烟碱型乙酰胆碱受体激动剂的3D-QSAR研究

对34个烟碱型乙酰胆碱受体激动剂采用比较分子场分析法(CoMFA)进行了结构与活性的关系研究,构建了CoMFA模型,该模型交叉验证相关系数为0.540,非交叉验证相关系数为0.952,证明该模型有较好的拟合能力和预报能力.通过等势图直观地给出了分子周围立体场(38.4%)和静电场(61.6%)对化合物活性的影响,为设计高活性的杀虫剂提供了理论依据.

烟碱型乙酰胆碱受体激动剂GTS-21对鼠实验性结肠炎的影响

目的:通过建立葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的鼠结肠炎模型,探讨alpha7烟碱型乙酰胆碱受体(alpha7 nicotinic acetylcholine receptor,α7n ACh R)激动剂GTS-21改善模型鼠结肠炎症的效果及可能机制。方法:8~10周龄SPF级雄性BALB/c小鼠随机分为正常对照(CON)组、DSS模型组、GTS-21治疗组(每组8只)。DSS模型组采用自由饮用含3.5%DSS水造模,治疗组自由饮用3.5%DSS水,同时给予GTS-21[10 mg/(kg·d),腹腔注射],共7 d,对照组予生理盐水,每天予各组鼠疾病活动性评分(DAI评分)。第8天处死小鼠,观察结肠黏膜组织大体改变并测其长度、湿重,HE染色后行肠组织学炎症(HI)评分;细胞因子芯片筛选变化的细胞因子;ELISA法进一步检测芯片筛选出的变化明显的细胞因子。结果:(1)DSS组鼠结肠长度变短[(8.22±0.37)cm vs.(11.65±0.30)cm,n=8,P<0.001],DAI评分较正常组增高[(1.51±0.10)分vs.0分,n=8,P<0.001],HI评分升高[(20.5±3.9)分vs.(0.9±0.4)分,n=8,P<0.001],表明造模成功;(2)给予烟碱型乙酰胆碱受体激动剂GTS-21的DSS模型鼠,DAI评分下降[(0.25±0.10)分vs.(1.51±0.10)分,n=8,P<0.001];结肠长度较DSS组改善[(9.42±0.32)cm vs.(8.22±0.37)cm,n=8,P<0.05];HI评分减低[(7.5±2.0)分vs(20.5±3.9)分,n=8,P<0.01],提示GTS-21能改善DSS诱导的鼠结肠炎症;(3)细胞因子芯片筛选实验结果表明,DSS组γ干扰素诱导单核细胞因子(monokine induced by IFN-γ,CXCL9/Mig)升高最明显,此外肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin 1β,IL-1β)、γ-干扰素(interferonγ,IFN-γ)也明显升高;(4)进一步ELISA检测芯片变化最明显的CXCL9/Mig,发现DSS组鼠血清CXCL9/Mig明显升高(P<0.05),给予GTS-21后,血清CXCL9/Mig降低(P<0.05)。结论:GTS-21能减轻实验结肠炎鼠肠道炎症,该作用可能与减低趋化因子CXCL9/Mig水平,进而减少炎症细胞的肠道聚集有关。

α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂对TGF-β1介导的血管外膜成纤维细胞表型转化影响的体外研究

目的 :探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nicotinic acetylcholine receptor,α7 nAchR)与血管外膜成纤维细胞(adventitial fibroblasts, AF)表型转化间的关系。方法:选取雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠,用组织切块法培养其胸主动脉外膜AF。为评估转化生长因子β1(transforming growth factor-β1, TGF-β1)刺激AF表型转化的作用,将体外培养的AF分为空白对照组A、TGF-β1处理24 h组和TGF-β1处理48 h组3组,处理结束后分别应用实时定量PCR和免疫印迹试验,检测相α7 nAchR基因和蛋白的表达以及α-肌动蛋白(αsmooth muscle actin,α-SMA)和Ⅰ型胶原的表达情况。为进一步探讨α7 nAchR的激活能否抑制TGF-β1刺激表型转化及其分子机制,另将体外培养的AF分为空白对照组B、TGF-β1处理48 h组及TGF-β1处理48 h合并α7 n AchR激活剂PNU-282987处理组3组,处理48 h后用免疫印迹法检测α-SMA和Ⅰ型胶原的表达及细胞外调节蛋白激酶1/2 (extracellular regulated protein kinases1/2, Erk1/2)磷酸化情况。结果 :与空白对照A相比,TGF-β1可使α7 n AchR的基因和蛋白表达明显降低(P<0.05),同时TGF-β1可使α-SMA和Ⅰ型胶原的表达明显增加(P<0.05)。α7 nAchR激动剂PNU-282987可抑制TGF-β1刺激的AF中α-SMA和Ⅰ型胶原的表达,亦可抑制TGF-β1刺激的Erk1/2磷酸化。结论:α7 nAchR的抑制参与TGF-β1介导的血管AF表型转化,其机制可能与Erk1/2磷酸化有关。

α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂抑制骨水泥微粒刺激小鼠外周血单核细胞分泌炎性因子

目的探讨α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7n AChR)激动剂PNU282987对骨水泥微粒刺激小鼠外周血单核细胞分泌炎性反应因子的影响及其分子机制。方法分离培养小鼠外周血单核细胞,使用聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)微粒刺激后,ELISA检测培养上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量;RT-PCR检测细胞TNF-α、IL-1β和IL-6的mRNA表达;Western blot检测p-p65、p65、p-JAK2、JAK2、p-STAT3、STAT3及β-actin的表达;ELISA检测NF-κB DNA结合活力。结果单核细胞经PMMA微粒刺激后,上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量明显增高(P<0.05);细胞TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达明显增高(P<0.05);p65、JAK2和STAT3磷酸化明显增强(P<0.05);NF-κB DNA结合活力明显增高(P<0.05)。不同浓度PNU282987作用后,上清液中TNF-α、IL-1β和IL-6的含量呈浓度依耐性下降(P<0.05);细胞TNF-α、IL-1β和IL-6 mRNA表达呈浓度依耐性下降(P<0.05);总p65、JAK2和STAT3的表达不变;p-p65、p-JAK2和p-STAT3的表达呈浓度依耐性下降(P<0.05);NF-κB DNA结合活力也呈浓度依耐性下降(P<0.05)。结论α7n AChR激动剂PNU282987能显著抑制PMMA骨水泥微粒所诱导的小鼠血单核细胞炎性反应因子的分泌。

α7-烟碱型乙酰胆碱受体激动剂对精神分裂症认知缺陷和阴性症状治疗:随机双盲对照研究的meta分析（英文）

背景:现有α7-烟碱型乙酰胆碱受体激动剂(α7-nAChR受体激动剂)对精神分裂症的认知障碍和阴性症状治疗的临床研究结果不尽一致。目的:评估α7-烟碱型乙酰胆碱受体激动剂在治疗精神分裂症认知缺损和阴性症状的临床疗效和安全性。方法:PubMed、Embase、ClinicalTrials.gov、Cochrane Library和中国知网、万方、VIP数据库进行文献检索,检索时间截止于2017年5月26日。Meta分析双盲随机对照试验中α7-nAChR受体激动剂的作用,评估α7-nAChR受体激动剂对精神分裂症的总体认知功能和阴性症状的临床疗效。通过计算药物和安慰剂之间的平均差(SMDs),评估α7-nAChR受体激动剂能否作为有效的抗精神病药物。结果:8个低偏倚研究纳入了meta分析。我们没有发现α7乙酰受体激动剂对精神分裂症患者的认知障碍(SMD=-0.10(-0.46,0.25),I^2=88%)和阴性症状(SMD=0.13(-0.04,0.30),I^2=64%)有明显疗效。敏感性分析也印证了此结果。药物总体安全且耐受性良好,在不良事件(RR=1.02,[0.85,1.23])和脱落率(RR=1.04,[0.61,1.78])与安慰剂对照无显著差异。根据GRADE评级,该meta分析结果的证据强度为"中"。结论:α7-nAChR受体激动剂可能不是有效地改善精神分裂症患者总体认知障碍和的阴性症状的药物。

α7烟碱型乙酰胆碱受体对围手术期神经认知功能的影响研究进展

α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在中枢神经系统和免疫系统中广泛表达,发挥神经-免疫调节作用。一方面,α7nAChR参与神经递质的传递、兴奋性信号的传导和突触可塑性的维持,对于保持神经认知功能的正常与稳定具有重要意义;另一方面,α7nAChR作为胆碱能抗炎通路的重要组成部分,参与调节中枢系统炎症反应、氧化应激、细胞凋亡和自噬等生理、病理过程,发挥免疫调节和神经保护作用,是改善围手术期神经认知功能的潜在靶点。本文对α7nAChR的生物学特征及其对围手术期神经认知功能的影响进行综述,以期为临床改善手术患者的围手术期神经认知功能提供新的思路和方法。

α7烟碱型乙酰胆碱受体mRNA和乙酰胆碱及胆碱酯酶对急性呼吸窘迫综合征患者早期病情评估及预测其发生多器官功能障碍综合征的价值研究

目的探讨外周血中α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAchR)mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶对急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者早期病情评估及预测其发生多器官功能障碍综合征(MODS)的价值。方法本研究采用前瞻性观察性研究方法。选取2020年8月至2022年10月在重庆市人民医院重症医学科住院的需要呼吸机治疗的ARDS患者65例。于确诊ARDS后24 h内检测外周血单个核细胞α7nAchR mRNA及外周血乙酰胆碱和胆碱酯酶水平,并进行与患者疾病严重程度有关的急性生理学与慢性健康状况评分系统Ⅱ(APACHEⅡ)和MODS评分。观察治疗28 d期间MODS发生情况,据此分为MODS组(31例)和非MODS组(34例)。比较2组上述临床资料。分析α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶水平与APACHEⅡ、MODS评分的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶对ARDS患者发生MODS的预测价值。结果MODS组α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶水平明显低于非MODS组[0.23(0.12,0.32)比0.69(0.58,0.87)、(201±79)mg/L比(317±80)mg/L、2319(1893,4241)U/L比4788(3831,5379)U/L],差异均有统计学意义(均P<0.001)。α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶水平与APACHEⅡ、MODS评分均呈负相关(APACHEⅡ评分:r=-0.789、-0.650、-0.635,均P<0.001;MODS评分:r=-0.832、-0.658、-0.674,均P<0.001)。α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶预测ARDS患者发生MODS的ROC曲线下面积、敏感度、特异度分别为0.964、100.0%、83.9%,0.848、88.2%、77.4%,0.845、100.0%、58.1%;前二者预测价值较高。结论α7nAchR mRNA、乙酰胆碱、胆碱酯酶水平可反映ARDS患者早期病情及预测MODS发生,其中α7nAchR mRNA、乙酰胆碱预测价值较高。

α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂通过抑制核转录因子-κB活化可减轻脂多糖诱导的巨噬细胞炎症反应

目的 研究α7烟碱型乙酰胆碱受体（α7nAchR）激动剂对脂多糖（LPS）诱导巨噬细胞炎症反应的调控作用及其分子机制.方法 体外培养RAW264.7巨噬细胞,用LPS诱导炎性细胞模型进行实验.用1、10、100和500μg/L LPS刺激细胞5 h或用100μg/L LPS刺激细胞0、2、4、8、12、24、48、72 h;酶联免疫吸附试验（ELISA）检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达,免疫荧光法检测α7nAchR在巨噬细胞的定位,细胞增殖与毒性试剂盒（CCK8）检测1、10、100、1000μmol/Lα7nAchR激动剂（GTS-21）对LPS刺激后细胞活性的影响;ELISA检测不同浓度GTS-21对LPS刺激后促炎因子TNF-α、白细胞介素-1β（IL-1β）的表达.用100μg/L LPS和100μmol/L GTS-21刺激巨噬细胞,蛋白质免疫印迹试验（Western Blot）检测高迁移率族蛋白B1（HMGB1）表达,免疫荧光法检测HMGB1、NF-κB p65在细胞内的位置变化.结果 100μg/L LPS刺激巨噬细胞24 h时TNF-α表达达高峰.免疫荧光法检测显示,巨噬细胞膜上有α7nAchR存在.α7nAchR激动剂GTS-21无细胞毒性作用,且可呈剂量依赖性地反转LPS诱导细胞活性下降〔（96.2±1.0）%、（92.0±1.1）%比（86.5±2.2）%,均P〈0.05〕.与对照组比较,LPS组细胞上清液中TNF-α（ng/L：453.0±60.6比100.8±3.2）和IL-1β（μg/L：8.21±0.31比0.87±0.16）水平均明显升高（均P〈0.05）;用10μmol/L和100μmol/L GTS-21干预后可剂量依赖性地减少上清液中TNF-α（ng/L：227.5±17.5、81.0±8.8比453.0±60.6）和IL-1β（μg/L：4.86±0.72、2.32±0.45比8.21±0.31）表达水平（均P〈0.05）.GTS-21可明显降低LPS诱导的HMGB1表达水平（灰度值：0.788±0.130比2.061±0.330,P〈0.05）,并反转了LPS诱导的HMGB1胞质转移;同时GTS-21还可逆转LPS诱导的NF-κB p65核转位.结论 α7nAchR激动剂GTS-21通过抑制NF-κB活化途径而减轻LPS诱导的巨噬细胞炎症反应.

意大利蜜蜂α1亚型烟碱型乙酰胆碱受体功能表达和分析

尽管作用于昆虫烟碱型乙酰胆碱受体(nicotinic acetylcholine receptors,nAChRs)的新烟碱类杀虫剂是农作物害虫防治的常用工具,但它们对意大利蜜蜂等传粉昆虫产生严重的负面影响。本研究克隆意大利蜜蜂nAChRα1亚基基因,对其进行系统发育分析,并利用双电极电压钳技术研究α1亚型nAChR与新烟碱类杀虫剂(吡虫啉、噻虫胺和呋虫胺)的相互作用机制。序列比对和系统进化树分析显示,意大利蜜蜂nAChRα1亚基具有典型的nAChRs亚基家族基因结构域特征,与半翅目昆虫的α1亚基关系最远,与同属膜翅目蜜蜂的α1亚基关系最近。将意大利蜜蜂nAChRα1亚基与大鼠nAChRβ2亚基在非洲爪蟾卵母细胞中共表达,电生理结果显示吡虫啉对Amα1/rβ2 nAChR的激动效率最高,噻虫胺最低,而Amα1/rβ2 nAChR对呋虫胺的激动亲和力最高,对吡虫啉最低。这表明意大利蜜蜂nAChRα1亚基是新烟碱类杀虫剂的作用靶标之一,并且Amα1/rβ2 nAChR对不同新烟碱类杀虫剂敏感性存在差异。本研究结果对于开发作用于害虫的新型高选择性杀虫剂具有重要理论指导意义。

α-7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂EVP-6124的Ⅱb期临床试验获得阳性结果

EnVivo制药公司近日在美国神经精神药理学会第50届年会上公布了其研发的新型口服α-7烟碱型乙酰胆碱（Ach）受体激动剂EVP-6124的Ⅱb期临床试验阳性结果。

严重多发伤并急性胃肠损伤家兔的肠道黏膜损伤严重程度及α7烟碱型乙酰胆碱受体的变化

目的:探究严重多发伤并急性胃肠损伤(AGI)家兔的肠道黏膜损伤严重程度及α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7-nAChR)的变化。方法:使用自制重力小型牵引式对(侧)撞机来模拟交通意外致伤以构建严重多发伤家兔模型;创伤严重程度评分(ISS)评估家兔创伤程度;AGI评分评估家兔AGI程度;ELISA法检测血浆二胺氧化酶(DAO)、内毒素及血清TNF-α含量;高压液相色谱法检测尿液乳果糖(L)、甘露醇(M)含量,并计算L/M;平板计数法检测家兔肠道细菌移位情况;HE染色及透射电镜分别观察小肠组织病理变化及超微结构损伤情况;免疫组化法及Western blot检测小肠组织α7-nAChR表达情况。结果:造模12 h后,AGI分级:Ⅰ级40只,Ⅱ级25只,Ⅲ级11只,Ⅳ级4只;与T0比较,T1、T2、T3家兔血浆DAO及内毒素、尿液L/M及血清TNF-α含量、肠道细菌移位率、肠道病理损伤程度随时间的推移依次显著升高(P<0.05),小肠组织α7-nAChR表达随时间的推移依次显著降低(P<0.05)。结论:严重多发伤家兔于早期便出现肠道功能损伤、肠道菌群移位及肠黏膜屏障功能损伤,这可能与α7-nAChR表达降低有关。

中氮茚类α7烟碱型乙酰胆碱受体激动剂的构效关系研究

α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7 nAChR)是一种配体门控型离子通道,在认知、学习和记忆方面具有关键作用,α7 nAChR功能下降与神经精神疾病认知障碍相关。本研究通过在中氮茚的不同位置引入多种类型的取代基,设计合成了一系列中氮茚类衍生物,并用双电极电压钳方法评价了化合物的激动活性。研究发现了16c(EC_(50)为1.60±0.19μmol·L^(-1),E_(max)为69.0%±2.8%)和17b(EC_(50)为2.74±0.74μmol·L^(-1),E_(max)为81.1%±9.3%)两个活性较高的化合物。构效关系研究表明,在中氮茚的6-位和8-位引入小的疏水基团分别能够提高化合物的效价和最大效应。

α7烟碱型乙酰胆碱受体调控线粒体自噬在脓毒症急性胃肠损伤中的作用机制研究

目的分析α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChRs)调控线粒体自噬在脓毒症急性胃肠损伤(AGI)中的作用及机制。方法将清洁级大鼠(均为雄鼠,重量约200g)随机分为脓毒症AGI大鼠模型组(模型组)、模型+迷走切除组、假手术组(Sham组),各10只,于术后6 h取大鼠肠道组织,采用电镜观察线粒体,酶联免疫吸附法检测白介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)。培养RAW264.7细胞,分为α7nAChRs siRNA组、阴性对照组,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测线粒体DNA(mtDNA),采用Western blot法检测P62、parkin水平。结果模型组细胞内线粒体变大,嵴变短变少;模型+迷走切除组线粒体转化为空泡状;Sham组细胞内线粒体较小。模型+迷走切除组、模型组IL-1β、IL-6、TNF-α水平高于Sham组(均P<0.05),模型+迷走切除组明显高于模型组(均P<0.05);α7nAChRs siRNA组mtDNA相对表达量高于阴性对照组(P<0.05),P62、parkin水平低于阴性对照组(均P<0.05)。结论α7nAChRs的失活可减少线粒体自噬,加剧脓毒症AGI局部炎症反应。其可能通过降低巨噬细胞P62、parkin等线粒体自噬相关蛋白水平,上调mtDNA表达的机制实现。

作用于烟碱型乙酰胆碱受体的杀虫剂研究进展

烟碱型乙酰胆碱受体是昆虫体内一类重要的神经蛋白,具有多种亚型结构,是开发高效、安全杀虫剂的重要靶标。针对该靶标已开发了多种杀虫剂,从作用机制和化学结构等方面,分类概述了作用于烟碱型乙酰胆碱受体杀虫剂的研究进展。

α7烟碱型乙酰胆碱受体改善创伤性脑损伤认知功能的研究进展

认知功能障碍是创伤性脑损伤主要的临床特征,这种长期存在的认知功能障碍与神经退行性疾病存在紧密联系,是发生痴呆的危险因素。α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR)在中枢神经元及免疫细胞广泛分布,在调控感觉、认知、递质释放和神经元的保护等方面具有重要作用,更是改善脑损伤后认知行为和神经保护的重要机制。本研究拟探讨α7nAChR在创伤性脑损伤中认知功能障碍作用的研究进展。

α7烟碱型乙酰胆碱受体在单核/巨噬细胞介导的炎症反应与极化调控中的作用

单核细胞和巨噬细胞在健康和疾病中均发挥重要作用,是固有免疫的重要组成,在其介导的炎症反应中保护宿主、清除病原体和调节免疫平衡,可通过清除细胞碎片、异物及调节炎症和愈合过程等维持内环境稳定。根据微环境和细胞激活状态,巨噬细胞可通过改变不同表型影响疾病转归。近二十年人们对胆碱能抗炎通路(CAP)在炎症反应中的作用及机制研究越来越深入,尤其是该通路中的重要结构——α7烟碱型乙酰胆碱受体(α7nAChR),其本质为神经免疫系统的配体门控离子通道,且在调控单核/巨噬细胞吞噬、趋化因子和细胞因子产生、细胞存活和极化等方面发挥重要作用,相关机制涉及NLRP3炎症小体,可作为多种炎症性疾病的潜在治疗靶点。本文综述α7nAChR在炎症和免疫介导的疾病中对单核/巨噬细胞功能调控和极化的作用。

烟碱乙酰胆碱受体及其激动剂的研究进展

烟碱乙酰胆碱受体是离子门控通道型受体,主要分布于神经节细胞膜和骨骼肌细胞膜上。炯碱乙酰胆碱受体激动剂作用于其受体,在神经兴奋性方面发挥着重要的作用。本文对哺乳动物及昆虫烟碱乙酰胆碱受体结构及其作用的研究进行了总结,特别是对烟碱乙酰胆碱受体激动剂作用于哺乳动物及昆虫烟碱乙酰胆碱受体的选择性机理进行了概括,为开发高效、安全的杀虫剂提供了参考。

烟碱型乙酰胆碱受体激动剂通过抑制炎症和蛋白酶活性降低脓毒症引起的急性肾损伤

脓毒症是导致急性肾损伤（AKI）最主要的原因之一，且伴有AKI的脓毒症患者死亡风险更高。到目前为止，尚无针对AKI或脓毒症AKI有效的治疗方法，为此，美国的研究人员最近研究了炯碱型乙酰胆碱受体激动剂（GTS-21）对AKI的影响。

昆虫烟碱乙酰胆碱受体激动剂在犬猫的应用

跳蚤是犬猫最重要最常见的体表寄生虫,其中以猫最为广泛,如猫栉首蚤。跳蚤吸食动物血液,导致动物贫血并可能造成过敏性皮炎;同时,它也是一些病原体的携带者,如立克次体和巴尔通体;另外,跳蚤还是犬复孔绦虫的中间宿主,该绦虫为犬猫常见的肠道绦虫,偶尔也可感染人。