厨油及烟草凝集物对小鼠体外受精的影响

本文就不同浓度的厨房油垢萃取物及烟草凝集物对小鼠体外受精过程及受精卵发育的影响进行了研究。结果表明,500倍稀释的烟草凝集物和50倍稀释的厨油萃取液对小鼠的体外受精过程具有抑制作用,其受精率分别为42.4%和36.5%,与单纯培养液对照组(57.6%)相比,差异有显著性(P<0.05)。此外,50倍稀释的厨油萃取液对小鼠受精卵的发育亦有抑制作用。这提示妇女在妊娠早期尽可能避免接触这些环境化学物质是必要的。

烟草凝集物对家兔胚泡乳酸脱氢酶及过氧化脂质的影响

为探讨吸烟对胚泡发育的影响，观察了烟草凝集物（ＣＳＣ）对孕７天兔胚泡的过氧化脂质（ＬＰＯ）和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）的影响。结果表明，体外培养４ｈ时ＬＰＯ水平比２ｈ显著升高（Ｐ＜０．０５），４ｈＬＤＨ与２ｈＬＤＨ相比差异不显著。ＬＤＨ活力与ＣＳＣ剂量不相关，但ＬＰＯ有随ＣＳＣ剂量增加而上升的趋势，其ｒ值接近Ｐ＝０．０５的显著性水平。提示ＣＳＣ有促进脂质过氧化反应的趋势。

烟草凝集物对家兔受精卵Cu，Zn－SOD酶活性的影响

以Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ为标志酶，研究了烟草凝集物（ＣＳＣ）对家兔受精卵酶活性的影响。结果：２小时培养的各组Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ酶活性分别为５３８．２Ｕ（对照组），４７３．５Ｕ（组Ⅰ），３４８．２Ｕ（组Ⅱ），１１６．４Ｕ（组Ⅲ）；４小时培养的各组Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ酶活性分别为４３６．４Ｕ（对照组），３３２．５Ｕ（组Ⅰ），２３２．１Ｕ（组Ⅱ），５５．８Ｕ（组Ⅲ），计算各组与ＣＳＣ剂量间的相关性，相关系数分别为－０．９９６，－０．９３８，即随着ＣＳＣ量的加大，Ｃｕ，Ｚｎ－ＳＯＤ酶活性下降，结果表明ＣＳＣ对超氧化物歧化酶系统有较强烈的抑制作用。

烟草烟雾凝集物对BEAS-2B细胞氧化应激的影响

目的:研究烟草烟雾凝集物(CSC)对BEAS-2B细胞氧化应激的影响。方法:采用0.02、0.04、0.06和0.08g/L的CSC染毒BEAS-2B细胞24h,并设立空白对照组和DMSO溶剂对照组。分别用CCK-8法和划痕实验检测细胞存活率和细胞迁移能力,荧光探针DCFH-DA法检测BEAS-2B细胞内活性氧(ROS)水平,酶标仪测定细胞内丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:CCK-8结果显示CSC以剂量依赖性的方式降低BEAS-2B细胞存活率;随着CSC浓度的升高,细胞出现空泡增多、针刺样突起、细胞膜及细胞核轮廓模糊、细胞面积明显增大等形态学改变。与空白对照组、DMSO溶剂对照组相比,CSC染毒组细胞迁移距离增加,细胞内ROS水平、MDA含量升高,SOD活性降低(P<0.05)。结论:CSC可引起BEAS-2B细胞发生氧化应激反应。

烟草烟雾暴露对气道上皮细胞转分化改变的初探

目的:观察烟草烟雾暴露人气道上皮细胞(16HBE)后,发生间充质转分化(EMT)样改变。方法:(1)以不同浓度(5~50μg/mL)CSC刺激16HBE 7 d,用CCKit-8检测细胞总体活性,筛选最佳浓度。(2)用CSC最大活性影响浓度刺激16HBE 7 d,观察细胞形态改变,经Western-blot法和细胞免疫荧光技术检测上皮细胞标志物E钙黏蛋白(E-cad)及EMT标记物1型胶原(COL1)、波形蛋白(Vimentin)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平。结果:(1)不同浓度CSC刺激后,16HBE在10μg/mL时OD值最高,为(2.562±0.045)。各浓度间OD值比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)经10μg/mL CSC刺激后,部分16HBE形态由鹅卵石状向长梭形、多角形或星形改变。(3)Western-blot检测发现试验组COL1、MMP-9的蛋白表达量分别为(0.566±0.011)和(0.463±0.003),高于对照组(0.272±0.020)和(0.201±0.023),差异均有统计学意义(P<0.05);而E-cad蛋白表达量则明显低于对照组,分别为(0.301±0.041)和(0.591±0.068),差异有统计学意义(P<0.05)。(4)细胞免疫荧光检测发现试验组COL1、Vimentin和MMP-9蛋白表达量均高于对照组(P<0.05);而E-cad蛋白表达量明显低于对照组(P<0.05)。结论:经CSC刺激后,16HBE可出现转分化样改变。

烟草烟雾凝集物对BEAS-2B细胞caspase-1及相关炎性细胞因子表达的影响

目的观察烟草烟雾凝集物CSC(cigarette smoke condensate,CSC)刺激永生化人支气管上皮细胞(Immortalized human bronchial epithelial cells,BEAS-2B),其caspase-1及相关炎性细胞因子的改变。方法分别以终浓度为0 mg/ml(空白对照与DMSO溶剂对照)、0.015 mg/ml(1/4 IC50)、0.03mg/ml(1/2 IC50)及0.06 mg/ml(IC50)的CSC溶液作用于BEAS-2B细胞8、16和24 h,检测caspase-1活性,并用ELISA方法检测细胞内caspase-1活性及含量和细胞培养上清液中IL-1β和IL-18的水平。结果随CSC刺激浓度增加,BEAS-2B细胞抑制率增大,CSC对BEAS-2B细胞的半数抑制浓度约为0.06 mg/ml。不同浓度CSC处理细胞8和16 h后,1/4IC50、1/2IC50与IC50组caspase-1活性和含量以及IL-1β、IL-18水平均高于对照组(P<0.05),且随染毒浓度增高而增高(P<0.05);不同浓度CSC处理细胞24h后,各染毒组细胞caspase-1活性和含量以及IL-1β、IL-18水平均高于对照组(P<0.05),但1/2IC50组与IC50组caspase-1活性及含量差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CSC处理BEAS-2B细胞可引起caspase-1活化,且IL-1β、IL-18表达水平增高,提示可能存在caspase-1依赖的细胞焦亡(pyroptosis)。