密点麻蜥调控SLC7A11/GPX4通路诱导胃癌MKN45细胞铁死亡的作用及机制

目的:基于SLC7A11/GPX4信号通路探讨密点麻蜥对人胃癌MKN45细胞发生铁死亡的影响。方法:选择SD大鼠制备含药血清,将MKN45细胞随机分为空白对照组(10%空白血清)、5-FU含药血清(10%)阳性对照组、密点麻蜥含药血清低(5%)、中(10%)、高(20%)浓度组。CCK-8法检测MKN45细胞的存活率;Transwell法检测MKN45细胞的迁移及侵袭能力;激光共聚焦检测细胞内二价铁离子(Fe^(2+))水平;试剂盒检测细胞内LPO水平;流式细胞术检测细胞内ROS水平;qPCR法检测密点麻蜥对MKN45细胞中SLC7A11、GPX4、P53 mRNA表达的影响;Western Blotting检测密点麻蜥对MKN45细胞中SLC7A11、GPX4、P53蛋白表达的影响。结果:与空白对照组比较,密点麻蜥含药血清中、高浓度组MKN45细胞存活率、迁移及侵袭能力显著降低,Fe^(2+)、ROS水平显著升高,P53、SLC7A11、GPX4 mRNA及蛋白表达显著降低,高浓度组LPO水平显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:密点麻蜥可能通过抑制SLC7A11/GPX4信号通路,同时促进细胞内Fe~(2+)、LPO的积累,从而诱导MKN45细胞发生铁死亡,抑制其增殖、迁移及侵袭。

密点麻蜥对小鼠肝纤维化的干预作用及机制

目的研究密点麻蜥对肝纤维化模型小鼠的干预作用及机制。方法将60只ICR小鼠随机抽取10只为空白组,其余50只腹腔注射四氯化碳(CCl_(4))-玉米油混合液造模8 w,诱导肝纤维化模型。检测模型制备成功后,将小鼠随机分为模型组、安络化纤组和密点麻蜥低、中、高浓度组,持续灌胃4 w。治疗后采用苏木素-伊红(HE)染色法观察小鼠肝组织病理学变化;用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清透明质酸(HA)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(C-Ⅳ)及转化生长因子(TGF)-β1、血小板衍化生长因子(PDGF)-BB水平;用Western印迹检测小鼠肝组织中基质金属蛋白酶(MMP)-13及MMP抑制剂(TIMP)-1蛋白表达量。结果与空白组相比,模型组血清中HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ及TGF-β1、PDGF-BB水平均显著升高(P<0.01);与模型组比较,安络化纤组和密点麻蜥高、中、低浓度组血清中HA、LN、PC-Ⅲ、C-Ⅳ及TGF-β1、PDGF-BB水平均显著降低(P<0.01),各浓度中以密点麻蜥高浓度组效果较好;与空白组比较,模型组肝组织中MMP-13表达显著降低,TIMP-1表达显著升高(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,安络化纤组和密点麻蜥高浓度组肝组织中MMP-13表达显著升高(P<0.05),安络化纤组和密点麻蜥高、中、低浓度组肝组织中TIMP-1表达显著降低(P<0.01),各浓度中以密点麻蜥高浓度组效果较好。结论密点麻蜥可以通过调节MMP-13及TIMP-1表达,调控肝细胞外基质(ECM)沉积和降解平衡;降低TGF-β1和PDGF-BB表达水平,而抑制HSC活化,有效改善小鼠肝纤维化。

基于微卫星标记的密点麻蜥遗传结构分析

研究选取了Emu49、Emu53、Emu55等10个微卫星位点对采集自甘肃省张掖市高台县八坝村(GTBB)和宁夏回族自治区中卫市甘塘镇(GT)2个地区的16只密点麻蜥进行了遗传结构分析。结果表明:在GTBB和GT地区的16个密点麻蜥样本种群平均有效等位基因数(Ne)为1.697和4.858,平均期望杂合度(He)为0.353和0.797,平均观测杂合度(Ho)为0.253和0.561。2个群体的平均近交系数(Fis)为0.472,平均遗传分化系数(Fst)为0.209,平均多态信息含量(PIC)为0.703,种群之间的变异率达到了29%,而群体内的变异率达到了71%。这说明所选微卫星位点大部分信息含量为高水平,具有高度多态性,可作为密点麻蜥遗传多样性分析的分子标记;2个地区密点麻蜥种群的遗传结构存在较低的基因交流程度,在此情况下,应引进优良基因,加强基因交流,提高群体的杂合程度,强化对密点麻蜥生存环境和物种资源的保护。

黄河上游部分地区密点麻蜥mtDNA的系统进化关系

本试验使用了线粒体ATP6基因组和Cytb基因组序列进行了PCR扩增和测定,用邻接法(Neighbor-joining,NJ树)和最大似然法(Maximum Likelihood,ML)分别构建了系统的进化树并进行系统发育分析,以研究在我国黄河上游的部分地区,密点麻蜥种群遗传状况和系统的发生关系。实验结果显示,对NJ树与ML树的分析结果基本一致,同时两个基因的模型证实在宁夏省地区与内蒙古地区的采集点间均存在着基因流,且密点麻蜥样本与荒漠麻蜥之间亦存在着渗透杂交。研究人员认为对密点麻蜥的种质资源保护应该尽量减少与其他物种间的基因流。

密点麻蜥的两性异形和雌性繁殖(英文)

蜥蜴繁殖成功率与其形态特征有密切的关系。作者在内蒙古乌拉特后旗采集密点麻蜥(Eremias multio-cellata) ,定量研究该种形态特征的两性异形和雌体繁殖特征,检验与成体形态特征相关的两性繁殖成功率差异是否能促进两性异形的进化。密点麻蜥成体个体大小无显著的两性差异,但头部大小两性差异显著;雄性个体的头长和头宽均大于体长相同的雌性成体。繁殖雌体于五、六月份排卵;在实验室条件下,雌体在六月下旬至七月下旬之间产仔。该种雌体年产单窝仔,每窝2 -4仔。窝仔重与雌体体长呈正相关,但雌体体长仅能解释很少一部分(约19 %)窝仔重的变异。窝仔数和幼仔重均与雌体体长无关。幼仔重与相对生育力(相对于雌体体长的窝仔数)呈显著的负相关,表明该种蜥蜴存在后代数量-大小之间的权衡。密点麻蜥雄体和雌体向较大体型方向进化的选择压力均相对较弱,与成体头部大小相关的两性繁殖成功率的差异是导致该种蜥蜴头部大小两性异形进化的主要原因[动物学报52 (2) : 250 -255 , 2006]。

鄂尔多斯地区密点麻蜥的食性分析

对采自内蒙古自治区鄂尔多斯库布齐沙漠85只密点麻蜥Eremias multiocellata,采用胃剖法作食性分析,分别计算出它们的食物数量和频次百分比、营养生态位宽度、营养生态位重叠值和有益系数等。结果显示,密点麻蜥以觅食昆虫为主,其次为蛛形类和植物种子;其中包括2纲13目41科的节肢动物门物种。雌、雄个体的取食食性差异不显著,但幼体、亚成体和成体间食性有显著的差异。雌、雄个体的营养生态位重叠值较大。亚成体的营养生态位宽度与食物多样性指数最大,而成体最小。密点麻蜥的总有益系数为正值,表明该物种摄食较多的害虫。

宁夏密点麻蜥含药大鼠血清对人胃癌BCG-823细胞凋亡的影响

目的研究宁夏密点麻蜥高、中、低剂量对人胃癌(gastric cancer,GC)BCG-823细胞增殖凋亡的影响,同时测定细胞P53、Bax、基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)及E-cad蛋白表达水平,阐明宁夏密点麻蜥对GC细胞的干预作用及其机制.方法50只SPF级♂SD大鼠,随机分为生理盐水对照组(S组),宁夏密点麻蜥高(XH组)、中(X M组)、低(X L组)剂量组、华蟾素片对照组(HC组),共5组,每组10只.各组用生理盐水及相应浓度宁夏密点麻蜥药物灌胃1 wk后处死,腹主动脉取血,离心,制备含药血清.用MTT法检测药物血清对人GC BCG-823细胞增殖活性的影响;用Western blot检测方法测定GC细胞P53、Bax、MMP-9及E-cad蛋白表达水平,并进行统计分析.结果含药大鼠血清各干预组OD均值小于生理盐水对照组;宁夏密点麻蜥高、中、低剂量组之间比较,P<0.05;P53、Bax以及E-cad蛋白表达水平与生理盐水组比显著升高,MMP-9蛋白表达水平与生理盐水组比降低.随着血清药物浓度的增高,MMP-9的表达呈依赖性降低,P53、Bax以及E-cad的表达呈依赖性增强.结论宁夏密点麻蜥能影响P53、Bax、MMP-9及E-cad蛋白表达水平,抑制人GC BCG-823细胞增殖,并诱导细胞凋亡,具有良好的抗癌作用.

春季环境因子对密点麻蜥活动规律的影响

密点麻蜥是变温动物，其活动规律深受环境因子的影响。本文探讨了春季环境因子对密点麻蜥活动规律的影响：４月份，当气温为１８８～２１４℃，栖息地地温为３１５～３６４℃，近地温为２６９～２９８℃，光照度为３３３×１０３～５８２×１０３勒克司时，最适合它们的活动。５月份，最适合它们活动的环境条件是：气温２２～２８８℃、栖息地地温３３９～３６８℃，近地温为３０６～３３℃，光照度为２０９×１０３～５６７×１０３勒克司。由于各项因子差异显著，其活动频率在４月份单峰型，在５月份为双峰型。

密点麻蜥的食性及摄食的季节性变化

分析甘肃民勤２０９只成体和４３只幼体密点麻蜥胃含物表明，密点麻蜥是以动物性食物为主的杂食性动物，主要以甲虫和白刺果为食．成体出蛰后即开始强烈摄自，摄食率均在８３％以上．食性季节性变化显著，春季仅以动物为食，夏季动物性和植物性食物各半，秋季植物性食物占１／３．食物种类多样性和营养生态位宽度随体形增大而增加．

温度对南疆沙蜥和密点麻蜥消化酶活性的影响

为探究不同温度对南疆沙蜥Phrynocephalus forsythii和密点麻蜥Eremias multiocellata消化酶活性的影响,本研究测定了不同温度下南疆沙蜥和密点麻蜥的肝脏、胃及十二指肠的消化酶——淀粉酶(碘-淀粉比色法)、脂肪酶(比浊法)及胰蛋白酶(紫外线吸收法)的活性。结果显示,南疆沙蜥和密点麻蜥消化酶活性在4～45℃随着温度升高呈现先上升、后下降的趋势;40℃驯化的南疆沙蜥、35℃驯化的密点麻蜥肝脏、胃及十二指肠的淀粉酶、脂肪酶及胰蛋白酶活性最高。南疆沙蜥和密点麻蜥消化酶活性具有温度依赖性,这与机体在不同温度下的生理机能是密切相关的。同时,2种蜥蜴的消化酶活性最大时的驯化温度明显不同,这与它们偏好的环境温度密切相关。

温度对密点麻蜥心电活动的影响(英文)

采用甘肃省民勤县荒漠半荒漠环境中的卵胎生蜥蜴密点麻蜥（Ｅｒｅｍｉａｓｍｕｔｉｏｃｅｌａｔａ）为材料，研究其心电活动随体温变化的规律以及对环境温度的适应特点。共记录密点麻蜥１２５只，每只蜥蜴记录５、１０、１５、２０、２５、３０、３５℃７个温度等级，每个等级１５～２０只；少数蜥蜴记录的温度范围扩展到４０、４２、４４、４５和４６℃。环境温度采用由电接点温度计和继电器控制的电冰箱和恒温箱来控制。体温测量采用ＳＹ－２型数字式温度计，测定时插入泄殖腔２ｃｍ。心电描记采用ＬＭＳ２Ｂ型二道生理记录仪。电极为不锈钢针形电极。实验前将蜥蜴放入待测温度环境中适应２ｈ。被测蜥蜴背位固定于木板上，不麻醉，将记录电极的正极插入左前肢皮下，负极插入右前肢皮下，地线插入后肢皮下，插入深度均为５ｍｍ。电极固定后待蜥蜴的体温达到预定温度５ｍｉｎ后再开始心电记录。在实验记录纸上测量各波的电压值及各间期的时间，其中Ｒ～Ｔ间期即Ｓ～Ｔ段，表示从ＱＲＳ波结束到Ｔ波结束的时间，Ｔ～Ｐ间期表示从Ｔ波结束到Ｐ波开始时的时间，Ｐ～Ｒ间期表示从Ｐ波开始到ＱＲＳ波开始的时间，以ｔ测验检验相关系数的显著性。体温为５～３５℃时的心电图中Ｐ波和Ｔ波是正向的，且幅度很?

密点麻蜥几种组织SDH和LDH活性对温度的适应

研究了密点麻蜥肝脏、骨骼肌、大脑组织中琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)活性对温度的依赖关系。结果表明:密点麻蜥3种组织中SDH在5～35℃范围内随温度的升高而升高,在35℃时达到峰值后随着温度的升高而下降,35℃可能为SDH的最适温度;3种组织的LDH活性随温度的升高而升高;大脑中的SDH和LDH活性最高。这表明SDH和LDH的活性与动物组织的能量代谢相适应。

新疆地区密点麻蜥不同亚种及其不同部位总磷脂含量的比较

本实验以密点麻蜥不同亚种(库氏亚种、叶城亚种)及其断尾体与尾巴为研究对象,主要用紫外-可见分光光度计对密点麻蜥不同亚种及其不同部位总磷脂进行了分析。结果显示:叶城亚种体内磷脂的含量高于库氏亚种磷脂的含量,叶城亚种尾巴中磷脂的含量明显高于叶城亚种断尾体中磷脂的含量,库氏亚种断尾体与库氏亚种尾巴中磷脂含量相差不大。

青海沙蜥和密点麻蜥的分布状况、生活规律及食性

本文分析、总结了分布于青海高原的青海沙蜥（Ｐｈｒｙｎｏｃｅｐｈａｌｕｓｖｌａｎｇａｌｉ）和密点麻蜥（Ｅｒｅｍｉａｓｍｕｌｔｉｏｃｅｌａｔａ）的分布状况、一日活动规律及其食性。

甘肃密点麻蜥三个地理种群的两性异形研究

通过测量和比较采自甘肃省兰州市、张掖市和民勤县3个地区的密点麻蜥Eremias multiocellata成体样本的8个形态学量度指标,分析密点麻蜥雌雄间的两性差异和异速生长。结果表明,密点麻蜥兰州种群和张掖种群体长的两性差异无统计学意义,民勤种群雄性体长显著大于雌性。3个种群的头部大小、附肢长、尾部及最大腹宽在两性间均存在差异,具有两性异形现象。雄性个体头部较大、附肢和尾部较长;而最大腹宽在不同种群中有所不同,兰州种群和张掖种群雄性的最大腹宽显著小于雌性,民勤种群雄性则显著大于雌性。在个体发育过程中,前肢长、后肢长、头长、头宽、头高、尾长及最大腹宽均出现了不同程度的异速生长。

新疆地区密点麻蜥不同亚种体与尾中14种元素分析比较

用原子吸收分光光度计测定了新疆地区密点麻蜥不同亚种体与尾中14种元素的含量,发现其K、Ca、Mg、Fe、Zn等元素的含量都比较丰富;有毒元素Pb含量均较低;仅在叶城亚种体中含有Cd,且含量极低;密点麻蜥不含有Co、Ni,并讨论了这些元素与其药用机理的关系,为密点麻蜥的进一步开发利用提供一定的科学依据。

密点麻蜥与荒漠麻蜥间渐渗杂交的形态证据

为了明确密点麻蜥(Eremias multiocellata)与荒漠麻蜥(Eremias przewalskii)2个物种间的基因渐渗问题,基于形态学研究方法,对采自10个样点的麻蜥样本进行形态鉴定,再进行样本形态可量性状的单因素方差分析以及主成分分析.结果表明,在密点麻蜥与荒漠麻蜥分布重叠区所采集的杂交个体,有与密点麻蜥相似的眼斑、背部斑纹,且其生殖方式也与密点麻蜥相同为卵胎生;但8个形态可量性状单因素方差分析与主成分分析的结果则表明,杂交个体与荒漠麻蜥间不存在极显著性形态差异,表明密点麻蜥与荒漠麻蜥之间存在一定渐渗杂交.

宁夏密点麻蜥对胃癌前病变模型大鼠HIF-α、VEGF的影响

目的:研究不同剂量宁夏密点麻蜥对胃癌前病变(PLGC)模型大鼠缺氧诱导因子HIF-1α和血管内皮生长因子VEGF的影响,探讨宁夏密点麻蜥对PLGC的调控机制。方法:60只SPF级SD雄性大鼠,随机分为空白对照组、PLGC模型组、宁夏密点麻蜥高、中、低剂量组、维酶素对照组。除空白对照组外,其余各组均以0.02 mmol/L的MNNG,配合40%乙醇、饥饱失常法等饲养24周,制备PLGC大鼠模型。分别以宁夏密点麻蜥高、中、低剂量,维酶素连续治疗12周,观察PLGC模型大鼠胃黏膜病理变化;应用免疫组化法检测胃体组织HIF-1α和VEGF表达水平。结果:通过Image-Pro Plus6.0图像分析系统进行图像光密度测算,各模型组与空白对照组HIF-1α和VEGF水平比较,AOD值明显降低(P<0.05);各治疗组与模型组HIF-1α和VEGF水平比较,AOD值明显降低(P<0.05);宁夏密点麻蜥高、中、低剂量治疗组HIF-1α和VEGF均低于维酶素组(P<0.05),其中以高剂量组AOD值最小。结论:宁夏密点麻蜥能抑制PLGC模型大鼠HIF-1α和VEGF表达,逆转胃黏膜病理改变,抑制癌变趋势。

新疆地区密点麻蜥不同亚种浸出物及氨基酸含量的比较

目的对新疆密点麻蜥不同亚种浸出物及氨基酸含量进行比较,为科学制定密点麻蜥药材的质量标准提供依据。方法采用《中华人民共和国药典》方法对密点麻蜥的浸出物含量进行测定,采用L-8500A型日本日立氨基酸分析仪测定氨基酸含量,比较密点麻蜥叶城亚种与库氏亚种浸出物及氨基酸含量。结果密点麻蜥库氏亚种浸出物及氨基酸含量均比叶城亚种中的含量高。结论密点麻蜥氨基酸、浸出物含量可作为控制密点麻蜥药材质量的重要指标之一。

宁夏密点麻蜥对胃癌前病变模型大鼠P53及PUMA表达的影响

目的:研究宁夏密点麻蜥不同剂量对胃癌前病变(PLGC)模型大鼠胃黏膜细胞增殖、凋亡以及P53和PUMA水平的影响,探讨宁夏密点麻蜥对PLGC的干预机制。方法:60只SPF级雄性SD大鼠,随机分为空白对照组,模型组,宁夏密点麻蜥高、中、低剂量组,维霉素对照组,共6组,每组10只。除空白组外,余均以0.02 mmol/L的MNNG联合40%乙醇、饥饱失常等综合因素共24周制备PLGC大鼠模型。分别用宁夏密点麻蜥高、中、低剂量、维酶素连续治疗12周,观察PLGC模型大鼠胃黏膜病理组织学变化,应用免疫组化法分别观察给药前和停药后胃体组织P53和PUMA蛋白变化,并进行统计分析。结果:通过Image-Pro Plus 6.0图像分析系统对免疫组化图像进行光密度的测算,各模型组与空白对照组P53和PUMA水平比较,AOD值明显降低,P<0.05;各治疗组与模型组P53和PUMA水平比较,AOD值明显降低,P<0.05;宁夏密点麻蜥高、中、低剂量治疗组P53和PUMA阳性表达率低于维酶素治疗组,P<0.05,其中以高剂量组AOD值最小。结论:宁夏密点麻蜥能抑制凋亡相关蛋白P53、PUMA的表达,促进细胞凋亡,逆转PLGC模型大鼠胃黏膜病理改变,阻断癌变发展。