不同产地炒王不留行HPLC指纹图谱及含量测定研究

目的采用高效液相色谱法建立炒王不留行的指纹图谱,同时对不同产地饮片中的王不留行黄酮苷含量进行测定。方法梯度洗脱,流速1.0 mL·min^(-1);流动相A为乙腈,流动相B为水,梯度洗脱程序为0~10.0 min,5%→10%A;10.0~85.0 min,10%→30%A;85.0~90.0 min,30%A;检测波长280 nm。结果建立了炒王不留行的HPLC指纹图谱,共发现14个共有峰,其中5号峰为王不留行黄酮苷,不同产地的炒王不留行中所含王不留行黄酮苷的含量在0.20%~0.45%。结论建立的炒王不留行HPLC指纹图谱可用于饮片质量控制,不同产地的饮片中王不留行黄酮苷含量不同。

炒王不留行配方颗粒的提取工艺研究

目的确定炒王不留行配方颗粒最佳提取工艺。方法以加水量、提取时间、提取次数为因素,采用正交设计L9(34),以王不留行黄酮苷转移率、出膏率为指标,进行提取工艺的优选。结果最佳提取工艺条件为加25倍量水,提取3次,每次1h。结论优选得到的工艺稳定、合理、可行。

炒王不留行配方颗粒高效液相指纹图谱研究

目的:采用高效液相色谱法建立炒王不留行配方颗粒的指纹图谱,为炒王不留行配方颗粒质量标准提供依据。方法:Boston C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm),流速:1.0mL/min,柱温:30℃,检测波长:280nm,流动相为甲醇(A)-0.3%的磷酸水溶液(B),采用梯度洗脱,梯度洗脱程序为:0～30min(10%～40%A),30～40min(40%A),40～44min(40%～45%A)。结果:建立HPLC指纹图谱共有模式,10批炒王不留行配方颗粒相似度大于0.95。结论:该方法准确、可靠、重复性好,可作为炒王不留行配方颗粒质量控制的较好手段。

超声波提取炒王不留行总三萜的工艺优化及其抑菌活性研究

优化炒王不留行总三萜提取工艺,并分析其抑菌活性。在单因素实验的基础上,选取乙醇浓度、液料比、超声温度和超声时间为自变量,总三萜得率为响应值,采用4因素3水平的响应曲面分析法优化炒王不留行总三萜提取工艺;并采用倍比稀释法研究炒王不留行总三萜提取物对10种常见致病菌的抑菌作用。结果表明,超声波辅助提取炒王不留行总三萜最佳提取工艺条件为:乙醇浓度65%,料液比1∶25 (g/mL),超声温度63℃,超声时间40 min。在此工艺条件下,炒王不留行总三萜的得率为1.24%±0.003%,与模型预测值1.28%之间具有良好的拟合性。炒王不留行总三萜提取物对所选10种常见致病菌均有一定的抑制作用,尤其是对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、化脓性链球菌和肺炎链球菌抑制作用最强,其最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)均在1.25～5 mg/mL之间。该提取方法稳定、高效,可用于炒王不留行中总三萜的提取,同时提取物具有较强的广谱抗菌作用。

炒王不留行爆花与僵子差异性研究

目的:比较分析炒王不留行爆花和僵子饮片中浸出物、主要指标成分王不留行黄酮苷和刺桐碱含量及特征图谱的差异性。方法:建立超高效液相法同时测定样品中刺桐碱的含量及特征图谱,采用YMC C18色谱柱(2.1mm×100mm,1.9μm),以乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速0.35mL·min^-1,柱温35℃,检测波长219nm。同时参照《中国药典》2015年版方法测定王不留行黄酮苷的含量及浸出物。结果:王不留行生品、爆花和僵子饮片水溶性浸出物分别为9.24%、15.73%、12.05%,王不留行黄酮苷含量均值分别为0.535%、0.265%、0.357%,刺桐碱含量均值分别为0.116%、0.082%、0.103%,UPLC特征图谱中分别有5个共有特征峰,其峰面积大小存在明显差异。结论:僵化现象会降低炒王不留行的水溶出率,减少主要指标成分含量在炮制过程的损失,同时对特征图谱中各特征峰存在不同程度的影响。

炒王不留行标准汤剂质量标准研究

该研究以炒王不留行标准汤剂为研究对象,根据中药饮片标准汤剂的制备原则,制备了14批炒王不留行标准汤剂,并对其开展质量研究,建立了炒王不留行标准汤剂质量评价方法。以王不留行黄酮苷为指标进行含量测定,并计算其从饮片到标准汤剂的转移率;测定出膏率及pH,同时建立了HPLC特征图谱。研究结果显示,14批合格的炒王不留行标准汤剂中王不留行黄酮苷转移率为58.98%~93.94%,干膏得率8.67%~17.83%,pH 5.55~6.44,指纹图谱分析确定了9个共有峰,对14批王不留行饮片标准汤剂分别进行相似度评价,其相似度均大于0.96。该研究中炒王不留行标准汤剂制备方法规范,标准汤剂指纹图谱相似度高,其方法精密度、稳定性、重复性及加样回收率均良好,所建立的质量评价方法便捷、可靠,可为炒王不留行标准汤剂、配方颗粒及相关经典名方制剂(汤剂)质量控制提供参考。

基于炒王不留行探讨虚拟仿真技术在中药炮制实验教学中的应用

根据中药炮制实验教学目前面临的问题,在以"学生为中心、着力提高学生实践综合能力"的教学理念指导下,运用现代信息技术,根据2015年版《中国药典》,以炒王不留行为例,开发仿真实验软件,对虚拟仿真技术在实验教学中应用的可行性进行分析。通过仿真平台开放运行模式,中药炮制实验内容与虚拟信息技术得到有机结合,使学生时时能学、处处可学,进一步强化专业知识。这不仅极大提高学生的学习兴趣,也使得教师的教学工作更加网络化和信息化。

炒王不留行的化学成分分析

目的:分析炒王不留行中化学成分。方法:采用C18反相硅胶柱色谱法、凝胶柱色谱法、聚酰胺柱色谱法和制备高效液相色谱法对化合物进行分离、纯化,通过理化常数测定和紫外(UV)、红外(IR)、质谱(FAB-MS)核磁共振(1H-NMR,13C-NMR)等光谱法鉴定其化学结构。结果:从炒王不留行中分离并鉴定了4个化合物,分别为(2S)-N,N,N-三甲基色氨酸内铵盐,洋芹素-6-C-阿拉伯糖-葡萄糖苷,王不留行黄酮苷(洋芹素-6-C-葡萄糖-阿拉伯糖-4'-O-葡萄糖苷),洋芹素-6-C-双葡萄糖苷。结论:(2S)-N,N,N-三甲基色氨酸内铵盐为首次从植物中分离得到。

王不留行黄酮苷的分离纯化及对细胞增殖活性的影响

本文以炒王不留行中王不留行黄酮苷含量为考察指标,采用动静态吸附试验相结合的方式,从大孔树脂型号、吸附时间、最大上样量和洗脱剂浓度等方面考察大孔吸附树脂对炒王不留行中王不留行黄酮苷的分离纯化工艺,得到了稳定可行的工艺路线和吸附参数。同时利用SRB法测定皂苷对内皮细胞增殖的影响。本研究可为炒王不留行中王不留行黄酮苷的大孔树脂分离纯化精制工艺的确定提供参考,同时进一步研究发现王不留行黄酮苷可显著促进内皮细胞增殖。

王不留行不同炮制工艺的优选

目的:优选出王不留行的最佳炮制工艺。方法:测定王不留行不同炮制品的爆花率,通过高效液相色谱法,以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以甲醇为流动相A,0.3%磷酸溶液为流动相B,测定不同炮制品黄酮苷的含量,优选出王不留行最佳炮制工艺。结果:清炒法中火爆花率高,砂炒法中武火爆花率高。对比两组爆花率高的王不留行,清炒法的爆花率高,但是砂炒法完全爆花率高且减少一半炒制时间。两组质量对比中,黄酮苷:砂炒法中武火>清炒法中武火,水分:砂炒法中武火>清炒法中武火,浸出物:砂炒法中武火>清炒法中武火。结论:砂炒法中武火为最佳炮制工艺。

王不留行抗炎镇痛活性部位的筛选及其机制

目的筛选王不留行抗炎镇痛的活性部位并研究其抗炎作用机制。方法采用溶剂萃取法将生、炒王不留行的80%乙醇提取物分离为不同部位,筛选其抗炎镇痛的活性部位,检测活性部位对丙二醛(MDA)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和NO的影响。结果生、炒王不留行的水、正丁醇和乙酸乙酯部位均能极显著减轻二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀;炒王不留行的3个萃取部位均能剂量依赖性地抑制小鼠棉球肉芽肿,且乙酸乙酯部位的抗炎效果最优;炒王不留行的3个萃取部位均能剂量依赖性地降低乙酸致小鼠扭体次数和热致小鼠舔足次数,且正丁醇部位的镇痛作用最优。炒王不留行的3个萃取部位均能剂量依赖性地降低慢性炎症小鼠血清中MDA和TNF-α的产生及肝脏组织中NO、总一氧化氮合酶(TNOS)和诱导型一氧化氮合酶(i NOS)的含量。结论炒王不留行抗急性炎症的活性大于生王不留行的;炒王不留行的乙酸乙酯部位的抗炎活性最强,正丁醇部位的镇痛活性最强,其抗炎作用可能与抑制MDA、TNF-α和NO的产生有关。

HPLC-MS/MS法同时测定更年宁中11个成分

目的:建立HPLC-MS/MS法同时测定更年宁中哈巴苷、红景天苷、特女贞苷、党参炔苷、蟛蜞菊内酯、哈巴俄苷、王不留行黄酮苷、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ共11个成分的含量。方法:采用C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.9μm),以甲醇-0.1%甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温为25℃,进样量为1μL;质谱采用电喷雾离子源(ESI),电离模式为ESI-(哈巴苷、红景天苷、特女贞苷、党参炔苷、蟛蜞菊内酯、哈巴俄苷)和ESI+(王不留行黄酮苷、6-姜辣素、白术内酯Ⅲ、白术内酯Ⅱ、白术内酯Ⅰ),多反应监测(MRM)模式进行定量分析。结果:11个成分的线性范围分别为1.485~29.71、1.620~32.40、7.801~156.0、0.518~10.35、0.167~3.333、0.359~7.179、1.455~29.10、1.520~30.40、0.160~3.205、0.143~2.864、0.157~3.136μg·mL^(-1),r均≥0.9980;平均回收率(n=6)在95.9%~102.6%,RSD在0.90%~3.0%。5个企业生产的10批更年宁样品中上述11个成分的含量分别为14.8~104.5、37.6~288.5、335.8~1332.8、6.2~10.1、6.6~61.8、13.7~75.1、57.4~132.8、16.9~70.6、11.8~33.9、3.4~15.4、6.5~12.9μg·g^(-1)。结论:本方法灵敏、准确,可用于更年宁的质量控制。