艾蒿提取物对烟草病原菌的抑制作用

采用菌丝生长速率法、孢子萌发法和滤纸片法,对艾蒿的乙醇提取物及其萃取物做生物活性测试.结果表明:在50mg·mL-1的浓度下,艾蒿乙醇提取物对烟草疫霉菌、链格孢菌的菌丝生长抑制率分别为100.00%(96h)、18.51%(168h),对烟草链格孢菌孢子萌发抑制率为76.26%(6h);艾蒿乙醇提取物的石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物对烟草疫霉菌菌丝生长抑制率分别为79.49%(120h)、87.42%(72h).在100mg·mL-1的浓度下,艾蒿乙醇提取物对烟草链格孢菌的菌丝生长抑制率、孢子萌发抑制率分别为58.84%(48h)、100%(6h);艾蒿乙醇提取物的石油醚萃取物、氯仿萃取物、乙酸乙酯萃取物对烟草链格孢菌的菌丝生长抑制率分别为26.11%(96h)、57.17%(72h)、32.87%(48h);艾蒿乙醇提取物的氯仿萃取物对烟草链格孢菌孢子萌发抑制率为80.05%(6h).在50、100、200mg·mL-1的浓度下,艾蒿乙醇提取物对烟草青枯菌均无抑制作用.

箬竹叶提取物对烟草病原真菌的抑制作用

采用菌丝生长速率法和孢子萌发法,对选用无水乙醇、冰乙酸和蒸馏水混合溶剂浸提所得的箬竹叶粗提物以及依次采用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇进行液-液萃取所得的萃取物进行了抑菌活性测试。结果表明:箬竹叶粗提物对烟草链格孢菌和烟草疫霉菌菌丝生长均具有抑制活性,其对两种真菌抑制的EC50值分别为3.98mg·mL-1和0.88mg·mL-1、EC90值分别为7.33mg·mL-1和1.73mg·mL-1;对烟草链格孢菌孢子萌发抑制的EC50值和EC90值分别为4.68mg·mL-1和9.09mg·mL-1。2mg·mL-1的石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取物和萃余水相对烟草链格孢菌菌丝生长的抑制率分别为31.27%、36.18%、6.06%和-7.05%;对烟草疫霉菌菌丝生长的抑制率分别为56.82%、81.53%、12.32%和-18.10%。乙酸乙酯萃取物对烟草链格孢菌和烟草疫霉菌菌丝生长的抑制活性明显高于箬竹叶粗提物,其对两种真菌抑制的EC50值分别为2.99mg·mL-1和0.80mg·mL-1、EC90值分别为5.41mg·mL-1和2.83mg·mL-1。乙酸乙酯萃取物对烟草链格孢菌孢子萌发抑制的EC50值和EC90值分别为1.03mg·mL-1和3.54mg·mL-1。

臭蒿抗菌成分的分离和鉴定

采用硅胶柱层析法对臭蒿粗提物进行分离纯化,利用孢子萌发法对抗菌流分进行活性评价,采用高效液相色谱-质谱联用技术(HPLC-MS)分析抗菌流分的物质组成。结果显示:臭蒿粗提物分离纯化得到13种流分(Fr.1~Fr.13),其中流分Fr.5抗菌活性最好,对流分Fr.5进一步硅胶柱层析分离得到4种流分(Fr.5.1~Fr.5.4)。臭蒿粗提物对烟草链格孢菌孢子的EC50为5.04 g/L,流分Fr.5.2的EC50为0.57 g/L。LC-MS分析出流分Fr.5.2主要由去氧双羟基蒿甲醚(17.00%)、去氧双氢青蒿素(43.65%)、去氧青蒿素(16.15%)组成。以双氢青蒿素为标准品,测得流分Fr.5.2中双氢青蒿素的质量分数为40.95%,双氢青蒿素对烟草链格孢菌孢子的EC50为2.70 g/L,表明流分Fr.5.2中主要抗菌物质为青蒿素衍生物。

箬竹叶提取物抗真菌活性研究

采用闪式提取法提取箬竹叶,并通过菌丝生长速率法对箬竹叶粗提物及其萃取相进行抗真菌活性测定。结果表明:箬竹叶粗提物对深绿木霉和烟草链格孢菌菌丝生长的EC50值分别为2.33 mg·mL^-1、3.67 mg·mL^-1。在粗提物EC50浓度下,各萃取相中,正丁醇相对深绿木霉的抗菌活性最高,菌丝生长抑制率为44.23%;乙酸乙酯相对烟草链格孢菌的抗菌活性最高,菌丝生长抑制率为54.39%。