohdanecky表达式 ,求得GLM-A的分子参数为 :单位围长摩尔质量 ML=( 53 0± 1 0 ) nm- 1 ,持久长度 q=( 2 .8± 0 .2 ) nm.链直径 d=0 .75nm.实验结果表明 。

灵芝菌丝体碱提多糖对小鼠细胞免疫的作用

体外灵芝菌丝体碱提多糖对脾细胞增殖反应和巨噬细胞的吞噬能力均有促进作用,但显示出低剂量增强、高剂量抑制的双向调节能力。体内实验表明灵芝菌丝体碱提多糖高、低剂量组灌胃给药在第10天时,能够最大增强淋巴细胞增殖反应。同时,显著升高CD+4T细胞的百分率,而对CD+8T细胞的百分率无影响,从而改善CD+4T/CD+8T细胞的比值,促进荷瘤小鼠恢复正常的免疫平衡状态。因此,灵芝菌丝体碱提多糖对小鼠体内外细胞免疫有直接作用,但有剂量和时间依赖性。

超声波法提取灵芝菌丝体总三萜的工艺

采用超声波浸提法从灵芝菌丝体中提取总三萜,以熊果酸作为标准品,采用分光光度计法测定其含量。以正交试验设计优化工艺条件,在85%的乙醇溶液中浸泡2h,150W功率下超声提取30min,从灵芝菌丝体中提取的总三萜最多。

镧和铈对灵芝菌丝生长的影响

La（NO3）3和Ce（NO3）3在浓度不同时对灵芝菌丝的生长及其培养液中的残糖量的影响不同。2mmol／LLa3＋和Ce3＋能抑制灵芝菌丝的生长，抑制率分别为32．58％和42．76％；低浓度（≤1mmol／L）的La3＋和Ce3＋能促进菌丝生长，以0．5mmol／LLa3＋和Ce3＋的促进率最高，分别达到35．21％和57．01％，且随浓度的降低这种促进作用逐渐降低。菌丝生长量与培养液中的残糖量没有明显的相关，只有生长量最大的0．5mmol／L的La3＋和Ce3＋的培养液中的残糖量比对照低，其余皆比对照高。

灵芝菌丝体大豆固态发酵条件优化

采用大豆、紫云豆、扁豆、白豌豆、青豆、黑豆、青豌豆、绿豆、花云豆、红云豆、白云豆等11种豆类作为灵芝发酵的天然固态培养基,通过接种灵芝进行发酵,对这些天然豆类培养基进行了筛选,并且对培养基厚度、接种量、培养时间以及培养温度等发酵条件进行了优化。结果表明:在所有豆类中,以大豆作为培养基进行灵芝固态发酵时,所获得的游离氨基酸的含量最高,达1 695.5μg/g;灵芝菌丝体降解大豆产游离氨基酸最佳发酵条件为:培养基装量50 g/250mL、接种量10%、培养温度30℃、发酵时间6 d。

灵芝菌丝中三萜酸的提取研究

采用经典回流法试验了灵芝(Ganoderma lingzhi)发酵菌丝体中三萜酸的提取工艺。单因素试验表明:灵芝菌丝三萜酸最佳提取溶剂为无水乙醇、液料比为10:1(mL/g)、提取时间2 h、提取次数为2次。在单因素试验基础上,采用Box-Behnken试验设计结合响应面分析法对灵芝菌丝三萜酸的提取工艺进行优化,建立了预测三萜酸提取的多项式模型:Y=0.52+0.022A+0.027B+0.064C+0.021AB-0.013AC+0.010BC-0.056A^2-0.094B^2-0.057C^2,经响应面最优分析,菌丝三萜酸提取的最优工艺参数为液料比为11:1(v/m,mL/g)、提取时间2 h、提取次数3次。在此条件下,灵芝菌丝三萜酸提取率可达0.537mg/g干菌丝,与预测值(0.542 mg/g干菌丝)相比,相对标准偏差为0.65%。

富锗灵芝菌丝体中2种同工酶及脂肪酸、无机元素含量分析

目的 研究富锗灵芝菌丝体中超氧物歧化酶、酯酶 2种同工酶及脂肪酸、无机元素含量的变化。方法 聚丙烯酰胺凝胶电泳分析同工酶谱 ,气相色谱 质谱联用 (GC MS)测定脂肪酸 ,电感耦合等离子体发射光谱分析 (ICP AES)测定无机元素。结果 富锗灵芝菌丝体与普通灵芝菌丝体比较 :①同工酶谱存在明显差异 ;②多不饱和脂肪酸相对含量提高 ;③除锗、钾含量提高外 ,其余 7种无机元素含量均降低。结论 锗能促进灵芝菌丝体超氧物歧化酶、酯酶的活性和提高其多不饱和脂肪酸含量。

超声波提取灵芝菌丝体中灵芝酸的研究

目的:利用超声波对灵芝菌丝体中灵芝酸的提取工艺进行研究。方法:以单位灵芝菌丝体中灵芝酸的提取量为指标,采用单因素分析和正交实验,对影响灵芝菌丝体中灵芝酸提取的乙醇浓度、超声波浸提时间、浸提pH和料液比四个因素进行研究。结果:乙醇浓度100%,超声波浸提时间90min,pH2·5,加12倍量乙醇浸提为最佳工艺条件,所提取灵芝酸含量达46·7mg·g-1。结论:采用超声波提取技术可以较大幅度提高灵芝酸的提取得率,大大缩短提取时间。

鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质对奶牛产奶品质和血液生理生化指标的影响

研究旨在观察鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质对奶牛产奶品质和血液生理生化指标的影响。选取产奶量相近,胎次(1~2)胎,泌乳中期,体重无显著性差异,遗传组成基本相似的荷斯坦奶牛10头,按统计学原理,随机分为试验组和对照组,每组各5头。试验组每天每头添加3.0 kg鲜菌草与灵芝菌丝发酵菌质替代等量的青贮,对照组饲喂基础日粮。试验组除饲喂日粮不同外,其余条件都与对照组保持一致。结果表明:试验组牛奶中乳脂率、乳蛋白率、乳糖率比CK分别提高了2.24%、0.99%、0.42%,体细胞数降低了4.46%,但差异不显著(P>0.05);菌质对奶牛血清中的总蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三脂、总胆固醇、葡萄糖、尿素、谷丙转氨酶、碱性磷酸酶、磷等生化指标基本无影响,虽然试验组中Ca含量比CK含量高0.23 mmol/l,差异显著(P<0.05),但试验前后两组血清Ca含量均在正常范围内。鲜菌草与灵芝菌丝发酵后,菌草中的纤维素和半纤维素等被大量降解,而蛋白质、脂肪的含量却提高了,并同时产生了大量的代谢产物(如氨基酸),提高了奶牛的采食积极性和消化率;同时,灵芝菌丝体含有大量的菌丝多糖和三萜,可以提高奶牛免疫力,进而提高其产奶品质。

发酵灵芝菌丝体对小鼠免疫性肝损伤及免疫功能的影响

目的:研究灵芝菌丝体对小鼠免疫性肝损伤及免疫功能的影响。方法:采用卡介苗(BCG)+脂多糖(LPS)诱导的免疫性肝损伤模型、环磷酰胺(Cy)所致小鼠迟发性超敏反应(DTH)增高或低下模型和刀豆素(ConA)或脂多糖(LPS)诱导淋巴细胞增殖模型进行观察。结果:灵芝菌丝体(0.9g/kg,qd×10d,ig)可使免疫性肝损伤小鼠升高的血清ALT(P<0.01)、AST(P<0.05)和脾脏指数降低(P<0.05),并使小鼠肝脏损伤性变化减轻。灵芝菌丝体一方面(0.3,0.6,0.9g/kg,ig,qd×5d)可抑制亢进小鼠细胞免疫功能,使小鼠DTH减轻(P<0.05,P<0.01和P<0.01);另一方面(0.6,0.9g/kg,ig,qd×5d)也可提高低下小鼠细胞免疫功能,使小鼠DTH增强(P<0.05和P<0.01)。并且,灵芝菌丝体(0.3,0.6,0.9g/kg,ig,qd×10d)可抑制刀豆素ConA诱导的T淋巴细胞增殖(P<0.05,P<0.01和P<0.01)。结论:灵芝菌丝体具有细胞免疫调节功能,对免疫性肝损伤有明显的保护作用。

灵芝菌丝体破碎处理方法的比较

灵芝是一种珍贵的药用真菌,含有多种生物活性物质,如灵芝多糖、三萜类化合物,同时具有较高的产β-葡萄糖苷酶活性。为了提高灵芝菌丝体中β-葡萄糖苷酶的利用效率,需要对菌丝进行破碎处理而使酶释放出来。本文研究了通过打浆处理、升温自溶、反复冻融和超声破碎的方式来提取灵芝菌丝体中的β-葡萄糖苷酶,并比较了不同方法的提取效果。结果表明,以匀浆和超声破碎结合的组合方法最佳,先在冰浴中匀浆处理1 min,在200 W下再以每超声1 min间歇1 min的方式超声破碎5次,β-葡萄糖苷酶的总活力可以达到3.116 U/m L,比直接提取提高了112.26%。显微镜观察到匀浆后菌丝球可全部分散开,同时菌丝被不同程度的切断,再经超声破碎处理,菌丝几乎全部破碎。

灵芝菌丝体多糖对K562细胞的抑制作用及免疫调节作用研究

目的研究灵芝菌丝体多糖(ganoderma lucidum mycelia polysaccharides,GLMP)对K562白血病细胞及小鼠体外脾淋巴细胞增殖的影响。方法 MTT法检测不同浓度GLMP对K562白血病细胞增殖及对小鼠体外脾淋巴细胞增殖的作用;血细胞计数方法绘制生长曲线。结果不同浓度的GLMP处理K562细胞48h后,50mg/L及以上浓度抑制率与对照组比较差异有统计学意义(P<0.01),而且随浓度的增加抑制率增加。作用48h的IC50为270.2mg/L。生长曲线也表明随时间的延长和浓度的增加,细胞增殖能力下降。GLMP作用小鼠体外脾淋巴细胞48h后,在多糖浓度为50、100mg/L和25、50、100mg/L时能显著刺激静止性和激活型细胞的增殖。结论 GLMP可以抑制K562白血病细胞增殖而且具有免疫调节能力。

富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件优化

以富硒大豆为原料,采用液体发酵技术对富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件进行研究。富硒大豆经浸泡、磨浆、过滤、煮沸后接种灵芝菌种发酵,以水解度为指标,通过单因素和正交试验对温度、初始pH值、摇瓶转速及豆浆质量分数等发酵条件进行优化。结果表明:富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵最佳条件为发酵温度28℃、培养基初始pH5.8、摇瓶转速160r/min、豆浆质量分数5%、发酵时间132h。在最佳发酵条件下,大豆蛋白的水解度达27.8%、大豆多肽产量7.0178mg/L、多糖产量1.75mg/L、灵芝酸产量0.66mg/L。