热休克蛋白72在兔视网膜缺血再灌注损伤中的表达及重组人碱性成纤维细胞生长因子对其表达的影响

目的研究兔视网膜缺血再灌注损伤(RIRI)后重组人碱性成纤维细胞生长因子(rh-bFGF)对其组织中热休克蛋白(HSP)72活化程度的影响。方法选取66只大耳白兔,随机分为3组:缺血再灌注模型组(RIRI组30只)、rh-bFGF治疗组(RIRI+rh-bFGF组30只)、正常假手术组(6只),RIRI组、RIRI+rh-bFGF组又平均分为5个亚组(缺血再灌注后6、12、24、48、72h),每组6只大耳白兔。造模初期,RIRI组和rh-bFGF治疗组实验动物分别往玻璃体腔内注入相同剂量的0.9%氯化钠注射液和rh-bFGF溶液,并分别于制模后5个时间点处死动物摘取眼球,组织标本行苏木精-伊红(HE)染色及原位杂交。正常假手术组实验动物给予前房穿刺,无其他操作。常规HE染色后观察各组兔视网膜组织病理学变化,免疫组织化学法检测HSP72表达情况。结果正常假手术组兔视网膜各层次清晰、细胞平行排列且形态规则,视网膜神经节细胞呈单层排列、规则,无空泡变性。RIRI组兔视网膜出现高度水肿,层次紊乱、细胞结构疏松,视网膜神经节细胞出现空泡样变性,神经节细胞数目减少。RIRI+rh-bFGF组兔视网膜结构层次和细胞组织变化与RIRI组变化大致相同,但损害程度较其明显减轻。正常假手术组兔视网膜中没有发现HSP72;与RIRI组比较,RIRI+rh-bFGF组RIRI后5个时间点视网膜组织中HSP72的表达水平增高(P均<0.05)。结论 rh-bFGF对兔视网膜损伤有保护作用。

热处理、UVB辐射及两者联合作用对人表皮黑素细胞合成热休克蛋白72的影响

目的探讨热处理、中波紫外线（UVB）辐射及两者联合作用下，体外培养的人表皮黑素细胞热休克蛋白72（heat shock protein72，HSP72）的变化。方法热处理（42℃，1h／d，连续3d）、UVB辐射（50mJ／cm^2，连续3d）及两者联合（首先42℃，加热1h，然后50mJ／cm^2UVB照射，连续3d）处理正常人表皮（包皮）黑素细胞2h、6h后收集细胞，用实时荧光定量PCR技术和Western印迹技术分别检测不同组别间HSP72 mRNA及蛋白表达水平的差异。结果热处理组（6．584±0．871）及联合作用组（7．269±0．454）与对照组（0．975±0．089）相比，mRNA表达水平明显增加（P〈0．001）；UVB辐射组（0．832±0．084）与对照组相比，mRNA表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。Western印迹结果显示，热处理组（2．022±0．058）及联合作用组（2．080±0．045）HSP72蛋白表达水平明显高于对照组（0．532±0．033，P〈0．001）；UVB组（0．546±0．021）与对照组相比，表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）。析因设计方差分析结果显示，热处理与UVB辐射对HSP72mRNA和蛋白表达均无交互作用（F=2．106，1．399，P〈0．05）。结论热处理引起HSP72表达显著增多，可能与热处理引起黑素细胞功能增强及UVB辐射后的损伤保护作用有关。

细胞外热休克蛋白72作为Toll样受体内源性配体在大鼠缺血再灌注肝损伤中的表达及作用

目的探讨在大鼠缺血再灌注(I/R)肝损伤中,细胞外热休克蛋白72(HSP72)作为Toll样受体(TLR)内源性配体的表达及作用。方法将120只I/R组SD大鼠分为4组,每组30只,均予以I/R处理,其中A组于I/R处理前给予抗HSP72,B组给予重组HSP72,D组给予缺血预处理。同时以假手术组(P组,30只)及非手术组(N组,10只)为对照。之后于不同时间点采集标本,检测血浆丙氨酸转氨酶(ALT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、HSP72及肝组织HSP72mRNA及其蛋白。结果 P组术后血浆TNF-α、HSP72水平较术前均显著升高(P均<0.01)。B组处理后相较I/R组其他分组,血浆ALT、TNF-α、HSP72均显著升高(P均<0.01)。P组及I/R各组的肝组织HSP72mRNA较术前均显著升高,且I/R各组升高较P组更为明显(P<0.01)。结论大鼠肝组织I/R后释放的HSP72可能启动了TLR信号通路,从而导致肝细胞的炎性损伤。

胆道闭锁儿童肝组织中HSP72的表达意义

目的 探讨胆道闭锁儿童肝组织中热休克蛋白72（HSP72）的表达与肝脏纤维化的关系.方法 对2013年6月至2015年6月本院行手术的30例胆道闭锁患儿采用SP免疫组化法测定肝脏组织中HSP72的表达,分析其临床表达的意义及病理资料.结果 肝纤维化较重组HSP72的表达显著低于较轻组（Z=-4.16,P＜0.01）,HSP72表达强度与手术时日龄呈负相关（r=-0.704,P＜0.01）,与术后胆管炎发作呈负相关（r=-0.371,P＜0.05）,HSP72表达强度较高者其自体肝生存率较高（Х^2 =9.48,P＜0.01）.结论 胆道闭锁患儿肝脏组织中HSP72的表达与肝组织纤维化程度密切相关,葛西术后自体肝生存率与HSP72表达的阳性强度有关,可作为预测肝组织纤维化程度及术后预后的参考指标.