麝香酮对胰腺癌中NLRP3炎症体通路介导的上皮间质转化的影响

目的探讨麝香酮(MUS)对胰腺癌(PC)的抗癌作用及其对核苷酸结合寡化结构域样受体3(NLRP3)炎症体通路和上皮间质转化(EMT)的影响。方法根据MUS处理浓度不同将人胰腺癌细胞(PANC1)细胞分为0μM组、0.1μM组、0.5μM组、1μM组、2μM组和4μM组,各组细胞使用相应浓度的MUS孵育48 h。使用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定生长抑制率和半抑制浓度(IC50)值,使用Annexin V-FITC/PI染色法测定细胞凋亡,使用Transwell测定细胞迁移和侵袭。使用Western blot测定Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、基质金属蛋白酶(MMP2)、MMP9、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、NLRP3、半胱氨酸蛋白酶-1(caspase-1)和血清人细胞凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白表达水平。通过对BALB/c雄性裸鼠皮下注射PANC1细胞构建移植瘤模型,然后将裸鼠随机分为对照组和MUS组,每组6只。对照组裸鼠给予腹腔注射100μL的1%二甲基亚砜(DMSO),MUS组裸鼠给予腹腔注射100μL的MUS溶液(20 mg/kg)。给药21 d后测量裸鼠肿瘤体积和重量。结果与0μM组相比,0.1μM组、0.5μM组、1μM组、2μM组和4μM组的PANC1细胞的生长抑制率逐渐升高,凋亡率逐渐升高(均P<0.05),Bax蛋白表达水平逐渐升高,Bcl-2蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05)。与0μM组相比,0.1μM组、0.5μM组、1μM组、2μM组和4μM组的迁移和侵袭细胞数逐渐降低(P<0.05),MMP2和MMP9蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05)。与0μM组相比,0.1μM组、0.5μM组、1μM组、2μM组和4μM组的E-cadherin蛋白表达水平逐渐升高,N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05),NLRP3、caspase-1和ASC蛋白表达水平逐渐降低(P<0.05)。与对照组比较,MUS组裸鼠的肿瘤体积和重量均降低(P<0.05),肿瘤组织中的NLRP3、caspase-1和ASC蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论MUS具有良好的抗PC作用,可能通过抑制NLRP3炎症体通路介导的EMT发挥抗癌作用。

解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠NLRP3炎症体调控作用的实验研究

目的:观察解毒化瘀颗粒对急性肝衰竭大鼠NLRP3炎症体的调控作用,探索解毒化瘀颗粒治疗急性肝衰竭的作用机制。方法:SPF级SD大鼠36只,随机分为解毒化瘀颗粒组12只、模型组12只和空白对照组12只。解毒化瘀颗粒组和模型组大鼠给予腹腔注射D-GalN 600mg/kg和LPS 20μg/kg制备急性肝衰竭大鼠模型,空白对照组给予腹腔注射等体积生理盐水。造模前1周开始灌胃给药,解毒化瘀颗粒组给予解毒化瘀颗粒灌胃,模型组与空白对照组给予等体积生理盐水灌胃。于造模成功后第3天取材,采集血液标本及大鼠肝组织,HE染色观察,运用Western Blot、qPCR检测肝组织中NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白和mRNA表达情况;运用ELISA检测血清IL-1β、IL-18表达情况。结果:解毒化瘀颗粒组大鼠血清IL-1B、IL-18水平低于模型组,差异具有统计学意义(P<0.05)。与模型组对比,解毒化瘀颗粒组大鼠肝组织中NLRP3、Caspase-1、ASC蛋白及mRNA表达量降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:解毒化瘀颗粒能够下调NLRP3炎症体NLRP3、Caspase-1、ASC、IL-1β和IL-18等相关因子的表达,对急性肝衰竭具有一定的治疗作用。

小胶质细胞NLRP3炎症体激活在锰诱导神经功能损伤中的作用

目的揭示亚急性锰染毒诱导的小胶质细胞对小鼠中枢神经的损伤效应,阐明核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎性小体在其中的关键作用及机制。方法将C57BL/6小鼠和NLRP3^(-/-)小鼠各随机分为2组,每组12只,共4组,即对照组、锰组(Mn组)、NLRP3^(-/-)组和NLRP3^(-/-)+Mn组。Mn组和NLRP3^(-/-)+Mn组在第1、4、7、10、13日时,采用皮下注射(100 mg/kg)的方式进行锰暴露,对照组和NLRP3^(-/-)组给予相同体积生理盐水。运用行为学检测法观察小鼠运动能力改变情况;运用免疫组织化学TH染色法观察小鼠脑组织神经元形态学的改变;运用原子吸收法对各组小鼠血锰含量进行检测;通过qRT-PCR法检测小胶质细胞活化相关标志物IL-18、IL-1β的mRNA表达水平;通过免疫荧光染色实验检测纹状体区内小胶质细胞的激活情况。使用Western blotting检测NLRP3相关蛋白NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β的表达情况。结果与对照组相比,Mn组小鼠运动协调能力明显损伤(P<0.05),黑质区神经元细胞数量明显降低(P<0.05),小胶质细胞明显发生活化(P<0.05),NLRP3及其相关分子NLRP3、Caspase-1、IL-18、IL-1β蛋白表达水平增高(P<0.05)。NLRP3敲除后,锰暴露所诱导小鼠运动协调能力下降显著回升(P<0.05),且可以逆转锰暴露所诱导的神经元损伤、小胶质细胞活化和NLRP3相关分子蛋白水平表达增加(P<0.05)。结论锰暴露可能通过诱导小鼠纹状体区小胶质细胞活化,促神经功能损伤;特异性敲除NLRP3基因后,可以抑制锰暴露引起的小胶质细胞活化和神经功能的损伤,起到显著的神经功能保护作用。

兰连糖毒清汤对糖尿病小鼠胰岛素抵抗及NALP3炎症体的影响

目的:探讨兰连糖毒清汤对糖尿病小鼠胰岛素抵抗的改善作用,并基于核苷酸结合寡聚化结构域样受体3(NALP3)炎症体探讨其作用机制。方法:将40只6周龄雄性db/db小鼠随机分为兰连糖毒清低剂量组、兰连糖毒清高剂量组、模型组和罗格列酮组,同时设立正常db/dm小鼠10只为空白组。干预8周后,检测各组小鼠口服葡萄糖耐量曲线下面积(AUC),稳定模型测定小鼠胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及定量胰岛素敏感性检查指数(QUICKI),ELISA法检测血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-6(IL-6)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-18(IL-18)水平,HE染色法观察小鼠肝脏组织,免疫组化检测小鼠胰腺组织NALP3的表达,Western blot及RT-qPCR检测小鼠骨骼肌组织NALP3蛋白及mRNA表达。结果:兰连糖毒清汤可降低小鼠AUC、空腹胰岛素(FINS)、HOMA-IR及血清TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-18水平,增加QUICKI指数(均P<0.05)。兰连糖毒清汤可降低小鼠骨骼肌组织NALP3蛋白及mRNA表达,降低胰腺组织NALP3蛋白表达(均P<0.05)。兰连糖毒清汤可以改善小鼠肝脏组织的炎症损伤。结论:兰连糖毒清汤可以改善糖尿病小鼠胰岛素抵抗,抑制代谢性炎症反应,降低NALP3炎症体水平,减少肝脏组织炎症损伤,其机制可能与下调NALP3炎症体有关。

当归多糖对慢性肾功能衰竭大鼠肾组织NLRP3炎症体信号通路的影响

目的探究当归多糖对慢性肾衰竭(CRF)大鼠肾组织NLRP3炎症体信号通路的影响。方法采用5/6肾切除法构建CRF模型,随机分为模型组、尿毒清(2.25 g·kg^(-1))组和当归多糖低(100 mg·kg^(-1))、中(200 mg·kg^(-1))、高(400 mg·kg^(-1))剂量组,另设置假手术组(大鼠开腹后不切除肾脏),观察大鼠肾功能变化,HE染色观察肾组织病理形态,比较各组大鼠肾功能、肾组织氧化应激指标和血清促炎因子水平变化,蛋白免疫印迹法检测大鼠肾组织NLRP3炎症体信号通路蛋白表达。结果模型组大鼠肾小管管壁薄厚不匀,呈萎缩或空泡样变性,肾小球囊腔扩张变大,系膜细胞明显增生,肾间质出现纤维化变性并伴有大量炎症细胞浸润;归多糖低、中、高剂量组及尿毒清组大鼠肾组织病理损伤均有改善,且当归多糖高剂量组与尿毒清组大鼠肾组织病理损伤改善程度最强。当归多糖可降低CRF大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)、24 h尿蛋白含量,降低肾组织丙二醛(MDA)水平和血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β、IL-6水平,降低肾组织Nod样受体家族含有pyrin结构域蛋白3(NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(caspase-1)、IL-1β蛋白表达,且呈剂量依赖性(P<0.05)。结论当归多糖可减轻CRF大鼠肾组织炎症、氧化应激水平,缓解肾组织损伤,改善肾功能,可能与抑制NLRP3炎症体信号激活有关。

核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)炎症体在眼科疾病中的研究进展

多种疾病的发生发展均与慢性低度炎症反应有关,其中免疫异常起重要作用。核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)炎症体作为固有免疫系统的重要组成成分,已被证实在糖尿病、冠状动脉粥样硬化性心脏病、风湿免疫疾病及肿瘤等多种疾病中发挥重要作用。NLRP3炎症体可被多种代谢信号激活,进而引起caspase-1的活化,最终导致细胞释放IL^(-1)β和IL^(-1)8,诱发炎症级联反应,引发组织损伤。近来多项研究表明,NLRP3炎症体可能成为多种疾病新的治疗靶点。本文将对NLRP3炎症体的活化与调控机制及其在年龄相关性黄斑变性、角膜炎、葡萄膜炎、青光眼、干眼症、糖尿病视网膜病变及缺血再灌注损伤等眼科疾病中的研究进展及相关治疗前景进行综述。

NLRP3、Caspase-1炎症体通路在人牙髓成纤维细胞中表达和相关调控因素的初步检测

目的:研究人牙髓成纤维细胞(human dental pulp fibroblasts,HDPF)中炎症体NLRP3、Caspase-1基因和蛋白的表达和相关调控因素。方法:分别利用免疫细胞化学染色和RT-PCR检测NLRP3、Caspase-1、P2X7、IL-1β基因和NLRP3、Caspase-1蛋白在正常HDPF中的表达情况;利用荧光实时定量PCR检测变异链球菌和ATP刺激后,HDPF中NLRP3、Caspase-1、P2X7、IL-1β基因表达的变化。结果:NLRP3、Caspase-1蛋白和NLRP3、Caspase-1、P2X7、IL-1β基因在正常HDPF中均有表达;HDPF经ATP和变异链球菌共同刺激后,NLRP3、Caspase-1、P2X7、IL-1βmRNA表达水平均明显升高,与对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);而单独ATP或变异链球菌刺激后,各基因的表达水平变化不明显(P>0.05)。结论:在正常HDPF中存在着NLRP3、Caspase-1炎症体通路;ATP和变异链球菌共同刺激能调节NLRP3、Caspase-1炎症体通路。

NLRP3炎症体与炎症性疾病

炎症体是胱天蛋白酶的活化平台,并促进一些前炎症细胞因子如IL-1β、IL-18和IL-33的成熟,启动机体的先天性免疫防御功能。炎症体的激活和失调与人类先天及后天的炎症性疾病都密切相关。通过对NLRP1、NL-RP3、IPAF和AIM2炎症体调节机制的研究,可为家族性周期性自身炎症反应、痛风、II型糖尿病等的治疗提供新的靶点。主要就NLRP3炎症体的组成、分布和调节机制及与NLRP3炎症体相关的炎症性疾病进行了简要介绍。

牵张应变对人牙周膜细胞中NLRP3炎症体通路相关因子表达的影响

目的研究牵张应变对人牙周膜细胞(human periodontal ligament cells,HPDLCs)表达炎症体通路相关因子的影响。方法对体外培养的HPDLCs施加20%牵张应变6、24 h,分别采用实时定量PCR以及免疫印迹技术检测NLRP3、Caspase-1及IL-1β的mRNA及蛋白表达的变化。对体外培养的HPDLCs施加20%牵张应变1、2、4、6 h后,采用酶联免疫吸附实验检测细胞分泌的IL-1β蛋白变化。对照组HPDLCs培养于弹性培养皿中,与动态牵张应变加载组的培养条件一致,但不加载应变。结果 6 h牵张应变作用下HPDLCs中NLRP3、caspase-1及IL-1β的mRNA及蛋白表达较对照组增加(P<0.05);24 h牵张应变作用下HPDLCs中NLRP3的蛋白表达水平上调(P<0.05);加载牵张应变4、6 h后,细胞培养上清中IL-1β含量随牵张时间的增长而增加(P<0.05)。结论20%机械牵张6 h能诱导HPDLCs中NLRP3/Caspase-1炎症体-IL-1β通路因子的表达。

炎症体及相关蛋白在力诱导牙周炎症反应中的作用

炎症体是一种多蛋白复合体,能介导IL-1β等多种炎症细胞因子释放,在炎症的发生发展中具有重要的作用。随着对炎症体研究的不断深入,目前已有文献报道炎症体可能参与机械力所诱导的机体炎症性疾病。与此同时,近年来研究显示,机械力可诱导牙周组织发生炎症反应,并伴随IL-1β和caspase-1/-5的表达。然而,炎症体及相关蛋白在力诱导牙周炎症反应中的作用尚不明确。综述炎症体的特点、在力相关炎症性疾病中的作用、机械力诱导的牙周炎症及其与炎症体和相关蛋白关系的研究进展。

炎症体在皮肌炎与多发性肌炎肌肉组织中的表达

目的:研究炎症体在皮肌炎(DM)和多发性肌炎(PM)受累肌肉中的表达情况,探讨其在发病机制中的意义。方法:采用免疫组织化学的方法检测新发病并未经治疗的成年DM/PM患者肌肉标本10例(DM 4例,PM 6例)及5例健康对照肌肉组织NALP1、NALP3、衔接蛋白ASC及半胱天冬酶-1(caspase-1)的表达情况。结果:4例DM患者肌肉组织中CD3+T细胞及CD20+B细胞均表达ASC及caspase-1,其中2例表达NALP3。6例PM患者中仅1例肌肉组织中CD3+T细胞及CD20+B细胞表达NALP3、ASC及caspase-1。10例患者均不表达NALP1。5例正常对照肌肉组织均不表达NALP1、NALP3、ASC及caspase-1。DM组ASC及caspase-1的表达阳性率显著高于PM组及正常对照组(P<0.01,P<0.05),NALP3的表达阳性率亦高于PM组及正常对照组,但均无统计学意义(均P>0.05)。结论:固有免疫反应与调节在DM和PM中起不同的作用。炎症体可能参与DM的发病过程,部分由NALP3激活。而炎症体激活可能并不参与大部分PM的发病。

NLRP3炎症体参与末端糖基化产物诱导的人主动脉内皮细胞损伤

目的观察NLRP3炎症体在末端糖基化产物(AGEs)诱导的人主动脉内皮细胞(HAECs)细胞损伤中的作用。方法制备AGEs并以不同浓度AGEs处理体外培养的HAECs,再以抗氧化剂N-乙酰基-L-半胱氨酸(NAC)处理细胞。MTT法评估细胞活性;流式细胞术测定细胞内活性氧簇(ROS)生成水平;ELISA法检测细胞培养上清液中IL-1β水平;免疫印记法检测HAECs中NLRP3、ASC、caspase1 p20以及IL-1β蛋白表达水平。结果与正常对照相比,经不同浓度AGEs处理后的HAECs细胞活力显著下降(P<0.05);细胞内ROS生成水平显著增加(P<0.05);细胞内NLRP3、ASC、caspase-1 p20以及IL-1β蛋白表达水平显著升高(P<0.05);细胞培养上清液内IL-1β水平显著升高(P<0.05)。上述变化均具有AGEs浓度依赖性(P<0.05)。抗氧化剂NAC处理能够显著改善AGEs对细胞活力的抑制(P<0.05),抑制ROS产生(P<0.05),下调NLRP3、ASC、caspase1 p20以及IL-1β蛋白表达(P<0.05),并减少培养上清液内IL-1β水平(P<0.05)。结论 AGEs可能通过诱导HAECs内ROS产生激活NLRP3炎症体导致细胞损伤。

线粒体功能损伤在NOD样受体家族蛋白3炎症体激活中的调控机制

NOD样受体家族蛋白3(NLRP3)炎症体的激活多由各种外源性或内源性剌激产生,进一步激活caspase-1,促使IL-1P和IL-18的成熟分化及分泌,从而引发炎症反应。激活过度的NLRP3炎症体可造成组织损伤及器官功能失调,甚至导致多种疾病。但目前对其激活机制的具体调控并不十分清楚。越来越多的证据表明,线粒体功能障碍与多种疾病中的NLRP3激活有关,且多作为上游激活因子提供ROS促使NLRP3寡聚化,并作为炎症体聚合的重要场所.或者乙酰化atubulin使线粒体位置靠近NLRP3。其分子机制多与K*外流及胞内失平衡有关。本文将着眼于NLRP3炎症体激活的机制以及线粒体功能障碍与其激活的相关研究。

NLRP1炎症体在糖尿病大鼠心肌组织内的表达

目的观察高脂高糖饮食和糖尿病分组中核苷酸结合寡聚化结构域样受体1(NLRP1)炎症体在心肌组织中表达的情况,分析其在糖尿病心肌病中潜在的致病机制。方法将实验大鼠分为3组:正常组、高糖高脂饮食组和糖尿病组。以链脲佐菌素(STZ)30 mg/kg腹腔注射复制糖尿病大鼠模型,造模成功8周后行血清学检测各组大鼠血清胆固醇、甘油三酯、空腹血糖及空腹胰岛素,并计算得出胰岛素抵抗指数(IRI)和胰岛素敏感性指数(ISI);心脏彩超评估心脏结构及功能;免疫印迹法和实时荧光定量PCR检测心肌组织NLRP1、ASC和caspase 1的蛋白及m RNA表达等情况。结果与正常组相比,高糖高脂饮食组体质量、血清胆固醇、甘油三酯增高,NLRP1 m RNA、caspase 1 mRNA及NLRP1蛋白表达增加(P<0.01),但空腹胰岛素、IRI、ISI、心脏彩超未见明显变化(P>0.05),心肌组织ASC和caspase 1蛋白及血清IL-1β、IL-18水平无明显变化(P>0.05),而糖尿病组中,大鼠血清胆固醇、甘油三酯、空腹血糖升高,空腹胰岛素、ISI和体质量降低(P<0.01),左室舒张末期内径、左心室收缩末期内径增大,射血分数、短轴缩短率及E/A比值下降并伴有NLRP1/ASC/caspase 1通路m RNA同步增加和NLRP1、caspase 1蛋白水平升高,但心肌组织中ASC蛋白表达无明显升高(P>0.05)。此外糖尿病组中IL-1β、IL-18也较正常组升高(P<0.05);与高糖高脂饮食相比糖尿病组大鼠空腹血糖升高伴有空腹胰岛素,ISI和体质量降低(P<0.01),心脏彩超提示左心室收缩末期内径,射血分数及E/A比值下降并伴有NLRP1、caspase 1蛋白表达增加和血清L-1β、IL-18升高(P<0.01)。结论糖尿病可诱发心脏结构和功能异常及心肌炎症反应,其机制可能与NLRP1/ASC/caspase 1炎症体活化有关。

柴胡皂苷-d对H_(2)O_(2)诱导的HL-7702细胞ROS产生及NLRP3炎症体的影响

目的:探讨柴胡皂-d(SSd)对H_(2)O_(2)诱导HL-7702细胞ROS产生及NLRP3炎症体表达的影响。方法:体外培养HL-7702细胞,采用H_(2)O_(2)诱导HL-7702细胞造模,并分为空白对照组,H_(2)O_(2)模型组,MitoTEMPOL+H_(2)O_(2)组,SSd+H_(2)O_(2)组,使用荧光检测线粒体膜电位(JC-1)、MitoSox Red线粒体超氧化物阴离子表达,化学发光法检测ATP水平,Western blot、RT-PCR法检测NLRP3炎症体的表达。结果:与对照组比较,H_(2)O_(2)对HL-7702细胞的氧化应激损伤使线粒体膜电位有下降趋势(P<0.05),ATP生成减少(P<0.05),MitoSOX Red荧光强度增强(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase1蛋白及基因表达明显上调(P<0.05);与模型组比较,使用MitoTEMPOL、SSd干预后线粒体膜电位明显上升(P<0.05),ATP明显上升(P<0.05),MitoSOX Red荧光强度下降(P<0.05),NLRP3、ASC、Caspase1蛋白及基因表达明显下调(P<0.05)。结论:H_(2)O_(2)诱导的HL-7702细胞中线粒体来源的ROS可以诱导NLRP3炎症体的活化,SSd可以通过抑制H_(2)O_(2)诱导的HL-7702细胞ROS的产生及NLRP3炎症体的表达,发挥保护肝细胞作用。

NLRP3炎症体相关调控机制研究进展

炎症体是模式识别受体的一种,其激活过程与促炎细胞因子白细胞介素(IL)-1β、IL-18的成熟与分泌直接相关,在体液免疫中可发挥重要作用。越来越多的研究发现,炎症体与动脉粥样硬化、糖尿病、痛风等多种疾病的发生发展关系密切,而炎症体的激活及其发挥作用的具体调控机制并不明确,本文从可能与NLRP3炎症体调控密切相关的氧化应激、内质网应激、自噬反应等方面进行了综述。

大黄素通过调控ROS和NLRP3炎症体通路改善草酸钙结晶诱导的肾小管上皮细胞损伤

目的研究大黄素是否能通过调控活性氧(ROS)及NLRP3炎症体通路抑制草酸钙结晶引起的肾小管上皮细胞氧化应激及炎症损伤。方法人肾皮质近曲小管上皮细胞培养后分别给予草酸钙结晶及大黄素干预。用细胞增殖与毒性试验检测细胞活性;蛋白印迹(Western blot)分析检测相关炎症蛋白的表达;流式细胞术检测ROS的表达;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞分泌炎症因子水平。结果细胞增殖与毒性试验显示大黄素可以缓解草酸钙晶体造成的细胞活性损伤。10μmol/L大黄素预处理后,流式细胞术显示大黄素显著降低草酸钙晶体引起的ROS升高,Western blot及ELISA试验表明大黄素可以显著抑制草酸钙晶体引起的相关炎症因子(NLRP3、ASC、Pro-caspase-1、Cleaved-caspase-1、IL-18、IL-1β)的表达与分泌。结论大黄素通过调控ROS及NLRP3炎症体通路抑制草酸钙结晶引起的肾小管上皮细胞损伤。

NOD样受体蛋白炎症体亚家族研究进展

炎症体作为固有免疫的一类模式识别受体,在抵抗外来病原微生物和自身非菌性炎症反应中发挥重要作用。NOD样受体(NLR)蛋白炎症体亚家族属于NLRs炎症体家族的一员,随着NLRPs炎症体生理功能的不断外延,它们不仅参与固有免疫的过程,而且参与到其他的常见生理过程,并发挥重要的调控作用。本文主要综述了近年来NLR蛋白炎症体亚家族的研究进展。

肝细胞内NLRP3炎症体的表达与炎症应答初步研究

目的探讨炎症体(inflammasome)在肝细胞内的表达,明确肝细胞内炎症体是否具有正常的炎症应答功能。方法以肝细胞株L02、HepG2为研究模型,RT-PCR、Real-time PCR检测LPS刺激及未刺激组caspase-1、IL-1β的mRNA的表达水平;Western blot检测NLRP3的表达和各刺激组胞内caspase-1活化;ELISA检测各刺激组上清中IL-1β和IL-18的分泌。结果 L02、HepG2细胞均表达NLRP3炎症体,LPS刺激促进肝细胞内caspase-1、IL-1β表达上调;内源性危险信号ATP能有效活化肝细胞内caspase-1酶原,促进IL-1β和IL-18分泌增加,caspase-1特异性抑制剂能特异性的抑制IL-1β、IL-18的分泌。结论肝实质细胞的NLRP3炎症体对内源性危险信号具有炎症应答功能,在肝内无菌性炎症的启动和维持中可能具有重要促进作用。

NLRP3炎症体在血管疾病中的作用

NLRP3炎症小体是核苷酸结合和寡聚化结构域样受体(nucleotide-binding and oligomerization domain-like receptors,NLRs)家族中的一种蛋白复合体,在固有免疫中发挥重要作用。当机体遭遇有害因子刺激时,NLRP3炎症体诱导pro-caspase 1裂解成具有活性的caspase 1,促进IL-1β,IL-18的成熟和释放,从而参与宿主抗感染和无菌性炎症反应。近年来大量研究表明NLRP3炎症体与血管疾病的发生发展密切相关,NLRP3炎症体参与的血管壁无菌性炎症反应在大、中、小及微血管的病理生理过程中起重要作用。