大鼠弥漫性轴索损伤后海马热休克蛋白质70 mRNA表达

目的研究大鼠弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后大脑海马中热休克蛋白质(heat-shockproteins,HSP)70 mRNA的表达变化。方法采用RT-PCR扩增,扩增产物用琼脂糖凝胶电泳检验,观察DAI后大鼠海马中HSP70 mRNA的表达变化。结果损伤后4 h,大鼠海马中HSP70 mRNA的表达增加,24 h表达达高峰,48 h后表达减弱。结论大鼠海马中HSP70 mRNA表达可作为DAI诊断的参考指标。

热休克蛋白质70对大鼠肝脏缺血再灌注后NOS活力的影响

目的为探讨热应激预处理对肝脏缺血再灌注损伤的保护作用的机制,采用局部热应激处理诱导热休克蛋白质(HSP70)的表达,检测了HSP70对肝脏缺血再灌注时NOS活力的影响。方法将实验大鼠随机分为热应激预处理组与非预处理组,对比观察两组动物肝脏缺血再灌注后0、4、8、12、24h期间内肝脏HSP70的表达、NOS活力及血清乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)的活性与肝脏组织学改变。结果热应激预处理组HSP70的表达水平均比非预处理组同一时间点高,而NOS活力及血清LDH的活性较非预处理组低。与非预处理组比较,经热应激预处理肝组织损伤较轻。结论热应激预处理诱导产生的热休克蛋白70保护肝脏缺血再灌注损伤的作用途径之一可能是通过抑制NO的产生,从而降低大量自由基对肝脏的损害。

热休克蛋白70和90α在人胃癌组织中表达及其与胃癌生物学行为的关系

目的:研究热休克蛋白70和90α在人胃癌组织和正常黏膜组织中的表达,探讨其表达与胃癌生物学行为的关系。方法:41例胃癌组织和相应的正常黏膜组织分别行免疫组织化学染色和RT-PCR检测,分析检测结果。结果:热休克蛋白70和90α在胃癌组织中表达分别为75·6%(31/41)和80·5%(33/41),明显高于正常黏膜组织中的表达,在分化较差的肿瘤类型中表达分别为85·2%和88·9%,高于分化较好的肿瘤类型,在淋巴结转移阳性的病例中分别为82·8%和86·2%,高于淋巴结转移阴性的病例,在TNM分期Ⅲ、Ⅳ期的病例中表达分别为80·6%和83·9%,高于其他分期。结论:热休克蛋白70和90α在胃癌组织中明显表达升高,且在晚期的病例中表达高于相对较早期的病例,与胃癌的生物学行为有关。

热休克蛋白_(70)在胃癌组织中表达及与胃癌生物学行为的关系

目的 检测热休克蛋白_(70)在人胃癌组织中的表达,探讨热休克蛋白_(70)表达与胃癌生物学行为的关系。方法 应用免疫组织化学方法检测41例胃癌组织中热休克蛋白_(70)的表达。结果 热休克蛋白_(70)在胃癌组织中的表达高于癌旁正常粘膜组织,在未分化型癌中的表达高于分化型(p<0.05),淋巴结转移阳性的病例中表达高于淋巴结转移阴性的病例(P<0.05),在不同的TNM分期中表达不同,随着分期的增高,表达也呈现增高的趋势。Ⅱ期与Ⅳ期比较具有统计学意义(P<0.05)。结论 热休克蛋白_(70)在胃癌组织中表达升高,并且与胃癌的进展和转移相关。

基于基因组学分析嗜热链球菌KLDS SM的蛋白质水解系统和氨基酸合成途径

为从遗传水平上探究嗜热链球菌KLDS SM蛋白质水解和氨基酸合成的能力,首先基于Illumina Hiseq 2500与Pacbio RSII测序平台对嗜热链球菌KLDS SM进行全基因组测序并绘制基因组图谱;随后从胞外蛋白酶、转运系统、胞内肽酶以及氨基酸合成等方面所涉及的基因进行生物信息学分析;最后对15株已完成全基因组测序的嗜热链球菌的氨基酸合成能力进行比较基因组学研究。结果表明:菌株KLDS SM的基因组由一个1 856 787 bp环状染色体组成,GC含量为39.08%,含有1 732个蛋白质编码基因;菌株KLDS SM具有完整的蛋白水解系统和8种氨基酸的合成能力;15株嗜热链球菌在氨基酸合成方面上相对保守,仅在组氨酸合成途径存在较大的差异。本研究为该菌株氮代谢能力的挖掘提供了理论依据,并在将其开发为发酵剂方面上具有一定指导意义。

脑缺氧缺血损伤新生大鼠热休克蛋白70的合成研究

目的 观察热休克蛋白70（HSP70）在缺氧缺血（HI）新生大鼠脑内的表达。方法 应用免疫组化法检测正常对照组以及HI组不同时间点的脑海马和皮质部位的HSP70阳性细胞数。结果 正常脑组织内未观察到明显HSP70阳性细胞,HI后阳性细胞明显增加。HI后2h即可观察阳性细胞,48h、72h达到高峰,7d时已经明显下降。结论 HI是脑HSP70合成极为敏感的诱因,且HSF70的生成量随HI后时间增加呈动态变化过程。

鸡热休克蛋白70基因克隆、单核苷酸多态性检测及生物信息学分析

试验旨在克隆鸡热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)基因,获得基因序列并分析基因结构和相关遗传变异,检测单核苷酸多态性(SNP)位点在文昌鸡和北京油鸡群体中的分布。试验利用PCR扩增鸡HSP70基因组序列,通过克隆测序寻找基因中的突变位点。在鸡HSP70基因组中共发现3处突变位点,分别位于启动子区(T-564C)、5′非翻译区(A-68G)和编码区(A-1044G)。使用PCR-RFLP方法检测T-564C位点后发现,等位基因C在文昌鸡和北京油鸡中的基因频率分别为0.87和0.55。利用生物信息学分析发现,鸡HSP70基因启动子区域存在一些潜在的转录因子结合位点,如Sp1、AP-1、GATA-1、CREB、MZF1和HSF2等。

杨絮热休克蛋白70(HSP70)结构域蛋白的生物信息学分析、原核表达及生物学活性鉴定

目的揭示杨絮热休克蛋白70(HSP70)结构域蛋白生物信息学特征,并探索该类蛋白外源表达方法及生物学活性。方法通过生物信息学软件对已获得的3个含HSP70结构域蛋白的理化性质进行分析,利用免疫表位数据库和分析资源(IEDB)对该类蛋白的T、B细胞表位进行预测;根据Uniprot数据库提供的氨基酸序列合成相关基因并克隆入pET28a(+)质粒进行原核表达,采用SDS-PAGE检测蛋白表达,表达产物经镍柱纯化后行Western blot鉴定目的蛋白;蛋白浓度定量试剂盒检测蛋白浓度后,分别以鉴定出的目的蛋白为抗原制备BALB/c小鼠哮喘模型,ELISA检测小鼠血清中IgE抗体浓度。结果经生物信息学分析B9N9W6、B9GX02及A0A2K2AYN8蛋白相对分子质量(Mr)分别为71 900、94 600和75 200,均为亲水性蛋白且稳定性较好;经在线预测,共鉴定出3种蛋白的高亲和力T细胞表位13个,B细胞表位14个;SDS-PAGE显示,B9N9W6蛋白、B9GX02蛋白及A0A2K2AYN8蛋白分别在约72 000、95 000和75 000处出现特异性条带,Western blot法也在相应位置出现特异性条带;ELISA检测显示,提取液组和A0A2K2AYN8组IgE表达水平高于PBS组;同A0A2K2AYN8组比较,B9N9W6组及B9GX02组IgE浓度显著增高。结论杨絮HSP70结构域蛋白A0A2K2AYN8、B9GX02及B9N9W6均可原核表达,为可溶性蛋白,且具有生成IgE的生物活性。

高温和香烟对鼠早期胚胎脑蛋白质及热休克蛋白的影响(英文)

背景:应用分子生物学技术与体内/外实验动物模型结合手段,从发育学角度探讨了热休克蛋白(heatshockproteins,HSPs)与胚胎生长发育和畸形发生的内在联系,为充实和推动从分子水平揭示胚胎发育正常或异常的奥秘开辟了一条新的途径。目的:探讨高温、香烟及联合对鼠胚胎脑HSP70及蛋白质合成的影响。设计:随机对照的实验研究。地点、材料和方法:实验在新乡医学院细胞生物学教研室和实验动物中心完成。实验选用SD雄性大鼠100只,雌性大鼠200只合笼过夜,按随机抽签法将150只孕鼠分为高温和高温与香烟联合组,高温组分为37,40,41,42℃4个大组,每一大组随机分为处理时间为1,2,3,4,5min小组,共20组;高温与香烟联合组分为37和42℃两大组,每一大组再分为皮下注射相当于0,0.5,1.0,1.5,2.0支香烟5个小组,共10组。高温组于孕鼠孕第10天进行高温处理,高温与香烟联合组于孕鼠孕第2天进行香烟处理,各组孕鼠高温处理,2h后处死,取胎鼠全脑组织制备匀浆,测量HSP70和蛋白质含量,观察高温及高温+香烟各组胎鼠大脑蛋白质含量及诱导合成的HSP70的含量。主要观察指标:高温、高温与香烟联合对胎鼠脑蛋白质及HSP70变化的影响。结果:高温(40,41,42℃)导致胎脑蛋白质含量从7.01mg下降到5.66mg,与对照组(37℃)比较,差异有显著性意义(F=3.

重组人热休克蛋白70生物活性的快速鉴定

目的 快速鉴定纯化后的重组人热休克蛋白 70 (rHSP70 )的特异性及其是否具有生物活性。方法 将rHSP70与肿瘤细胞内的小分子多肽在一定条件下温育 ,并利用含 5 %甘油的Nativepage电泳分析。 结果 可快速鉴定出rHSP70是否具有生物活性 ,电泳后凝胶可做Western -blot特异性鉴定。结论 该法操作简便 ,重复性好 ,既可快速鉴定rhsp70的生物活性 。

热休克蛋白70的生物学功能及应用的研究进展

热休克蛋白70(HSP 70)是热休克家族中最重要的一员,从细菌到哺乳动物中广泛存在。在正常生理状态下HSP 70表达水平很低,而理化刺激、病理刺激和生理刺激等均能显著诱导其表达。HSP 70具有较强分子伴侣、抗细胞凋亡、抗氧化、免疫调节等功能。本文就HSP 70的结构和分类、主要生物学功能及其在某些疾病治疗方面的应用作一综述。

哺乳动物热休克蛋白70表达的基因调控与生物学功能

热休克蛋白70(HSP70)是热休克蛋白家族中的重要成员,作为一种细胞内源性保护蛋白,当机体或细胞遭受应激时,它可以通过一定的表达调控机制进行显著增量表达,并在一定范围内发挥其特有的生物学功能来抵御或减缓应激对细胞的损伤。

热休克蛋白70的生物学功能及其诱导剂——谷氨酰胺在畜牧业中的应用

热休克蛋白（heat shock protein,HSP）或热应激蛋白（heat stress protein,HSP）是机体受到应激原的刺激后产生的几族高度保守的蛋白质,对维持细胞生存和内环境的稳定起重要作用。其中热休克蛋白70（HSP70）是最重要的一种HSP,它具有多种生物学功能,包括分子伴侣功能、参与免疫反应、

美金胺对脑缺氧缺血新生大鼠热休克蛋白70合成的影响

为评估非竞争性NMDA受体美金胺(Memantine)对缺氧缺血(HI)的脑保护作用,将HI模型鼠(结扎右侧颈总动脉后予8％氧2h)随机分为对照(NC,n=15)组、缺氧缺血(HI,n=25)组,HI前应用美金胺组(PRE,n=25)、HI后应用美金胺组(POST,n=24)。应用免疫组织化学方法观察各组海马及皮质部位热休克蛋白(HSP)70阳性细胞数,进一步从分子水平评估美金胺的脑保护效果。结果显示PRE组和POST组脑HSP70生成量明显低于HI组。提示HI是HSP70生成的强烈诱导剂,美金胺的应用则明显减少了HSP70的生成,具有一定的缺氧缺血脑保护作用。

热激过程中细胞正常蛋白质合成的调控

1.引言近十几年来,分子生物学取得了突飞猛进的发展,这在很大程度上取决于优良的实验系统的应用(包括动物、植物和微生物)。生物有机体与能够显著改变其发育方式的环境之间存在着重要的相互作用,尤其是植物。当环境发生极端变化时,相应地植物细胞生理学方面也要进行快速极端的变化。植物不象动物那样可以从胁迫环境中运动离开,它必须以其它方式调节其生理状态以补偿对植物细胞功能可能有害的胁迫。近七年来,热激反应(heat shock)引起了各国科学家的关注。迄今为止,所有试验过的植物。

热休克蛋白70的结构及其生物学功能研究的新进展

热休克蛋白是一组较为保守的蛋白,是细胞抵御恶劣环境的主要蛋白之一.近来对其结构及功能的研究有了长足的进步,发现了许多新的功能如热休克蛋白在分子伴侣、肿瘤抗原的提呈及肿瘤细胞的抗凋亡等.本文就热休克蛋白70的结构及其生物学功能上的新进展作一概述,

热休克蛋白70应用于肿瘤生物治疗的研究思路与展望

热休克蛋白70是一个强有力的免疫佐剂，它作为分子伴侣参与、促进和维持新生多肽的正确折叠，并调节细胞的生长、发育、分化、死亡。同时又作为一种内源性保护物质保护自身。可多方面活化机体特异性和非特异性免疫反应，产生抗肿瘤免疫效应，在肿瘤的生物治疗方面有着更好的研究前景。

热休克蛋白70对中暑大鼠急性肺损伤的保护作用及机制研究

目的观察热休克蛋白70(HSP70)对急性肺损伤的保护作用。方法 64只SD大鼠按随机数字表法分为假加热正常对照组(Sham组)、中暑组(HS组)、中暑加谷氨酰胺处理组(HS+GLN组)和中暑加槲皮素处理组(HS+QU组),每组16只。Sham组大鼠置于温度23℃,湿度55%±5%环境中,其余3组大鼠置于模拟热气候动物舱(舱内温度39℃,相对湿度65%)内。监测大鼠直肠温度、收缩压和脉率,比较各组大鼠热应激反应的差异。以收缩压从峰值开始下降作为中暑的开始,之后将大鼠移至常温复温。分别在中暑恢复期0h和6h处死大鼠,每个时间点8只,留取支气管肺泡灌洗液(BALF)后分离肺脏组织行组织学观察。采用酶联免疫法检测BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度,以及肺组织匀浆中的HSP70浓度。结果与HS组和HS+QU大鼠比较,HS+GLN组大鼠承受更多的热负荷后才发生HS(P<0.001),起病后的中位生存时间明显延长(P<0.001)。与Sham组比较,HS组大鼠肺组织匀浆HSP70浓度呈时间依赖性升高(P<0.001);HS+GLN组HSP70浓度在各个时点与HS组比较均明显升高(P<0.001),而HS+QU组的HSP70表达则受到明显抑制时点与Sham组比较差异无统计学意义(P>0.05),但明显低于HS组和HS+GLN组(P<0.001)。与HS组和HS+QU组比较,HS+GLN组大鼠BALF中的IL-1β、TNF-α和IL-6浓度明显降低(P<0.001),病理结果显示其肺损伤更轻(P<0.001),而HS+QU组则相反。结论 HSP70具有保护HS大鼠急性肺损伤的作用,其机制可能与增强大鼠热耐受能力和抑制HS大鼠肺部炎症相关。

原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白70在肝癌转移亚细胞中表达上调

建立并应用人H74 0 2肝癌细胞SCID鼠肿瘤转移模型 ,从转移肺组织经原代细胞培养 ,筛选并建立转移亚细胞系M H74 0 2 ,进而运用蛋白质组学技术筛选肿瘤转移相关蛋白 .通过二维电泳技术检测 ,比较M H74 0 2细胞和亲本H74 0 2细胞的总蛋白 ,从多个差异蛋白质点中选择出 3个在M H74 0 2细胞中表达明显上调的蛋白质点进行ESI QUAD TOF质谱分析 ,并在MSDB公共蛋白数据库中进行同源比较和分析鉴定 .初步确定这 3个蛋白质分别为原肌球蛋白 (tropomyosin) ,波形纤维蛋白 (vimentin)和热休克蛋白 70 (heatshock 70protein ,HSP70 ) .这些蛋白质参与细胞骨架构成、蛋白质折叠和蛋白质相互作用等许多正常生理活动 ,并有报道原肌球蛋白和波形纤维蛋白与肿瘤转移有关 .利用蛋白质组学方法发现 ,在肝癌转移亚细胞M H74 0 2中 ,原肌球蛋白、波形纤维蛋白和热休克蛋白 70表达明显上调 ,进一步揭示它们在肿瘤转移中具有重要的作用 .

热休克蛋白70单抗诱导胃癌细胞凋亡

近年研究发现热休克蛋白70（HSP70）具有诱导宫颈癌细胞凋亡的作用。根据抗原与抗体特异性结合的原理，用HSP70单抗处理癌细胞，应能抑制肿瘤细胞合成，HSP70起到抗肿瘤细胞凋亡的作用。我们以胃腺癌MGC-803细胞为材料进行了HSP70单抗诱导胃癌细胞凋亡的研究。