抗烟曲霉菌单克隆抗体鉴定和初步应用

目的 :制备抗烟曲霉菌单克隆抗体 (McAb) ,建立一种快速检测烟曲霉菌抗原方法。方法 :用基因重组烟曲霉菌半乳糖甘蛋白 (AFMP1)抗原 ,免疫BALB/c小鼠 ,制备单克隆抗体 ,选择针对不同抗原决定簇单抗配对 ,建立双抗夹心ELISA法检测烟曲霉菌抗原。结果 :筛选出 3株稳定分泌抗烟曲霉菌单抗杂交瘤细胞株 ,IgG亚类鉴定分别为IgG1、IgG2a、IgG2b ,抗体亲和常数分别为 1 2× 10 10 、4 5 6× 10 9和 1 81× 10 10 mol/L ,免疫印迹证实单抗特异性识别烟曲霉菌培养上清和细胞裂解产物 ,相加试验表明 3株单抗是针对不同抗原决定簇 ,组成配对双抗夹心ELISA法 ,检测最高灵敏度为 0 1ng/ml,可测范围为 0 1～ 6 0ng/ml。结论 :3株杂交瘤细胞株特异性好、亲和力高 ,组成配对夹心ELISA法可用于快速检测烟曲霉菌抗原。

烟曲霉菌孢子对支气管哮喘大鼠肺Toll样受体2表达的影响

烟曲霉菌是支气管哮喘（简称哮喘）患者症状加重，甚至死亡的一个危险因素。在呼吸道中Toll样受体2（TLR2）是识别烟曲霉菌抗原，并与之结合产生生物学作用的重要受体之一。我们在建立大鼠哮喘模型的基础上观察烟曲霉菌孢子对大鼠肺泡灌洗液（BALF）中总蛋白浓度和气道阻力变化时大鼠肺TLR2的变化。