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热休克培养对bFGF转染骨髓间充质干细胞FGFRs及凋亡相关蛋白的影响
被引量:
1
1
作者
李锦
《中国卫生标准管理》
2018年第16期134-137,共4页
目的探讨热休克培养对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)及Bcl-2、...
目的探讨热休克培养对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)及Bcl-2、Bax、Caspase-3等凋亡相关蛋白的影响。方法 4周龄雄性SD大鼠处死后获取BMSCs,24h热休克培养,分别转染b FGF基因过表达腺病毒载体Ad-b FGF和空载体Ad-GFP,并设立阴性对照组,q RT-PCR和Western blot法分别鉴定3组细胞b FGF基因和蛋白的表达情况,Western blot法测定FGFRs、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况。结果转染后48h,RT-PCR和Western blot结果显示,转染Ad-b FGF组细胞有b FGF基因和蛋白表达,而阴性对照组和空载体Ad-GFP组未检测;Western blot结果表明,与阴性对照组和空载体Ad-GFP组相比,转染Ad-b FGF组FGFRs、Bcl-2表达增高,而Bax、Caspase-3表达下降,Bax/Bcl-2比值下降(P<0.05),阴性对照组和空载体Ad-GFP组差异无统计学意义(P>0.05)。结论腺病毒介导的基因转染技术能实现b FGF转染到BMSCs中,借助于热休克培养能提高FGFRs表达水平,并增强细胞抗凋亡能力,有望成为基因治疗的理想载体。
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关键词
腺病毒介导
碱性成纤维细胞生长因子
热休克培养
骨髓间充质干细胞
成纤维细胞生长因子受体
凋亡相关蛋白
下载PDF
职称材料
共培养体系中重组结核杆菌热休克蛋白10对破骨细胞相关基因表达的影响(R68)
被引量:
1
2
作者
张元豫
刘霞
+2 位作者
李坤
郭永荣
白靖平
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期755-760,788,共7页
目的观察重组结核杆菌热休克蛋白10(CPN10)对成骨细胞(OB)-外周血单个核细胞(PBMs)共培养体系中破骨细胞生成及相关基因表达的影响。方法建立培养上清相通但二者互相不接触的成骨细胞一单个核细胞共育模型。实验分对照组和CPN10(10μg/...
目的观察重组结核杆菌热休克蛋白10(CPN10)对成骨细胞(OB)-外周血单个核细胞(PBMs)共培养体系中破骨细胞生成及相关基因表达的影响。方法建立培养上清相通但二者互相不接触的成骨细胞一单个核细胞共育模型。实验分对照组和CPN10(10μg/ml)处理组。主要观察指标:①采用TRAP染色及扫描电镜检测破骨细胞生成及小牛骨磨片吸收陷窝,②应用Realtime PCR检测与破骨细胞生成相关基因NFATc1、c-Fos、RANKL、OPG的基因表达。结果两组细胞均有TRAP阳性多核破骨细胞生成,并在小牛骨磨片上形成吸收陷窝;但对照组所获TRAP阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及面积均显著小于CPN10组。Realtime PCR检测结果显示CPN10组与对照组相比NFATc1、c-Fos、RANKL、OPG相对浓度分别为7.410±1.738、8.844±1.981、22.4272±2.058、2.445±0.2517(P<0.05),对照组各基因表达均显著低于CPN10组。结论 CPN10在成骨细胞-单个核细胞(OB-PBMs)共培养体系中可促进OC的生成及骨吸收,CPN10通过对成骨细胞的作用,致其分泌的OPG/RANKL比例失调,并上调破骨细胞相关基因NFATc1、c-Fos、RANKL、OPG的基因表达。
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关键词
重组结核杆菌
热
休克
蛋白10
破骨细胞生成
共
培养
核因子KB受体活化因子配体
活化T细胞核因子1蛋白
护骨素
C-Fos
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职称材料
题名
热休克培养对bFGF转染骨髓间充质干细胞FGFRs及凋亡相关蛋白的影响
被引量:
1
1
作者
李锦
机构
福建省老年医院/福建医科大学教学医院心血管内科
出处
《中国卫生标准管理》
2018年第16期134-137,共4页
基金
福建省卫生计生委青年科研课题(2016/1/27)
文摘
目的探讨热休克培养对碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,b FGF)转染骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)后成纤维细胞生长因子受体(fibroblast growth factor receptors,FGFRs)及Bcl-2、Bax、Caspase-3等凋亡相关蛋白的影响。方法 4周龄雄性SD大鼠处死后获取BMSCs,24h热休克培养,分别转染b FGF基因过表达腺病毒载体Ad-b FGF和空载体Ad-GFP,并设立阴性对照组,q RT-PCR和Western blot法分别鉴定3组细胞b FGF基因和蛋白的表达情况,Western blot法测定FGFRs、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达情况。结果转染后48h,RT-PCR和Western blot结果显示,转染Ad-b FGF组细胞有b FGF基因和蛋白表达,而阴性对照组和空载体Ad-GFP组未检测;Western blot结果表明,与阴性对照组和空载体Ad-GFP组相比,转染Ad-b FGF组FGFRs、Bcl-2表达增高,而Bax、Caspase-3表达下降,Bax/Bcl-2比值下降(P<0.05),阴性对照组和空载体Ad-GFP组差异无统计学意义(P>0.05)。结论腺病毒介导的基因转染技术能实现b FGF转染到BMSCs中,借助于热休克培养能提高FGFRs表达水平,并增强细胞抗凋亡能力,有望成为基因治疗的理想载体。
关键词
腺病毒介导
碱性成纤维细胞生长因子
热休克培养
骨髓间充质干细胞
成纤维细胞生长因子受体
凋亡相关蛋白
Keywords
adenovirus mediated
basic fibroblast growth factor
heat shock culture
bone marrow mesenchymal stem cells
fibroblast growth factor receptors
apoptosis related proteins
分类号
R-33 [医药卫生]
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职称材料
题名
共培养体系中重组结核杆菌热休克蛋白10对破骨细胞相关基因表达的影响(R68)
被引量:
1
2
作者
张元豫
刘霞
李坤
郭永荣
白靖平
机构
新疆医科大学附属肿瘤医院骨科
新疆医科大学第一附属医院病理科
新疆自治区人民医院骨科
出处
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014年第7期755-760,788,共7页
基金
新疆维吾尔自治区自然科学基金(2011211A054)
文摘
目的观察重组结核杆菌热休克蛋白10(CPN10)对成骨细胞(OB)-外周血单个核细胞(PBMs)共培养体系中破骨细胞生成及相关基因表达的影响。方法建立培养上清相通但二者互相不接触的成骨细胞一单个核细胞共育模型。实验分对照组和CPN10(10μg/ml)处理组。主要观察指标:①采用TRAP染色及扫描电镜检测破骨细胞生成及小牛骨磨片吸收陷窝,②应用Realtime PCR检测与破骨细胞生成相关基因NFATc1、c-Fos、RANKL、OPG的基因表达。结果两组细胞均有TRAP阳性多核破骨细胞生成,并在小牛骨磨片上形成吸收陷窝;但对照组所获TRAP阳性多核细胞数目、吸收陷窝数目及面积均显著小于CPN10组。Realtime PCR检测结果显示CPN10组与对照组相比NFATc1、c-Fos、RANKL、OPG相对浓度分别为7.410±1.738、8.844±1.981、22.4272±2.058、2.445±0.2517(P<0.05),对照组各基因表达均显著低于CPN10组。结论 CPN10在成骨细胞-单个核细胞(OB-PBMs)共培养体系中可促进OC的生成及骨吸收,CPN10通过对成骨细胞的作用,致其分泌的OPG/RANKL比例失调,并上调破骨细胞相关基因NFATc1、c-Fos、RANKL、OPG的基因表达。
关键词
重组结核杆菌
热
休克
蛋白10
破骨细胞生成
共
培养
核因子KB受体活化因子配体
活化T细胞核因子1蛋白
护骨素
C-Fos
Keywords
Recombinant mycobacterium tuberculosis heat shock protein 10
Osteoclastogenesis
Co-culture
RANKL
NFATcl OPG
c-Fos
分类号
R681 [医药卫生—骨科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
热休克培养对bFGF转染骨髓间充质干细胞FGFRs及凋亡相关蛋白的影响
李锦
《中国卫生标准管理》
2018
1
下载PDF
职称材料
2
共培养体系中重组结核杆菌热休克蛋白10对破骨细胞相关基因表达的影响(R68)
张元豫
刘霞
李坤
郭永荣
白靖平
《中国骨质疏松杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2014
1
下载PDF
职称材料
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