烟酰胺磷酸核糖转移酶抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)是生命体内200多种氧化还原反应的辅酶,在很多细胞生理过程中发挥着重要作用。烟酰胺磷酸核糖转移酶(Nampt)是哺乳动物NAD合成途径的限速酶,调节着细胞内的NAD水平,是生物体内进行各种生命活动和能量代谢的重要蛋白,具有多种生物学活性。在癌症中,肿瘤细胞为了快速增殖,对细胞内NAD水平的依赖比正常细胞更强。研究表明Nampt有促血管生成活性,支持着一些肿瘤细胞的生长,抑制Nampt酶活性可起到很好的抗肿瘤作用。这使得Nampt成为近年来药物研究中一个非常有吸引力的靶标,Nampt抑制剂被用于肿瘤化疗干预研究。目前有研究报道的Nampt抑制剂共4个:FK866、CHS828、CB30865、IS001。本文就近年来Nampt抑制剂在肿瘤治疗方面的研究进展进行综述,以期为Nampt调控剂的开发和应用提供参考。

FK866对非小细胞肺癌细胞迁移的影响

目的:探讨低浓度烟酰胺磷酸核糖基转移酶(NAMPT)抑制剂FK866对人非小细胞肺癌细胞株(A549细胞)迁移的影响及作用机制。方法:MTT法检测不同浓度FK866对A549细胞增殖的影响;划痕实验检测1.0 nmol/L和10.0 nmol/L FK866对A549细胞迁移的影响;实时定量RT-PCR检测上皮间质转化相关蛋白上皮钙黏素和波形蛋白mRNA的表达量;蛋白质印迹法检测细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2蛋白的表达量。结果:FK866作用时间越长、浓度越高,对A549细胞增殖的抑制作用越明显。FK866作用72 h时的半抑制浓度(IC50)为9.55 nmol/L。以1.0、10.0 nmol/L的FK866预处理细胞48 h,划痕后继续给药48 h,两种浓度的FK866均能抑制A549细胞迁移;如不进行预处理,仅10.0 nmol/L浓度的FK866对划痕愈合有一定的抑制作用;1.0 nmol/L的FK866处理细胞72 h可上调上皮钙黏素和波形蛋白mRNA表达,并激活ERK1/2;以1.0 mmol/L的烟酰胺单核苷酸(NMN)或10.0μmol/L的ERK1/2抑制剂U0126预处理,能够逆转FK866引起的上皮钙黏素和波形蛋白表达上调。结论:低浓度FK866能够通过减少细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸和激活ERK1/2,增加上皮钙黏素表达,进而抑制细胞迁移,对肿瘤转移可能有一定的抑制作用;但其同时促进了波形蛋白的表达,不利于肿瘤的治疗。

内脏脂肪素在胃癌组织中的表达及意义

目的:探讨内脏脂肪素(visfatin)在胃癌中的表达及意义以及与p53的关系。方法:采用免疫组织化学法检测68例胃癌及其癌旁正常胃黏膜组织中visfatin和突变型p53的表达,分析visfatin的表达与患者临床病理特征和p53的关系,以及visfatin与p53的表达对患者生存期的影响。分别用免疫荧光和Western blot方法检测visfatin在不同人胃癌细胞株及正常胃黏膜细胞中的表达;用visfatin特异性抑制剂FK866干预胃癌细胞后,检测细胞增殖、克隆形成能力及p53蛋白的变化。结果:胃癌组织中visfatin与p53的阳性表达率均较正常胃黏膜组织明显升高(均P<0.05),两者表达均与浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关(均P<0.05),且visfatin与p53在胃癌组织中的表达呈明显正相关(r=0.404,P=0.001);visfatin与p53阳性表达患者中位生存时间较各自阴性表达患者明显缩短(均P<0.05),联合visfatin与p53分析显示,两者均阴性患者、两者之一阳性患者、均阳性患者的中位生存时间依次降低(χ2=15.83,P=0.000)。细胞免疫荧光和Western blot结果均显示,visfatin在不同胃癌细胞株中表达均不同程度高于正常胃黏膜细胞,其中BGC823细胞表达量最高(均P<0.05);用FK866处理后,BGC823细胞增殖与克隆形成能力明显降低,p53蛋白表达明显下调(均P<0.05)。结论:visfatin在胃癌组织中表达增高且可能与p53协同发挥促肿瘤进展的作用。

FK866增强厄洛替尼对TKI耐药非小细胞肺癌A549凋亡作用的研究

目的探讨FK866对酪氨酸激酶抑制剂耐药非小细胞肺癌A549细胞凋亡的影响及其可能的机制。方法FK866和厄洛替尼单药以及两者联合作用A549细胞，72h后，MTT法检测细胞的增殖并计算细胞活度，用流式细胞学检测A549细胞凋亡率。结果厄洛替尼联合FK866比单药组降低了A549的细胞活度，流式细胞学显示二者联合比单药更能促进A549细胞的凋亡。结论初步得出FK866联合组比单药组更能抑制A549细胞的增殖，促进A549细胞的凋亡。

脂肪因子在代谢综合征中的作用新进展

代谢综合征（ metabolic syndrome ，MS）是心血管多种危险因素在个体内集聚的状态，包括肥胖尤其是向心性肥胖、胰岛素抵抗（ insulin resistance ，IR）、2型糖尿病（ type 2 diabe-tes mellitus，T2DM ）、血脂异常、高血压、冠心病、非酒精性脂肪肝、低度炎症反应等。其中肥胖和IR为中心环节［1］。白色脂肪组织（white adipose tissue，WAT）是不均匀的混合物，主要成分为前脂肪细胞和脂肪细胞，还包括渗透入WAT的非脂肪细胞和组织成分：如内皮细胞、巨噬细胞、血管、神经等。 WAT可分泌多种脂肪因子［2］，自1994年Halaas等应用DNA重组技术，在大肠杆菌中合成肥胖基因表达产物，并命名为瘦素以来，已发现10余种脂肪因子，包括瘦素（ Lep-tin）、脂联素（ Adiponectin ）、纤溶酶原激活物抑制剂-1（ plas-minogen activator inhibitor-1， PAI-1）、血管紧张素原（ angio-tensinogen，AGT）、血清淀粉样蛋白 A （ serum amyloid A， SAA）、抵抗素（Resistin）、锌α2糖蛋白（zinc-α2-glycoprotein， ZAG）、Apelin、视黄醇结合蛋白-4（ retinol binding protein-4， RBP-4）、Vaspin （ visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor ）、内脂素（ Visfatin ）、网膜素（ Omentin ）、趋化素（ Chemerin ）。渗透入WAT的炎症细胞分泌的炎症因子：肿瘤坏死因子-α（ tumor necrosis factor-α，TNF-α）、白细胞介素-6（Interleukin-6，IL-6）也属于脂肪因子。现将脂肪因子在MS，特别是在肥胖及IR中的作用新进展综述如下。