热休克蛋白90α、β_(2)-微球蛋白及胃泌素释放肽前体在肺癌患者血清中的表达水平及检测意义

目的:探讨热休克蛋白90α(HSP90α)、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)及胃泌素释放肽前体(ProGRP)在肺癌患者血清中的表达水平及检测意义。方法:选取接受诊治的肺癌患者133例为肺癌组,另选择肺部良性结节患者106例(良性肺病组)及体检健康者112例(对照组)。比较三组血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平,并分析HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP对肺癌的诊断价值;比较肺癌组不同病理类型患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP阳性检出率以及肺癌组化疗后不同疗效患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平。结果:肺癌组血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平高于对照组、良性肺病组(均P<0.05)。血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP联合检测肺癌的AUC为0.861,高于三者单独检测的AUC(均P<0.05)。血清HSP90α、β_(2)-MG在NSCLC阳性检出率高于SCLC,血清ProGRP在SCLC阳性检出率高于NSCLC(均P<0.05)。肺癌组化疗后,无效患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平高于有效和稳定患者(均P<0.05)。稳定患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平高于有效患者(均P<0.05)。结论:肺癌患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平升高,且与不同病理类型和化疗效果有关,三者联合检测对肺癌诊断价值较高。

肺癌热休克蛋白70-多肽复合物的抗肿瘤免疫效应研究及其与热证的相关性

目的:观察不同证候患者肺癌组织热休克蛋白70-多肽复合物(HSP70-PC)对人类肺癌A-549细胞的抗肿瘤免疫效应,探讨其抗瘤效应是否存在证候相关性。方法:运用ADP亲和层析、DEAE离子交换层析、SDS-PAGE、Westem-blot、细胞培养、MTT检测等方法从人体肺癌组织及远端正常肺组织分离纯化HSP70-PC,观察不同证候患者肿瘤来源HSP70-PC对人外周血单个核细胞(PBMC)的激活增殖效应及致敏淋巴细胞对人肺癌A-549细胞的肿瘤细胞毒杀伤效应。结果:①热证癌PC组和非热证癌PC组促淋巴细胞增殖效应较空白对照组显著升高;所致敏淋巴细胞对人肺癌细胞均有很强的杀伤效应,与空白对照组相比,有显著性差异。②热证癌PC组较非热证癌PC组促淋巴细胞增殖效应及肿瘤细胞毒杀伤效应均有明显增高趋势。③肺癌患者远端正常肺组织HSP70-PC未见显著刺激淋巴细胞增殖作用,杀伤效应也未见明显升高。结论:人类肺癌组织HSP70-PC能够诱导针对人肺癌细胞的抗肿瘤免疫效应,其抗瘤效应很有可能与热证存在相关性。

热休克蛋白-肽复合物与肿瘤免疫

热休克蛋白（heat shock protein,HSP）是一类在生物进化过程中高度保守,广泛表达于所有生命机体组织细胞并具有管家功能的蛋白质。根据分子量的差异,HSP可分为10个家族,包括HSP110/grp170、gp96/grp94、HSP90、HSP70/grp78、HSP65、HSP25/27等,每个家族有1~5个成员[1]。在正常生理状态下,

热休克蛋白-肽复合物肿瘤疫苗

近年发现,肿瘤组织中的热休克蛋白-肽复合物含有多种肿瘤相关肽,可在体内诱导多个肿瘤特异 CTL克隆,特异杀伤肿瘤细胞,这种作用在同种间不受MHC Ⅰ类抗原限制,具有良好的临床应用前景。本文综述了这一领域的研究现状。

热休克蛋白-多肽复合物诱导肿瘤特异性免疫的机理

近年研究发现，肿瘤组织的热休克蛋白－多肽复合物具有肿瘤疫苗的免疫作用，可诱导动物产生特异性的抗肿瘤免疫应答。在诱导免疫应答中，巨噬细胞和Ｂ细胞作为抗原提呈细胞而发挥作用。

热休克蛋白70-多肽复合物在肿瘤免疫领域的研究进展

热休克蛋白(Heat Shock Proteins，HSPs)是一组广泛存在于细胞内的可溶性蛋白，在应激(如热休克、高温、感染、缺氧、氧化应激、异常代谢物积聚等)条件下高效表达。主要参与胞内新生肽的结合、折叠、装配、降解与跨膜转运，在维持细胞的正常结构和功能方面起着重要作用。根据其分子量的大小分为4个家族，即HSP90(83～90kD)家族、HSP70(66～78kD)家族、HSP60家族及小HSP家族。此外还有分子量为100～110kD而特性不同于上述家族的大分子HSP。

热休克蛋白-抗原肽复合物疫苗预防肝癌术后复发32例

目的:探讨热休克蛋白-抗原肽复合物(HSP)疫苗预防肝癌术后复发的效果.方法:回顾性分析32例应用HSP疫苗的原发性肝癌患者,并检测治疗前后T细胞亚群、NK细胞活性和血清IL-2受体水平的变化,计算3 a内的生存率,并与对照组比较.结果:治疗组术后3 mo CD3+,CD8+,CD4+/CD8+水平与术前和对照组比较有显著性差异(P<0.05),NK细胞活性较治疗前明显升高(P<0.01);治疗组3a生存率为68.8%,与对照组37.5%比较明显升高(P<0.05).结论:肝癌术后应用HSP疫苗能明显提高患者免疫功能,且可预防术后复发、提高远期生存率.

5-FC/CD自杀基因疗法结合热休克蛋白-多肽复合物瘤苗治疗小鼠黑色素瘤的研究

目的 研究 5 -氟尿嘧啶 /胞嘧啶脱氨酶 (5 FC/ CD)基因疗法与热休克蛋白 -多肽复合物 (HSP- PC)瘤苗免疫疗法联合抗肿瘤效果。方法 将携带 CD基因的重组腺病毒注射到小鼠黑色素瘤体内 ,腹腔注射 5 - FC,同时皮下接种 HSP70 - PC。结果 经联合治疗后 ,70 %荷瘤小鼠肿瘤体积缩小、消退 ,小鼠存活期延长 ,肿瘤组织明显坏死 ,炎症细胞、CD+4 及 CD+8T细胞浸润明显。结论5 - FC/ CD基因疗法结合 HSP- PC瘤苗免疫疗法抗小鼠黑色素瘤作用显著 ,具有临床应用前景。

人肺腺癌GLC-82细胞热休克蛋白70多肽复合物的提取及对细胞毒性T淋巴细胞作用的实验研究

摘 要:目的 探讨GLC -82细胞中HAC 70的提纯方法及其诱导的CTL表型变化和CTL及其上清液抗瘤效应。方法 GLC- 82 细胞热休克诱导 HSP 表达,离子交换层析提纯 HAC 70, SDS -PAGE 和ELISA法进行定量和定性检测,活化PBMC,T淋巴细胞亚群试剂盒测定 HAC- 70 诱导 CTL细胞表型变化情况,MTT法测定CTL及上清液杀瘤活性。结果 热休克处理能使 GLC- 82 细胞 HAC- 70 表达增加,离子交换层析可提纯 GLC-82 细胞中 HAC- 70。经热休克处理的 HAC -70 诱导 T淋巴细胞,其CD3+、CD^(4+)、CD^(8+)细胞与对照组的CTL细胞阳性率明显提高,其诱导的 CTL杀瘤活性显著提高,且其CTL培养上清液肿瘤杀伤活性最高。结论 离子交换层析可提纯 GLC -82 的 HAC -70;HAC- 70 可使CTL细胞CD^(4+)/CD^(8+)倒置,活化的CTL及上清液有较高的杀瘤活性,为肺癌肿瘤疫苗的制备和临床应用提供了实验依据。

黑色素瘤B16细胞热休克蛋白-抗原肽复合物的体内外抑瘤效应

目的：黑色素瘤Ｂ１６细胞胞浆ＨＳＰ－抗原肽复合物（ＨＡＣ）的制备、免疫原性的诱导及其抑瘤作用的研究。方法：采用Ｔｒｉｓ－ＨＣＩ提取和Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００凝胶过滤制备Ｂ１６细胞ＨＡＣ，通过Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠体内诱导特异性ＣＴＬ，再经体内、体外实验检测其抑癌作用。结果：凝胶过滤获得的含６０～９７ｋＤ蛋白的４１，４７和５３管的ＨＡＣ可以降低肿瘤发生率、延长肿瘤出现时间及降低小鼠死亡率。结论：Ｂ１６细胞胞浆中的６０～９７ｋＤ的ＨＡＣ具有免疫原性及抑瘤作用，为制备肿瘤疫苗提供了实验依据。

小鼠肺腺癌热休克蛋白70-抗原肽复合物的纯化

目的 探索肿瘤热休克蛋白 70抗原肽复合物 (HCA70 )分离、纯化的方法。方法 采用低渗、反复冻融匀浆、ADP -Agarose亲和层析结合DEAE离子交换层析 ,从体外培养的小鼠肺腺癌细胞 (LA - 795)中纯化HAC70 ;通过SDS -PAGE电泳、Westernblot检测、小鼠移植瘤动物实验证实所获得蛋白是否为HAC70。结果 获得蛋白分子量为 70kD左右 ,与抗HSP70特异单抗结合 ,用此蛋白主动免疫的小鼠可抵抗LA795细胞的攻击 ,获得了高纯度的HAC70。结论 采用ADP -Agarose亲和层析结合DEAE离子交换层析可获得高纯度的HAC70。

食管癌细胞中热休克蛋白70-多肽复合物的分离

目的分离纯化癌细胞中热休克蛋白70(HSP70)-多肽复合物。方法以食管癌组织为材料,通过一系列的层析柱(ConA-Sepharose、ADP-Agarose、MonoQ及HSP70抗体亲和层析柱)进行分离及纯化。结果所分离纯化的HSP70-多肽复合物相对分子质量与预期相符。结论为提取肿瘤HSP70-多肽复合物提供了具体方法,并为研制多肽疫苗奠定了基础。

热休克蛋白─肽复合物肿瘤疫苗

近年发现，肿瘤组织中的热休克蛋白─肽复合物含有多种肿瘤相关肽，可在体内诱导多个肿瘤特异CTL克隆，特异杀伤肿瘤细胞；这种作用在同种间不受MHCⅠ类抗原限制，具有良好的临床应用前景。本文综述了这一领域的研究现状。

热休克蛋白-抗原肽复合物疫苗对肝癌术后患者细胞免疫功能的影响

目的:探讨热休克蛋白(HSP)-抗原肽复合物疫苗对肝癌术后患者细胞免疫功能的影响方法:回顾性分析57例应用HSP疫苗的原发性肝癌患者,并检测治疗前后T细胞亚群、NK细胞活性和血清白介素(IL)-2受体水平的变化,并与对照组比较.结果:治疗组术后3moCD3+、CD8+、CD4+/CD8+水平分别为62.8±12.4,46.5±11.2,0.61±0.17与术前和对照组比较有显著性差异(P<0.05),NK细胞活性治疗后升高41.3±7.1,较治疗前明显升高(P<0.01).血清IL-2受体水平治疗后略升高7.8±1.0μg/L,与治疗前对比无显著性差异.结论:肝癌术后应用热休克蛋白-抗原肽复合物疫苗能明显提高患者免疫功能.

非液相等电聚焦蛋白质分离技术获取人热休克蛋白-多肽复合物

目的:利用非液相等电聚焦蛋白质分离技术(FS-IEF)从肝细胞癌(HCC)患者的癌组织的裂解液内提纯热休克蛋白多肽复合物(HSP-PCs)。制备热休克蛋白(HSP)肿瘤疫苗。方法:制备HCC细胞蛋白,经等电聚焦蛋白质分离获得目的蛋白,SDS-PAGE电泳和Western-Blot鉴定为热休克蛋白多肽复合物。利用紫外吸收法测定其浓度。结果:利用FS-IEF从HCC肿瘤细胞裂解液中成功分离提纯出HSP-PCs,分离的富含分子伴侣的细胞裂解物(CRCL)经鉴定为CRT、HSgpP96、HSP90和HSP70。这些分子伴侣蛋白沿pH梯度集中分布于4～7号收集管中,pH跨度为4.4～5.2。1g肝癌组织经液相等电聚焦分离后可产生1000μg的热休克蛋白疫苗。结论:通过非液相等电聚焦蛋白质分离技术可获得纯化的所需量的HSP-PCs。