大肠埃希菌O_(111)黏附牦牛子宫内膜上皮细胞致炎模型的建立

为建立大肠埃希菌O_(111)黏附牦牛子宫内膜上皮细胞的致炎模型,体外分离、培养牦牛子宫内膜上皮细胞,培养5d后,加入大肠埃希菌O_(111),通过计算细胞上细菌的黏附数量研究细菌数量和孵育时间对黏附效果的影响,得到最佳黏附条件,通过ELISA法测定细胞培养上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL^(-1)β)的质量浓度变化来鉴定模型。结果表明,大肠埃希菌为1×10~5 CFU/mL、孵育时间为120min是黏附的最佳条件。ELISA法检测结果表明,与对照组相比,60、90、120min组TNF-α、IL-6、IL^(-1)β的质量浓度显著升高,致炎效果明显,表明致炎模型建立成功。

肠球菌小鼠腹膜炎模型的建立

目的:建立肠球菌毒力相关性小鼠腹膜炎模型,用于肠球菌类毒力因子的研究。方法:用粪肠球菌标准毒株OG1RF和粪肠球菌sprE基因缺陷突变株来建立小鼠腹膜炎模型,通过腹膜炎指标的检测来判断毒力下降情况。结果:突变株在小鼠腹膜炎模型中的半数致死量(LD50)提高了7倍,存活率也明显高于标准株。6h和12h外周血白细胞变化低于标准株,6h腹水TNF-α水平和活化TNF-α低于标准株组。结论:肠球菌毒力相关性小鼠腹膜炎模型建立成功,可用于肠球菌其它可能毒力因子的研究。

实验性自身免疫性葡萄膜炎模型的研究进展

葡萄膜炎是眼科常见的致盲性眼病之一。实验性自身免疫性葡萄膜炎模型(EAU)是研究人类葡萄膜炎乃至全身自身免疫性疾病的一种实验动物模型。EAU模型通过视网膜抗原诱导造模,以眼部视网膜及周围相关组织为靶器官,是研究葡萄膜炎机制以及检验新型抗感染及免疫抑制类药物的重要工具。文章就实验性自身免疫性葡萄膜炎模型的造模方法、基本病程、评价方法、模型机制以及研究前景等方面进行综述。

金黄色葡萄球菌小菌落突变株感染小鼠乳房炎模型的建立

为了建立由金黄色葡萄球菌小菌落突变株（small colony variants，SCVs）诱发感染乳房炎动物模型，本试验取40只分娩6-8d的BALB／c小鼠，随机分成8组（n=5），分别为阴性对照、生理盐水组和不同剂量金黄色葡萄球菌SCVs及金黄色葡萄球菌质控菌株（1．0×10^3、1．0×10^4、1．0×10^5CFU／mL）试验组，对生理盐水组及各试验组小鼠第4对乳腺注射生理盐水和对应剂量的菌液（50mL／只），注射后24h解剖观察病理变化，一侧乳头制作石蜡切片，另一侧研磨后用ELISA检测试剂盒检测组织匀浆上清中的TNF-α含量。结果显示，注射菌液的试验组，小鼠均出现不同程度的临床症状，乳腺出现不同程度的炎性症状和病理变化。同一注射剂量下，金黄色葡萄球菌质控菌株较金黄色葡萄球菌SCVs病理变化严重，通过SPSS等软件对试验数据进行统计分析后得出，高浓度处理组金黄色葡萄球菌质控菌株的TNF-α表达量极显著高于金黄色葡萄球菌SCVs（P〈0．01）。结果表明，金黄色葡萄球菌及其SCVs均可用来建立小鼠乳房炎模型，且金黄色葡萄球菌SCVs引起的情况较其正常株轻微，这一结果为由金黄色葡萄球菌SCVs引起的奶牛慢性乳房炎的预防和控制及其致病机制的研究提供了新的材料和有益的探索，为SCVs与慢性乳房炎更深层次关系的研究奠定基础。

牛源地衣芽胞杆菌诱导小鼠临床乳房炎模型中热休克蛋白和核因子-κB表达上调

目的：为进一步认识奶牛乳腺炎发生的免疫病理机制和寻找更理想的防治方法提供基础研究数据。方法：从采集回来的奶牛奶样中用传统细菌培养方法和分子学方法分离鉴定主要病原菌，挑选其中地衣芽胞杆菌感染小鼠乳腺组织，H-E染色分析感染后小鼠乳腺组织变化，免疫组织化学方法分析热休克蛋白70（HSP70）和核因子-KB（NF-kB）在感染小鼠体内的表达。结果：感染后小鼠乳腺出现明显的炎症症状，组织病理学观察显示腺泡腔内有大量嗜中性粒细胞浸润。实验组中HSP70和NF-kB表达量比生理盐水组和空白组均有增加。结论：成功通过地衣芽胞杆菌诱发建立实验性乳房炎小鼠病理模型，实验组中HSP70和NF-kB表达量的增加说明其参与细菌感染小鼠乳腺组织后的病理过程。

转化医学理念指导下的芍药甘草汤对实验性免疫性葡萄膜炎模型大鼠作用机制研究

目的 ：观察不同配比的芍药甘草汤对实验性自身免疫性葡萄膜炎（EAU）大鼠眼部体征、血清、脾脏及腹股沟淋巴结IL-17的影响,探讨芍药甘草汤干预葡萄膜炎的机制。方法：采用光感受器间维生素A类结合蛋白（IRBP）混合完全弗氏佐剂（CFA）及结核杆菌反复3次皮下注射建立EAU大鼠模型,不同配比的芍药甘草汤灌胃干预;采用数码裂隙灯动态观察免疫后各组大鼠的眼部炎症表现;ELISA法检测白细胞介素-17（IL-17）表达量的变化。结果：不同配比的芍药甘草汤均可减轻EAU大鼠眼部炎性病变,不同程度的恢复大鼠体内IL-17表达,且以3∶1组效果佳。结论：芍药甘草汤以3∶1配比可以有效减轻葡萄膜炎眼部的炎症改变,其机制可能与下调致炎因子IL-17表达有关。

家兔金黄色葡萄球菌性乳房炎模型的建立及中药组方治疗试验

选择泌乳期(7～10日)家兔,用104CFU、106CFU、108CFU三个不同浓度的金黄色葡萄球菌悬液人工诱导家兔乳房炎模型,观察临床表现,耳缘静脉采血进行血常规检测,确定106CFU为建立乳房炎模型的最佳剂量。造模后,分别采用不同剂量的中药组方制剂,通过乳池灌注和肌肉注射两种方式治疗患病家兔,观察临床治疗效果并检测血常规,确定乳池灌注和肌肉注射的最佳治疗剂量分别为35mg/乳区、100μg/kg,治愈率均为100%(8/8)。

清温消热饮对小鼠LPS致炎模型血清中炎性因子的影响

为了解促炎、抗炎细胞因子在小鼠LPS致炎模型中的动态变化,探讨中药方剂清温消热饮的抗炎治疗作用,采用酶联免疫法测定112例用LPS致小鼠急性炎症模型治疗过程中血清中促炎因子(TNF-α、IL-1β、PGE2)、抗炎因子(IL-10)含量。与LPS致小鼠急性炎症模型组比较:清温消热饮组在18、24 h血清中IL-1β含量明显降低,差异显著(P<0.05);清温消热饮组在6、12、18 h血清中TNF-α含量明显降低,6、18 h差异显著(P<0.05),12 h差异极显著(P<0.01);清温消热饮组血清中的PGE2含量均低于模型组,在6、18、24、36 h时血清中的PGE2含量明显降低,差异极显著(P<0.01);清温消热饮组在18、48 h血清中IL-10含量明显升高,差异极显著(P<0.01)。同时,清温消热饮组与地塞米松组在各时间段血清中TNF-α、IL-1β、IL-10、PGE2含量无显著差异(P>0.05)。结果表明,清温消热饮在急性炎症模型中能有效降低血清促炎因子TNF-α、IL-1β、PGE2含量水平,提升抗炎因子(IL-10)含量水平以表现出明显的抗炎作用。

金黄色葡萄球菌感染泌乳犬建立乳房炎模型的初步研究

为研究犬的金黄色葡萄球菌乳房炎病理模型,选择15只分娩10~12d的北京犬随机分成3组,经乳头导管对第3对乳腺分别注射1m L的生理盐水、1.0×105cfu/m L和1.0×106cfu/m L的金黄色葡萄球菌,观察乳腺组织的外形、组织切片的变化,并对乳汁中细菌分离计数。在攻毒前2h、攻毒后6h、12h、36h、48h分别检测血清中乳酸脱氢酶（LDH）、谷草转氨酶（GOT）、白蛋白（SA）含量。结果显示,攻毒后36h,犬出现明显的临床症状,乳腺出现不同程度的炎性症状,组织病理学显示血管、乳腺泡腔及间质有大量炎性细胞浸润,泡腔间隔增宽;从攻毒的乳腺中分离到相应的金黄色葡萄球菌;乳酸脱氢酶活性在攻毒后6~48h显著升高（P〈0.05）,谷草转氨酶活性在攻毒6~36h后显著升高（P〈0.05）,白蛋白在攻毒6~12h后显著升高（P〈0.05）。结果表明,金黄色葡萄球菌能够诱发犬试验性乳房炎。

人工诱导家兔实验性乳房炎模型的建立

将48只分娩后7 d的健康新西兰泌乳家兔随机分成空白对照组(T1组)、金黄色葡萄球菌组(T2组)和大肠杆菌组(T3组),分别按每个乳腺0.5 m L量向家兔乳头管内灌注无菌肉汤、金黄色葡萄球菌菌液和大肠杆菌菌液,并于灌注前2 h和灌注后6 h、12 h、24 h、48 h、72 h、5 d、7 d,采集家兔耳缘静脉血和乳腺组织,测定全血中WBC、LYM和GRA总数以及血清中CRP含量。结果显示:家兔血液中WBC、LYM和GRA总数出现了相应的变化,T2组和T3组血清中的CRP含量有相应程度的升高,表明机体出现炎症反应。

小鼠腹膜炎模型下血小板的生物学特征及其转录组变化

作为血液中最小的无核血细胞,血小板除具有经典的止凝血功能外,在调节固有免疫和适应性免疫方面也发挥着重要作用。但是,对于血小板参与免疫调节的分子机制,目前研究相对较少。通过给小鼠腹腔注射热灭活的大肠杆菌构建了急性炎症模型,并借助血常规、流式细胞术等实验方法检测了炎症条件下腹腔免疫细胞以及外周血细胞的动态变化。研究发现,在感染早期小鼠外周血中性粒细胞能快速迁移至腹腔参与炎症反应,同时,血小板的数目和大小在感染早期也会发生显著变化。进一步的RNA-Seq分析发现,小鼠血小板的转录组在感染后发生显著改变,其中,免疫反应相关基因显著上调,血小板表面黏附分子的表达也显著增强。研究结果揭示了急性炎症条件下血小板转录组的变化,为了解血小板免疫功能的潜在分子机制提供了新的角度。

虎纹镇痛肽(HWAP-I)在大鼠蜜蜂毒致炎模型中的镇痛作用

研究了在蜜蜂毒致炎模型中虎纹镇痛肽 (HWAP I)的镇痛作用 .HWAP I有 6个剂量组 (n =10 ) ,分别为 0 .1、1、10、2 5、5 0、75 μg/kg .生理盐水作空白对照 .从 10 μg/kg开始不同剂量组表现不同程度的镇痛效果 (P<0 .0 5 ) ,且有一定的量效关系 ;同时用 2 5 μg/kg芋螺毒素SNX III做阳性对照 ,结果表明 2 5 μg/kgSNX III的镇痛效果介于 2 5 μg/kg与 5 0 μg/kgHWAP I之间 .计算得到HWAP I在给药后 1h半有效剂量ED50 大约是 30 μg/kg .

黄苓甙在吸烟致炎模型中能通过抑制NF-κB减弱炎症反应

黄苓甙是植物黄苓根中的提取物。许多研究显示黄苓甙有抗炎、抗菌、抗病毒活性。将大鼠暴露在香烟的烟雾（cigarette smoke,CS）中建立慢性阻塞性肺疾病（chronic obstructive pulmonary disease,COPD）模型,36只SD大鼠随机分为对照,CS,地塞米松。

几种炎症模型的小鼠造模方法研究进展

动物炎症性疾病在疾病中比例最大,无论是传染性疾病还是免疫性疾病在临床上都会有炎症的发生。为了更加深入的了解疾病发生发展的机制以及寻找更好的预防治疗途径,采用体内试验非常必要。小鼠模型因其经济便宜,饲养周期短,操作简单以及与人类基因、生理结构等方面的相似性而广泛运用。本文以此为背景,主要围绕肺炎模型、结肠炎模型以及乳房炎模型的小鼠造模方法研究进展展开综述,以期为后续研究提供便捷。

薏苡附子败酱散通过调控NF⁃κB信号通路对结肠炎癌转化模型小鼠结肠癌发生的影响

目的研究薏苡附子败酱散对结肠炎癌转化模型小鼠结肠癌发生的影响。方法采用Aom/DSS法建立炎癌转化模型小鼠,将72只小鼠随机分为空白组、模型组、阿司匹林组(60 mg/kg)和薏苡附子败酱散低、中、高剂量组(4、8、16 g/kg),每组12只,给药干预12 d。记录小鼠体质量和一般情况,对疾病活动指数(DAI)进行评分。处死小鼠后记录肠道瘤体数目、脾脏质量和结肠长度,HE染色观察结肠组织病理变化并进行组织病理学评分,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清炎性因子IL-5、IL-6、IL-17、IL-10、IL-2和IFN-γ水平,蛋白质免疫印迹法(Western blot)检测NF-κB p65、IKB-α和p-IKBα蛋白表达。结果与模型组比较,薏苡附子败酱散各剂量组结肠长度增加(P<0.01),脾脏指数、结肠病理组织评分、血清IL-5水平和肿瘤组织NF-κB p65、IKB-α和p-IKBα蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),薏苡附子败酱散中、高剂量组结肠瘤数减少(P<0.05,P<0.01),血清IL-6、IL-17水平降低(P<0.05,P<0.01),血清IL-10水平升高(P<0.05),薏苡附子败酱散高剂量组血清IL-2、IFN-γ水平升高(P<0.05,P<0.01)。结论薏苡附子败酱散可以通过调控NF-κB信号通路,抑制促炎因子释放,促进抑炎因子释放,从而起到预防结肠癌发生的作用.

金黄色葡萄球菌感染小鼠乳房炎模型的建立

取25只分娩8～10d的昆明系小鼠随机分成5组(n=5),分别为阴性对照、生理盐水(pss)组和不同剂量金黄色葡萄球菌(1.0×102cfu/50μL、1.0×103cfu/50μL、5.0×103cfu/50μL)试验组,经乳头导管对第4对乳腺50μL/只注射,24h后观察结果,一侧乳腺甲醛固定制作切片观察组织病理变化,另一侧冰上研磨后取匀浆用高盐甘露醇鉴别培养基进行细菌计数,检测组织匀浆上清中的TNF-α含量。结果显示,试验组随着注射细菌数量的增加,病理变化加重,分离到的金黄色葡萄球菌数量显著增加,乳腺匀浆中TNF-α含量明显升高。结果表明,注射1.0×103cfu组可以引起较典型的小鼠乳房炎,且病理变化适中,适合用来建立金黄色葡萄球菌小鼠乳房炎模型。

丹蒲胶囊对大鼠细菌性前列腺炎病理模型的影响

目的:探讨纯中药制剂丹蒲胶囊治疗细菌性前列腺炎的作用机制。方法:将标准大肠杆菌0.2ml注射至大鼠前列腺腹侧叶,造成细菌性前列腺炎病理模型,同时应用丹蒲胶囊治疗,观察对病理模型的影响。结果:光学显微镜显示模型大鼠前列腺间质炎细胞浸润及纤维组织增生明显,丹蒲胶囊组大鼠前列腺间质炎细胞浸润及纤维组织增生程度均轻于对照组。结论:丹蒲胶囊具有修复前列腺组织,减轻病变前列腺间质炎症反应和纤维组织增生作用。

膈下逐瘀汤加减方对气滞血瘀型输卵管炎大鼠模型TNF-α蛋白表达的影响

目的研究应用多种刺激联合输卵管注菌的方法、制造出符合中医证候特点的气滞血瘀型输卵管炎大鼠模型,观察通过膈下逐瘀加减方治疗对该模型大鼠TNF-α蛋白表达的影响。方法将48只Wistar雌性大鼠随机分为4组,每组12只,分别为正常组、模型组(气滞血瘀型输卵管炎组)、成药组(康妇炎胶囊组)、中药组(膈下逐瘀汤加减方组)。正常对照组予以普通喂养,模型组给予输卵管注菌造模,并采用多种刺激干预处理以造成气滞血瘀型输卵管炎不孕大鼠模型,并观察大鼠输卵管及外部体征变化情况。成药组与中药组:即经过康妇炎胶囊以及膈下逐瘀汤加减方治疗后,观察气滞血瘀型输卵管炎大鼠的TNF-α蛋白表达情况的不同。结果模型组出现气滞血瘀型输卵管炎的症状,输卵管与周围组织黏连,显微镜下观察输卵管形态改变、增粗、积水,炎症指标TNF-α差异比较,有统计学意义(P<0.05)。结论多种刺激联合输卵管注菌建立的气滞血瘀型输卵管炎模型,符合输卵管炎病理特点和中医气滞血瘀证候的主要辨证要点,是较为理想的气滞血瘀型输卵管炎模型。膈下逐瘀汤加减方能抑制输卵管上皮TNF-α蛋白的表达,强度优于成药组。

关中奶山羊乳房炎病理模型的建立

为建立关中奶山羊乳房炎模型,用分离的乳房炎病原菌,按照大肠埃希菌3×103cfu/mL、金黄色葡萄球菌3×102cfu/mL剂量,分别对关中奶山羊进行乳头管灌注。在不同时间点,观察测定产奶量、精神状况、食欲、乳汁外观、乳房性状、体温、体细胞数(LMT法)等指标,并进行病理学检查和病原菌分离鉴定。结果显示,攻菌后奶山羊精神萎靡不振,采食量降低,乳房有变色、肿胀、发热、有明显触痛等急性炎症症状,乳样变色、黏稠,体温升高,产奶量降低;乳中体细胞数剧增;乳腺泡及间质中大量炎性细胞浸润;葡萄球菌引起的临床症状和病理变化更为严重;从乳样中分离到了相应的大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌。结果表明,成功建立了奶山羊大肠埃希菌和金黄色葡萄球菌奶山羊临床乳房炎模型。

牛源无乳链球菌分离及其诱导的乳房炎小鼠模型构建

研究旨在分离并鉴定致病性无乳链球菌并构建小鼠乳房炎模型。试验从病牛乳汁中成功分离并鉴定1株无乳链球菌(命名为HZ-032)。HZ-032以10^(4)CFU菌量感染哺乳期小鼠,同时设相同剂量无乳链球菌ATCC 13813菌悬液组、阴性对照(等体积无菌PBS)组及空白组作为对照,观察攻毒后小鼠乳腺组织病变并进行组织细菌载量的测定;制作乳腺组织石蜡切片,经HE染色镜下观察组织病理变化;采用荧光定量PCR测定乳腺组织中IL-1α、IL-6、IL-10、TNF-α4种炎性因子相对表达量。结果表明,感染组小鼠乳腺组织可分离出大量HZ-032菌株;组织病理切片显示,感染后小鼠乳腺组织较阴性对照和空白组明显观察到乳腺上皮细胞溶解,腺泡内有大量中性粒细胞浸润;荧光定量PCR结果显示ATCC 13813和HZ-032处理组中IL-1α、IL-10、TNF-α表达量均显著升高(P<0.05),IL-6在HZ-032处理组显著升高(P<0.05)。本研究从患病奶牛乳样中分离1株致病性无乳链球菌HZ-032,并使用该菌成功构建小鼠乳房炎模型,为进一步研究无乳链球菌致乳房炎的相关致病机制及防治措施奠定了基础。