庆大霉素中毒性耳聋豚鼠耳蜗热休克蛋白70的表达及川芎嗪的保护作用(英文)

背景:川芎嗪具有降低庆大霉素的耳毒性作用,但川芎嗪能否通过增加耳蜗热休克蛋白70表达,从而拮抗庆大霉素的耳蜗毒性作用。目的:应用免疫组化及图像分析技术并结合听性脑干反应测试,观察川芎嗪对庆大霉素耳中毒豚鼠耳蜗热休克蛋白70表达的影响。设计:随机对照实验,直线相关分析。单位:沈阳医学院生理教研室和中国医科大学听力研究室。材料:选用清洁级耳郭反射灵敏的健康白色红目豚鼠40只,体质量200～250g,雌雄不拘。随机分为庆大霉素组、川芎嗪+庆大霉素组、川芎嗪组、正常对照组,每组10只。方法:川芎嗪+庆大霉素组每日左侧腹腔注射川芎嗪注射液140m g/kg,同时在右侧腹腔注射硫酸庆大霉素注射液100m g/kg。庆大霉素组:每日腹腔注射硫酸庆大霉素注射液100mg/kg。川芎嗪组每日腹腔注射川芎嗪注射液140m g/kg。正常对照组每日腹腔注射生理盐水2.5m L /kg,各组皆连续用药10d。各组动物混合饲养,每日测量体质量调整药量。在用药前和停药后分别检测各组大鼠听性脑干反应阈值,停药处死后应用SABC 免疫组化和图像分析技术,观察各组豚鼠耳蜗热休克蛋白70表达情况。主要观察指标:①各组大鼠听性脑干反应阈值。②各组大鼠耳蜗热休克蛋白70表达。结果:①豚鼠听性脑干反应阈值:川芎嗪+庆大霉素组、庆大霉素组均明显高于正常对照组犤(21.09±4.50)dBnH L,(36.55±6.13)dBnH L,(2.50±2.75)dBnHL,t=15.764～22.665,P <0.001犦。川芎嗪+庆大霉素组明显低于庆大霉素组(t=9.092,P <0.001)。②豚鼠耳蜗各部位热休克蛋白70表达:庆大霉素组耳蜗Corti's器、血管纹和螺旋韧带、螺旋缘、螺旋神经节4个部位细胞热休克蛋白70阳性反应产物平均灰度值低于正常对照组犤(88.24±4.34,96.85±1.05;121.24±0.92,128.76±1.59;96.15±1.10,98.78±0.54;117.73±1.18,120.51±0.80),(t=6.097～18.307,P <0.001)犦。川芎嗪+庆大霉素组耳蜗Corti’s 器、血管纹和螺旋韧带、螺旋缘、螺旋神经节4个部位细胞热休克蛋白70阳性反应产物平均灰度值明显高于庆大霉素组(92.53±2.25,88.24±4.34;125.20±1.43,121.24±0.92;98.71±0.91,96.15±1.10;118.91±0.46,117.73±1.18,t=3.925～10.415,P <0.001)。③各组各部位热休克蛋白70阳性反应产物平均灰度值与听性脑干反应阈值高度相关(r=-0.8141～-0.9841,P <0.001)。结论:应用川芎嗪注射液可降低听性脑干反应阈值和庆大霉素中毒耳蜗热休克蛋白70的表达,以减轻庆大霉素的耳毒性损伤,从而改善听功能。

热休克蛋白27在神经系统中的生物学作用

热休克蛋白（heat shock protein,HSP）广泛存在于多种生物细胞,属于高度保守的蛋白质家族。它是20世纪70年代由美国学者Tissieres等[1]发现的一类新型蛋白质。热休克蛋白可以上调细胞的应激反应能力,以保护细胞远离各种压力,当细胞遭受高热、氧化还原反应,接触重金属以及氨基酸类似物或细胞毒性药物时会启动神经系统内的热休克蛋白系统。

共伴侣分子Cdc37从人热休克蛋白90复合体解离中ATP的作用机制

目的探讨ATP导致共伴侣分子细胞分裂周期蛋白37(Cdc37)从人热休克蛋白90(HSP90)复合体解离的可能机制,为抗肿瘤新药研发提供理论依据。方法用免疫共沉淀法(IP)捕获人组织淋巴瘤细胞(U937细胞)中HSP90复合体后,进行以下实验:(1)用流式细胞术(FCM)检测经过ADP、17-烯丙基胺格尔德霉素(17-AAG)、亚胺二磷酸腺苷(AMPPNP)、ATP处理后HSP90复合体中的Cdc37含量,并分别与经二甲基亚砜(DMSO)处理的对照组进行比较,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是单纯由ATP结合导致还是依赖ATP水解;(2)用FCM检测对照组及ATP处理后复合体中Cdc37和其他共伴侣分子中S期激酶关联蛋白1 G2等位基因抑制因子(Sgt1)、HSP70相互作用蛋白(HIP)、FK-506结合蛋白(FKBP5)、应激诱导蛋白1(STIP1)、热休克蛋白90腺苷三磷酸酶同系物1激活剂(AHSA1)的变化情况,并用IP-westernblot(IP-WB)进行验证,研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随其他共伴侣分子解离;(3)用IP-WB检测对照组及ATP处理组复合体中HSP90、Cdc37及共伴侣分子Sgt1的磷酸化水平;用FCM检测对照组、ATP组及蛋白激酶抑制剂组复合体中的Cdc37及Sgt1的含量。研究ATP导致Cdc37从HSP90复合体解离是否伴随HSP90、Cdc37及其他共伴侣分子磷酸化。结果与对照组相比,ATP处理后HSP90复合体中Cdc37含量显著下降,而ADP、AMPPNP及17-AAG处理对Cdc37无影响;HSP90复合体中加入ATP导致复合体中Cdc37解离,伴随复合体共伴侣分子Sgt1含量降低;HSP90复合体中加入ATP后,复合体中Cdc37、Sgt1磷酸化水平显著增加。而在HSP90复合体中加入蛋白激酶抑制剂后,会阻断ATP导致的Cdc37及Sgt1与复合体解离。结论HSP90复合体中ATP导致Cdc37解离的可能机理是:(1)ATP结合HSP90导致该复合体构象改变;(2)ATP导致Sgt1与该复合体解离,且在这个过程中伴随Cdc37与Sgt1的磷酸化增加。特异性抑制Cdc37和HSP90结合,是抗肿瘤新药研究的方向之一,研究Cdc37与HSP90解离机制是此类药物开发的基础。

磷脂酶C-γ1在高温诱导热休克蛋白70表达中的作用

目的:研究磷脂酶 C -γ1(phospholipaseC -γ1,PLC- γ1)对高温诱导成纤维细胞热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP 70)表达的影响。方法:以基因敲除方法建立的缺失 plcg1 基因(plcg1 / )及野生型(plcg1+/+ )小鼠胚胎成纤维细胞为模型,Western 免疫印迹 增强化学发光法检测它们在高温诱导时的HSP 70表达,并以酶联免疫吸附( ELISA)法做半定量分析,MTT法对比分析两种细胞的热耐受力。结果:两种细胞经43℃与45℃高温诱导 30 min,都能引起HSP 70合成,但plcg1 / 细胞HSP 70表达水平显著低于 plcg1+/+ 细胞,P<0 01;较低温度(41℃)不能诱导 plcg1 / 细胞 HSP 70 表达,却能引起 plcg1+/+ 细胞 HSP - 70 表达,且 pl cg1 / 细胞的热耐力亦明显低于 plcg1+/+ 细胞。结论:PLC- γ1 参与了热诱导成纤维细胞 HSP70表达的信号转导。

肝细胞癌热休克蛋白27,70,90_α的表达意义

目的探讨HSP27,HSP70和HSP90α在肝细胞癌(HCC)中的表达及其意义.方法采用免疫组化技术对44例HCC和癌旁组织中HSP27,HSP70和HSP90α的表达进行检测结果 HCC和癌旁组织中HSP27阳性率分别为18％和30％,HSP70阳性率分别为68％和27％,HSP90α阳性率分别为63％,和23％.HCC中HSP70和HSP90α阳性率明显高于癌旁组织(x_1~2=7.3,x_2~2=7.8,P<0.01.而HSP27阳性率变化不大(X^2=1.6,P>0.05).HSP70和HSP90α在分化较好和分化不良的HCC中的阳性率分别为54％,85％和50％,80％,两者相比差异显著(X_1~2=4.5,X_2~2=4.2,P<0.05),但与癌周淋巴细胞浸润(X_1~2=3.2,X_2~2=1.4,P>0.05)和转移(X_1~2=2.3,X_2~2=2. 7,P>0.05)无关结论 HCC是HSP70和HSP90α高表达肿瘤.HSP70和HSP90α与HCC分化有关,在HCC发生和发展中起重要作用.

热休克蛋白90阻止剂增强热诱导骨肉瘤细胞杀伤的研究

目的:探讨热休克蛋白90(heat shock protain 90,HSP90)分子伴侣复合物阻止剂17-丙烯胺基-17去甲氧基格尔德霉素(17-allyl-amide-17-demethoxgeldanamycin,17-AAG),对热诱导的骨肉瘤SOSP-9607细胞杀伤作用的影响。方法:采用干细胞集落形成实验、流式细胞术(flow cytometry,FCM)和吖啶橙荧光染色等方法观察比较单纯热疗组与热疗联合17-AAG治疗组对骨肉瘤SOSP-9607细胞活力、凋亡率及形态学影响。结果:干细胞集落形成实验显示,热疗联合17-AAG治疗组较单独热疗对骨肉瘤SOSP-9607细胞的杀伤效应明显增强,P=0.036;Annexin V-FITC染色流式细胞术结果显示,热疗联合17-AAG治疗组所致凋亡率(52.2%)大于单纯热疗组(17.5%);用吖啶橙荧光染色法观察到热疗联合17-AAG治疗组明显见骨肉瘤SOSP-9607细胞固缩着色不均而且较深,细胞核浓缩、裂解等凋亡特征。结论:HSP90分子伴侣复合物阻止剂17-AAG能增强热诱导的骨肉瘤SOSP-9607细胞的杀伤作用。

噪声诱导豚鼠耳蜗组织热休克蛋白的表达及其意义

目的：探讨噪声刺激后豚鼠耳蜗组织热休克蛋白（HSPs）的表达及意义。方法：应用Western印迹技术和免疫组织化学方法，对噪声暴露后豚鼠耳蜗组织HSPs的表达情况进行检测。结果：Western印迹分析表明，分子量为72000的HSP72在噪声暴露后的豚鼠耳蜗中呈阳性表达；其表达的高峰期为噪声刺激后4～6h。HSP72免疫组化定位示三排外毛细胞呈阳性反应。对照组（无噪声刺激）Western印迹和免疫组化结果均为阴性。结论：噪声刺激能明显诱导耳蜗听觉毛细胞HSPs的合成；HSPs参与了听党系统的一种自身防御机制，具有防止蛋白变构或变性、促进病损组织修复的作用。

热休克对人胶质瘤热休克蛋白70表达水平的影响

目的:应用热休克人胶质瘤细胞的方法,观察热诱导热休克蛋白70(heatshockprotein70,HSP70)在人胶质瘤细胞的表达。方法:经43℃热处理2h的人胶质瘤细胞,应用半定量逆转录聚合酶链反应(RTPCR)及免疫组化技术检测HSP70mRNA及蛋白的表达情况。结果:热休克蛋白人胶质瘤细胞表达阳性率为(39.40±14.40)%,对照组为(8.50±4.60)%及HSP70mRNA表达光密度值为0.23±0.05,对照组为0.13±0.03与内参照βactin比值经单因素方差分析q检验显示与对照组相比有明显的升高。结论:热休克的方法可以明显诱导人胶质瘤细胞HSP70的表达。

JNK通路及HSP70在热化疗抑制人小细胞肺癌细胞生长中的作用

目的:研究热化疗对小细胞肺癌生长的影响及其可能的机制。方法:参考临床常用剂量,采用43℃加热联合120μg/L紫杉醇(热化联合组)、43℃加热联合120μg/L紫杉醇及20μmol/LJNK特异抑制剂SP600125(热化联合+SP600125组)、单纯43℃加热(单纯热疗组)、单纯使用120μg/L紫杉醇(单纯化疗组)处理H446细胞,以未处理的H446细胞作对照。应用四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)检测各处理方式下细胞增殖率的变化,通过Western印迹法检测JNK、磷酸化JNK(p-JNK)和HSP70的表达并对数据进行统计学分析。结果:热化联合组细胞增殖率低于对照组、单纯化疗、单纯热疗及热化联合+SP600125组(P<0.05);p-JNK表达水平在热化联合组中表达明显增高(P<0.05),但SP600125可抑制其表达,使热化联合+SP600125组细胞的增殖率相应增高(P<0.05);HSP70在热化联合组的表达低于单纯热疗组(P<0.05),细胞增殖率也发生了相应变化。结论:热疗可以明显增加紫杉醇对H446细胞生长的抑制作用,且这种作用可能是通过激活JNK信号转导通路或抑制HSP70的表达完成的。

感光受体外周蛋白结合蛋白对虫荧光素酶体外折叠的促进作用

目的 探讨感光受体外周蛋白结合蛋白 (PBP)在体外是否有促进变性蛋白质复性的作用。虫荧光素酶用盐酸胍变性 ,然后在 PBP、HSP70、HSP6 0存在下进行体外复性 ,用虫荧光素酶分析系统检测该酶的复性程度。结果显示 PBP对虫荧光素酶的复性能力很低 ,当与 HSP70同时作用时 ,酶活力明显高于 PBP或 HSP70组 ,而 PBP与 HSP6 0组合对酶的复性能力较HSP6 0组未见有明显差异 ;当 PBP,HSP70 ,HSP6 0三者同时存在时 ,酶活力恢复率最高。去除复性缓冲液中的 ATP及其再生系统 ,酶活力的复性率明显下降。结果表明 PBP具有协助 HSP70 ,在 ATP依赖的情况下促进变性虫荧光素酶体外复性的分子伴侣功能。

热休克蛋白70对肠上皮细胞缺氧／复氧后线粒体功能及能量代谢的影响

目的了解Ad-热休克蛋白70（HSP70）对缺氧／复氧损伤后肠上皮细胞线粒体功能及能量代谢的影响。方法取肠上皮细胞株IEC-6分别转染Ad-HSP70腺病毒载体和空腺病毒载体，蛋白质印迹法观察HSP70的表达。取IEC-6细胞分为正常对照组（不作任何处理）、缺氧／复氧组（给予缺氧／复氧处理）、Ad-HSP70转染组（转染Ad-HSP70腺病毒载体后，给予缺氧／复氧处理）。采用噻唑蓝比色法检测细胞内线粒体脱氢酶的活性，高效液相色谱分析法测定细胞能量代谢。结果与转染空腺病毒载体相比，转染Ad-HSP70腺病毒载体可显著增加细胞HSP70的表达。缺氧／复氧组细胞内线粒体脱氢酶的活性明显低于正常对照组（P〈0．01），Ad-HSP70转染组该指标明显高于缺氧／复氧组（P〈0．01）。缺氧／复氧组细胞内腺苷三磷酸含量较正常对照组显著下降，而腺苷二磷酸、腺苷一磷酸含量显著升高；Ad-HSP70转染组细胞能量指标与正常对照组相似（P〉0．05），较缺氧／复氧组有明显改善（P〈0．05或P〈0．01）。缺氧／复氧组细胞能荷为0．615±0．060，明显低于正常对照组（0．748±0．012，P〈0．01）、Ad-HSP70转染组（0．736±0．028，P〈0．01）。结论Ad-HSP70腺病毒载体转染肠上皮细胞可诱导HSP70表达增加，显著提高细胞缺氧／复氧后胞内腺苷三磷酸的含量及细胞能荷，保护线粒体整体功能，提示线粒体是HSP70保护肠上皮细胞缺氧／复氧损伤的主要靶细胞器之一。

阿霉素诱导热休克蛋白72对大鼠肝脏冷缺血-再灌注损伤的保护作用

目的观察阿霉素(DXR)预处理诱导大鼠肝脏热休克反应在肝脏长时间冷缺血-再灌注损伤中对肝细胞的保护作用。方法供体大鼠术前按1 mg/kg由外周静脉注射DXR(DXR组),对照组注射生理盐水。48 h后行肝脏原位冷灌注,获取肝脏后将其在4℃UW液中保存48 h,然后行原位肝移植,再灌注1、3 h。逆转录-聚合酶链反应法测定肝组织肿瘤坏死因子-α(TNF-α)mRNA、中性粒细胞化学趋化性细胞因子(C INC)mRNA、巨噬细胞炎症蛋白-2(M IP-2)mRNA的表达,蛋白质印迹法测定肝组织热休克蛋白72(HSP72)、核转录因子-κB(NF-κB)的表达,测定血清谷丙转氨酶、TNF-α、C INC、M IP-2水平。同时观察7 d生存率。结果DXR组TNF-αmRNA、C INC mRNA、M IP-2 mRNA的表达均低于对照组。DXR组HSP72表达显著,对照组基本无表达;DXR组NF-κB无表达,对照组显著表达。DXR组血清TNF-α、C INC、M IP-2显著低于对照组(P<0.05)。DXR组7 d生存率为50%,对照组为0(P<0.05)。结论DXR预处理大鼠供肝可使肝脏长时间冷缺血-再灌注损伤显著减轻;HSP72的诱导可抑制NF-κB激活导致的炎症反应,对肝实质细胞提供保护作用。

8-甲氧沙林对黑素细胞内游离钙浓度及细胞骨架蛋白形成的影响

目的:观察8-甲氧沙林对体外培养黑素细胞内游离钙浓度、细胞骨架蛋白形成的影响。方法:正常人黑素细胞取自包皮环切术切取的包皮,用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙浓度,用罗丹明结合毒伞素对细胞骨架蛋白进行特异性染色。结果:8-甲氧沙林可使细胞内游离钙离子浓度升高,促进黑素细胞骨架蛋白合成。结论:8-甲氧沙林可能通过诱导黑素细胞内钙离子浓度升高和细胞骨架actin蛋白生成,从而影响黑素细胞的迁移。

严重烫伤后早期大鼠胃黏膜组织中热休克蛋白70表达变化及胰岛素干预作用

目的研究热休克蛋白（HSP70）在严重烫伤早期大鼠胃黏膜组织中动态表达变化及胰岛素和HSP70对严重烫伤早期大鼠胃黏膜组织的保护作用，探讨胰岛素促进HSP70表达的可能机制。方法采用大鼠烫伤模型，以免疫组织化学的方法和显微图像分析方法观察伤后3、6、12、24和48h不同时相点胃黏膜组织中HSP70的表达情况及胃黏膜组织的病理形态学变化。结果治疗组除12h时相点（9．40±1．52，P=0．065）外其余不同时相点HSP70的表达水平分别高于烫伤组相同时相点HSP70的表达水平[（6．80±1．10，8．60±0．55，10．80±1．64，11．40±1．34），P〈0．05]，治疗组各时相点胃黏膜损伤指数分别低于烫伤组相同时相点损伤指数[（4．05±O．36，11．97±1．15，20．98±2．83，13．92±O．94，1．60±0．55），P〈0．05]。病理形态学变化显示对照组胃黏膜组织结构完整无损伤，烫伤早期SD大鼠胃黏膜组织损伤明显，治疗组SD大鼠胃黏膜组织损伤较烫伤组明显减轻。相关分析结果显示，HSP70与胃黏膜损伤指数、血糖之间呈正相关（r=0．904，0．961，P〈0．01）。结论胰岛素能够明显增强严重烫伤早期SD大鼠胃黏膜组织内HSP70的表达，促进胃黏膜组织HSP70的合成，可能是胰岛素保护胃黏膜组织的重要机制之一。

融合蛋白HSP70-EGFP的表达、纯化及其在树突状细胞内化抗原中的应用

目的:研究树突状细胞(DCs)对热休克蛋白70(HSP70)融合蛋白的内化作用.方法:首先原核表达并分离纯化HSP70和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的融合蛋白HSP70-EGFP.实验中所用DCs来源于人外周血.内化实验分3组进行:将1,2组DCs分别与融合蛋白HSP70-EGFP和蛋白EGFP孵育30min;第3组先将DCs与HSP70孵育30min,再与HSP70-EGFP孵育30min.之后将3组DCs转至37℃孵箱内,培养0.5,1,2和24h,应用流式细胞仪检测含HSP70-EG-FP或EGFP的DCs数量.应用IL-12Eli-spot法检测HSP70-EGFP等抗原促进DCs分泌IL-12的效果.结果:①成功获得了重组蛋白HSP70-EGFP,Mr约为97000,HSP70-EGFP表达量占总蛋白的35.7%.纯化后的融合蛋白HSP70-EGFP溶液经紫外线灯照射时发出鲜绿色的荧光.②流式细胞仪检测结果显示在37℃孵育0.5h后,HSP70-EGFP孵育的DCs组阳性率为63.3%,其余两组为阴性.在37℃孵育1,2和24h后,3组阳性率均大于80.0%.IL-12Eli-spot检测结果显示,在刺激DCs活化及分泌IL-12的水平上,HSP70-EGFP与脂多糖(LPS)之间的差别无统计学意义(P>0.05),而HSP70-EG-FP的活化DCs能力明显高于EGFP(P=0.001).结论:①受体介导的吞噬作用在DCs内化HSP70-EGFP的初始阶段起主要作用,随孵育时间的延续,吞饮作用占主要地位.②HSP70-EGFP可促进DCs分泌特征性细胞因子IL-12.

耐热转基因植物研究进展

过表达热激蛋白基因或间接地改变热激转录因子的含量获得耐热转基因植物,除了热激蛋白,也可提高渗透调节物的含量,增加去细胞毒害的酶和改变细胞膜流动性来提高植物的耐热性。有研究表明Hsps与植物耐热性的直接联系可能是最大限度减少损害细胞的蛋白质。尽管上述提到的其他三种获得耐热转基因植物的方法具体的操作不一样,但都是间接地更有利于营造强还原和高能量的细胞内环境,从而最大限度地减少有害蛋白质的积聚。因此阻断蛋白质代谢。

顺铂作用卵巢癌细胞株的蛋白质组学研究

应用蛋白质组学技术观察顺铂作用于人卵巢癌SKOV3细胞株后蛋白质分子的表达差异, 探讨蛋白质组学方法在化疗药物抗肿瘤作用机制研究方面的应用. 用顺铂(6 mg/mL)作用人卵巢癌SKOV3细胞6 h, 分别收集实验组与对照组细胞, 裂解并提取细胞内总蛋白; 以固相IPG胶条(17 cm, pH4～7)为载体, 进行第一向等电聚焦和第二向SDS-PAGE电泳, 得到实验组与对照组双向电泳凝胶图; 经考马斯亮蓝染色后, 在PDQuest软件的辅助下进行实验组与对照组蛋白质表达的比较, 选择并切取明显差异点共11个, 经肽质量指纹谱(PMF)和串级质谱(MS/MS)分析, 检测出差异点中包含的主要蛋白. 通过质谱分析显示, 顺铂处理后表达明显上调的有原肌球蛋白家族、肌动蛋白家族、热休克蛋白60(HSP60)、磷酸丙糖异构酶(TIM)家族等; 表达下调的有烯醇酶家族等. 这几类蛋白质多参与细胞内能量代谢、细胞形态维持、细胞转化凋亡等生理过程, 提示顺铂的抗肿瘤机制可能与此有关.

Wnt-β-catenin信号通路特异性分子靶向药物研究进展

Wnt-β-链蛋白（β-catenin）信号通路具有调节细胞增殖、凋亡、组织修复等作用,该通路信号的异常与许多疾病相关包括纤维化、癌症等[1-2]。该通路关键环节均可成为临床治疗靶点,目前,干预该通路的靶向治疗剂取得了一定成果,部分治疗剂已进入临床试验阶段,但开发出安全、有效的治疗药物的任务还很艰巨。目前,经典WNT信号通路的特异性分子靶向药物大致有5类：β-catenin-T淋巴细胞因子（TCF）拮抗剂,

热休克蛋白70-2（HSP70-2）基因多态性与冠心病的相关性研究

目的 探讨热休克蛋白70-2（HSP70-2）基因＋1267A/G多态性在中国汉族人群中的分布及与冠心病的相关性.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术,对汉族185例冠心病患者及149名正常人群HSP70-2基因＋1267A/G多态性,基因型及等位基因分布进行研究.结果 研究人群中存在HSP70-2基因＋1267A/G多态性,基因型符合Hardy-Weinberg平衡,冠心病患者G等位基因频率显著高于对照组（61.89%vs51.68%,P＜0.01）.Logistic回归分析得出：HSP70-2基因＋1267A/G多态性（AG＋GG）基因型是冠心病的独立危险因素,（AG＋GG）基因型比AA基因型的OR=2.031,95%CI=1.024～4.026.结论 HSP70-2基因＋1267A/G多态性与冠心病有关,G等位基因可能是汉族人群冠心病的遗传危险因素.

热休克蛋白27致敏对大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的 观察热休克蛋白27（HSP27）致敏对大鼠视网膜神经节细胞（RGC）凋亡的影响.方法 35只雌性Wistar大鼠分为HSP27致敏组、硼酸盐缓冲液（BBS）对照组、正常组,分别为15、15、5只大鼠.给予HSP27致敏组大鼠后肢皮下注射100μg的HSP27和完全弗式佐剂,腹腔注射1μg百日咳毒素.BBS对照组大鼠于相同部位注射等量BBS.正常组大鼠不作任何处理.注射前3d及注射后3d,1、2、4、6、8周,检测大鼠双眼眼压.注射后4、6、8周行视网膜冰冻切片,采用原位末端标记法检测RGC的凋亡情况,计算细胞凋亡率;采用酶联免疫吸附试验检测大鼠血清和脑脊液中HSP27抗体的含量.结果 HSP27致敏组、BBS对照组、正常组大鼠注射前后眼压均无明显波动,差异均无统计学意义（P＞0.05）.HSP27致敏组于注射后4周即可见RGC凋亡,注射后6周凋亡的RGC明显增多.BBS对照组及正常组均未见RGC凋亡.HSP27致敏组大鼠血清、脑脊液中HSP27抗体含量分别于注射后4、6周出现高峰,然后随着注射时间延长而递减.注射后4、6、8周,HSP27致敏组RGC凋亡率、血清中HSP27抗体含量、脑脊液中HSP27抗体含量分别与BBS对照组、正常组比较,差异均有统计学意义（P＜0.05）;BBS对照组RGC凋亡率、血清中HSP27抗体含量、脑脊液中HSP27抗体含量与正常组比较,差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 HSP27致敏可促进大鼠RGC的凋亡.脑脊液中HSP27抗体含量与RGC凋亡趋势一致.