部分国产烤烟型卷烟烟气冷凝物的中性红细胞毒性试验

采用中性红法检测了20个牌号的国产烤烟型卷烟烟气冷凝物（TPM）对中国仓鼠肺上皮细胞（CHL）的细胞毒性，结果表明：①阳性对照化合物氯喹的IC50为15．0±0．23μg／mL，而20个牌号卷烟TPM的IC50为119．5±13．6～218．4±15．9μg／mL；②盒标焦油15mg／支卷烟TPM对CHL的细胞毒性显著高于11mg／支卷烟，极显著高于10、9、8、5mg／支卷烟；③卷烟的TPM与其对CHL的IC50负相关。

全烟气暴露与烟气冷凝物染毒方式的卷烟烟气体外微核测试结果比较

采用VITROCELL系统建立了基于全烟气暴露的体外微核测试方法,并比较了全烟气暴露与烟气冷凝物染毒方式下卷烟主流烟气的体外微核测试结果。结果表明:该方法可以进行卷烟烟气的遗传毒性测试;在相同烟气剂量下,采用全烟气暴露方式测试的卷烟烟气遗传毒性大于烟气冷凝物染毒方式的测试结果;与传统的烟气冷凝物染毒方式相比,基于全烟气暴露方式的体外微核测试结果能够较全面地反映主流烟气的遗传毒性。

不同抽吸模式下烟气冷凝物对人口腔细胞体外生长增殖的影响

为考察卷烟烟气暴露对人口腔细胞体外生长增殖的影响,以肯塔基参比卷烟3R4F为试验卷烟,人口腔表皮样癌细胞为实验模型,分别在ISO和加拿大深度抽吸(HCI)模式下制备烟气冷凝物并对细胞进行染毒暴露,评估了两种抽吸模式下烟气暴露对人口腔细胞代谢活性及核酸复制活性的影响,并结合主流烟气总粒相物(TPM)中主要有害成分的释放水平进行了分析。结果表明:①烟气冷凝物暴露对人口腔细胞体外增殖有抑制作用,对人口腔细胞代谢活性以及核酸的复制活性有一定的毒性作用。②HCI抽吸模式下3R4F卷烟单位TPM和单位烟碱中有害成分的释放量低于ISO模式,HCI抽吸模式下制备的烟气冷凝物含水率高于ISO模式,这两种因素是导致3R4F卷烟HCI模式下烟气冷凝物细胞毒性弱于ISO模式的主要原因。

测定烟气冷凝物中尼古丁含量的溶剂选择

目前国内外测定卷烟烟气冷凝物中尼古丁含量时,烟气冷凝物的溶剂均为甲醇。经过多次实验表明:无水乙醇和95%乙醇均可代替甲醇作溶剂以测定卷烟烟气冷凝物中的尼古丁。

接装纸透气度和滤棒吸阻对卷烟烟气细胞毒性的影响

采用中性红细胞毒性试验测试了不同透气度接装纸卷烟和不同吸阻滤棒卷烟烟气冷凝物的细胞毒性,并初步分析了卷烟烟气的细胞毒性指标与CO,NNK,NH3,HCN,B[a]P,巴豆醛和苯酚释放量之间的相关性。结果表明:①随着接装纸透气度的增大,卷烟烟气冷凝物的细胞毒性呈降低趋势;细胞毒性指标与CO,NNK,NH3,HCN,B[a]P,巴豆醛和苯酚的释放量之间具有一定的相关性;②随着滤棒吸阻的增大,卷烟烟气冷凝物的细胞毒性呈降低趋势;细胞毒性指标与NH3,HCN,B[a]P和苯酚的释放量之间具有一定的相关性。

NNK和B[a]P在卷烟烟气复杂基质中的联合遗传毒性

为对卷烟进行安全性评价,以肯塔基参比卷烟3R4F为研究对象,以B[a]P、NNK为目标化合物,采用检测哺乳动物细胞致突变性的微核试验,结合三者对人体支气管上皮细胞的毒性作用,分析了B[a]P、NNK在卷烟烟气复杂基质中的联合作用。结果表明:(1)B[a]P、NNK与CSC均具有体外细胞遗传毒性;(2)两两联合作用诱发细胞微核存在一定的拮抗效应;(3)三者联合作用呈现一定的协同作用。

烟用香精香料对人支气管上皮细胞的毒性研究

为了探讨烟用香精香料对人支气管上皮细胞的毒性作用,并为其安全性评价提供毒理学依据,将永生化的人支气管上皮细胞(BEP2D细胞)分为纯卷烟组和卷烟加香加料组、卷烟加香精和卷烟加香料组、卷烟加不同香精组、卷烟加不同香料组,用MTT法测定细胞存活率,用分子探针氢化乙锭(HE)的荧光产物溴乙锭(EB)相对定量细胞内活性氧(ROS)水平。结果表明加香加料致卷烟烟气冷凝物(CSC)的细胞存活率降低,细胞内ROS水平增高,对细胞的氧化损伤大;与香料比较,香精的细胞存活率低,对细胞的氧化损伤大;1#香精的细胞存活率较高,但对细胞的氧化损伤较大;1#香料的细胞存活率较低,但对细胞的氧化损伤较小,表现在细胞内ROS水平较低。由此可知CSC对BEP2D细胞有毒性,烟用香精香料的添加增加了烟气对BEP2D细胞的毒性作用,而在香精和香料中,香精对细胞毒性较大。

栘依树抗氧化剂对香烟烟气自由基及人淋巴细胞姐妹染色单体交换率的影响

采用电子顺磁共振法研究了栘依树抗氧化剂对香烟烟气自由基含量的影响,并比较了不同自由基含量的香烟烟气冷凝物(CSC)对人淋巴细胞姐妹染色单体的损伤情况.在香烟滤嘴中注入50μL0.2%的栘依树抗氧化剂溶液后,香烟烟气中气相、粒相自由基含量分别降低40.2%和28.3%,平均降低39.6%;中高剂量的实验烟(添加栘依树),与对照烟(不加栘依树)相比,人淋巴细胞姐妹染色单体交换率显著降低(t＞t0．05),其中中剂量烟降低幅度更大；低剂量实验烟与对照烟相比,姐妹染色单体交换率也有降低趋势,但差异不显著(t<t0.05).以上结果表明,栘依树可明显降低香烟中自由基水平,进而降低香烟对人体的危害性.

不同品牌卷烟主流烟气亚硝胺、氢氰酸释放量与卷烟有害生物效应关系

为探究主流烟气中TSNA、HCN的释放量对人体健康的影响,采用离体细胞培养的方法来检测烟气浓缩物的细胞毒性、动式被动吸烟小鼠急性毒性试验来检测烟气的急性毒性,为卷烟的安全性评价提供毒理学依据.结果表明卷烟烟气冷凝物(CSC)中TSNA、HCN的含量与其生物加权综合毒性大小并没有明显的线性关系.

不同焦油释放量卷烟诱导TK基因突变能力的比较研究

目的:研究卷烟烟气冷凝物对TK基因的致突变作用,并比较不同焦油释放量卷烟样品的TK基因致突变能力。方法:以盒标焦油为5、8和11 mg的市售卷烟(分别为1、2和3号样品)烟气冷凝物为受试物,分别以20、40、60、80、100、150μg/mL的卷烟烟气冷凝物对小鼠淋巴瘤细胞L5178Y tk+/-3.7.2C进行染毒处理,以15μL/mL的二甲基亚砜为溶剂对照,3μg/mL的环磷酰胺为阳性对照,处理3 h,细胞洗涤重新接种培养2 d,加入三氟胸苷继续培养12 d后,计数有突变集落生长的孔数,计算各样品剂量组的三氟胸苷抗性突变频率,并比较不同样品的致突变强度。结果:1号样品在剂量为150μg/mL时、2号样品和3号样品在剂量为100μg/mL时,小鼠淋巴瘤细胞三氟胸苷抗性突变频率是溶剂对照组3倍以上,并且随着卷烟烟气冷凝物剂量的增加,三氟胸苷抗性突变频率呈上升趋势,呈现明显的剂量-反应关系,3种卷烟样品的TK基因致突变强度分别为0.37、0.36和0.38。结论:3种卷烟样品的烟气冷凝物均对小鼠淋巴瘤细胞表现出TK基因致突变作用,比较3种样品的致突变强度发现,卷烟烟气的致突变强度与焦油释放量无明显相关关系。