超声检查联合血清糖原合成酶激酶-3β和热休克蛋白27对慢性肺源性心脏病的诊断价值

目的 探讨超声检查联合血清糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和热休克蛋白27(HSP27对慢性肺源性心脏病(CPHD)的诊断价值。方法 将100例CPHD患者设为观察组,100名健康体检者设为对照组。比较两组受试者一般资料、实验室检查结果、超声检查结果、GSK-3β及HSP27水平。采用Pearson相关性分析法探讨超声检查指标与血清HSP27、GSK-3βmRNA水平的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析超声检查和各项血清指标对CPHD的诊断效能。结果 观察组受试者肺动脉压高于对照组,主肺动脉内径、右室内径及右房内径均长于对照组(P<0.01)。观察组受试者血清HSP27水平高于对照组,血清GSK-3β mRNA水平低于对照组(P<0.01)。血清HSP27水平与肺动脉压、主肺动脉内径、右房内径和右室内径均呈正相关(P<0.05或0.01)。血清GSK-3β mRNA水平与肺动脉压、主肺动脉内径、右房内径和右室内径均呈负相关(P<0.05或0.01)。超声参数、血清GSK-3β、HSP27诊断CPHD的曲线下面积(AUC)分别为0.880、0.834和0.868,联合诊断的AUC为0.923,高于单独诊断。结论 超声参数、血清GSK-3β和HSP27对CPHD均具有较高的诊断价值,联合检测的诊断效果更高。

结核分枝杆菌小分子热休克蛋白16．3蛋白的原核表达及功能检测

目的进行结核分枝杆菌小分子热休克蛋白MTB Hsp16.3原核表达载体的构建、表达、纯化并初步观察其生物学效应。方法提取临床H37Rv分离株基因组DNA,PCR扩增Hsp16.3基因,将其重组到原核表达载体Pet28a中,构建原核表达载体Pet28a-Hsp16.3,进行双酶切及测序鉴定。将测序正确的重组质粒转化至E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达后,对表达产物进行SDS-PAGE检测,同时通过镍柱纯化试剂盒纯化Hsp16.3,测定纯化后蛋白浓度,并进行Western blot法检测。将不同浓度纯化后蛋白作用小鼠腹腔巨噬细胞,实时定量PCR(qRT-PCR)检测巨噬细胞IL-10和IFN-γ的表达,同时设定空白对照组及阳性对照组。结果成功构建重组质粒Pet28a-Hsp16.3,并在E.coli BL21(DE3)中获得成功表达,通过镍柱纯化系统得到纯化Hsp16.3融合蛋白。qRT-PCR检测结果显示,不同浓度纯化后Hsp16.3蛋白作用小鼠腹腔巨噬细胞,可促进IFN-γ的产生而抑制IL-10的产生。结论成功克隆、表达和纯化了MTB Hsp16.3蛋白,Hsp16.3能促进小鼠腹腔巨噬细胞产生IFN-γ,抑制IL-10的产生。

血清组蛋白去乙酰化酶3和热休克蛋白90水平与急性心肌梗死患者心室重构的相关性及预后评估价值

目的探讨组蛋白去乙酰化酶3(HDAC3)、热休克蛋白90(HSP90)对急性心肌梗死(AMI)患者心室重构及预后的评估价值。方法选取2021年1月至2022年6月北京市昌平区中西医结合医院收治的128例AMI患者为研究组,记录患者经皮冠状动脉介入(PCI)术后6个月内发生的不良心血管事件,根据结果将患者分为预后不良组(n=33),预后良好组(n=95)。同期选择年龄、性别相仿的110例健康体检志愿者为对照组。采用酶联免疫法(ELISA)检测血清中HDAC3、HSP90的表达水平,超声心动图检测心室重构参数。Pearson法分析AMI患者血清中HDAC3、HSP90与心室重构指标的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析HDAC3、HSP90水平对AMI患者预后不良的评估价值。结果与对照组相比,研究组患者血清中HDAC3、HSP90水平均升高,差异有统计学意义(P<0.05);研究组患者左心室舒张末期内径(LVEDD)、左心房内径(LAD)、左心室后壁厚度(LVPWT)、左心室后壁舒张末期厚度(PWD)、左心室后壁收缩末期厚度(PWS)、左心室心肌质量指数(LVMI)均大于对照组(P均<0.05),左心室射血分数(LVEF)低于对照组(P<0.05);血清HDAC3、HSP90水平与LVEDD、LAD、LVPWT、PWD、PWS、LVMI呈正相关(P均<0.05),与LVEF呈负相关(P<0.05);ROC曲线结果显示,血清HDAC3、HSP90水平预测AMI患者预后不良的曲线下面积(AUC)分别为0.858、0.864,二者联合预测的AUC为0.947,高于单一指标检测。结论HDAC3、HSP90在AMI患者血清中均呈高水平,早期检测二者可作为评估AMI患者心室重构及预后不良的血清标志物。

山仙颗粒含药血清对S180细胞caspase-3及热休克蛋白70表达的影响

目的观察大鼠山仙颗粒含药血清对S180细胞caspase-3及热休克蛋白70表达的影响,探讨其抗肿瘤的相关分子机制。方法将不同浓度的山仙颗粒大鼠含药血清及正常大鼠血清分别置入S180细胞悬液中,设对照组、空白血清小剂量组、空白血清大剂量组、含药血清小剂量组和含药血清大剂量组,分别于培养24 h、48 h、72 h后收集细胞,制成细胞涂片,采用免疫细胞化学法及免疫荧光法检测S180细胞caspase-3及HSP70的表达情况。结果在培养24 h、48 h、72 h各个时间段,含药血清组的HSP70表达水平均低于空白血清组(P<0.05),caspase-3表达水平均高于空白血清组(P<0.05);大剂量组的HSP70表达水平均比小剂量组的低(P<0.05),大剂量组的caspase-3表达水平均比小剂量组的高(P<0.05),且呈时效依赖关系。结论大鼠山仙颗粒含药血清能使体外培养的S180细胞HSP70的表达显著降低、caspase-3的表达升高,并呈时效和量效依赖关系。

拉莫三嗪对癫痫大鼠海马组织中Caspase-3和热休克蛋白70表达的影响

目的探讨不同剂量拉莫三嗪对戊四氮所致癫痫大鼠的行为学、海马组织形态学及Caspase-3和热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法选取清洁级健康6周龄雄性Sprague-Dawley大鼠100只,随机分为正常对照组、模型组和拉莫三嗪低、中、高剂量组,每组20只。正常对照组大鼠腹腔注射生理盐水(3.5 m L·kg-1),其余各组大鼠均腹腔注射戊四氮(35 mg·kg-1)并观察其行为学变化。以连续出现3次Ⅳ级及其以上发作作为点燃标准。全部点燃后,模型组和拉莫三嗪低、中、高剂量组大鼠给予戊四氮35 mg·kg-1每日1次腹腔注射维持点燃,拉莫三嗪低、中、高剂量大鼠组分别给予拉莫三嗪20、30、60 mg·kg-1·d-1灌胃,连续2周。在末次灌胃24 h内,对各组大鼠进行心脏灌注固定取海马组织,采用免疫组织化学法检测海马CA3区Caspase-3和HSP70蛋白表达。结果除正常对照组外,其余各组大鼠均有痫性发作。正常对照组大鼠海马结构完整,其他组大鼠海马神经元体积缩小,与周围组织有脱离,细胞核深染,有核分裂及核溶解,具有凋亡特征,多数细胞质呈空泡状,海马区神经元细胞排列散乱,无层次感,尼氏体减少,部分神经元丢失,细胞密度小。与正常对照组比较,模型组大鼠海马CA3区Caspase-3和HSP70阳性细胞数增多(P<0.01);拉莫三嗪低、中、高剂量组大鼠海马CA3区Caspase-3阳性细胞数均少于模型组,HSP70阳性细胞数均多于模型组(P<0.05);拉莫三嗪低、中、高剂量组大鼠海马CA3区Caspase-3阳性细胞数随着剂量的增加而减少,HSP70阳性细胞数随着剂量的增加而增加,拉莫三嗪低、中、高剂量组大鼠海马CA3区Caspase-3、HSP70阳性细胞数两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与正常对照组比较,模型组大鼠海马CA3区Caspase-3及HSP70蛋白表达均增加(P<0.05)。拉莫三嗪低、中、高剂量组Caspase-3蛋白表达低于模型组(P<0.05),HSP70蛋白表达高于模型组(P<0.05)。拉莫三嗪低、中、高剂量组大鼠海马CA3区Caspase-3蛋白表达随着剂量的增加而降低,HSP70蛋白表达随着剂量的增加而增加,拉莫三嗪低、中、高剂量组大鼠海马CA3区Caspase-3、HSP70蛋白表达两两比较差异均有统计学意义(P<0.05)。结论拉莫三嗪对戊四氮所致癫痫大鼠的癫痫发作有保护作用,可以减轻大鼠癫痫发作的严重程度,其机制可能是通过降低海马组织中Caspase-3表达、增加HSP70表达来抑制癫痫过程中的神经元凋亡。

热休克蛋白参与PI3K/Akt介导H_2O_2预处理的抗凋亡作用

目的:探讨热休克蛋白(HSP)是否参与PI3K/Akt信号通路介导的H2O2预处理的抗细胞凋亡作用。方法:利用PC12细胞建立H2O2预处理对抗高浓度H2O2诱导细胞凋亡的实验模型,分组如下:(1)空白对照组;(2)损伤组;(3)预处理+损伤组;(4)LY294002+预处理+损伤组;(5)LY294002组;(6)quercetin+预处理+损伤组;(7)17-AAG+预处理+损伤组;(8)溶剂对照组。应用Hoechst 33258染色观察细胞凋亡形态,碘化丙啶(PI)染色流式细胞术检测细胞凋亡率,比色法测定caspase-3的活性,免疫印迹法(Western blotting)测定HSP的表达水平。结果:100μmol/L H2O2预处理PC12细胞90 min可显著地抑制300μmol/L H2O2引起的细胞凋亡,使caspase-3的活性降低,同时上调HSP70和HSP90的表达。HSP70和HSP90的抑制剂quercetin和17-AAG拮抗H2O2预处理的抗细胞凋亡作用。PI3K抑制剂LY294002不仅拮抗了H2O2预处理抗细胞凋亡的作用,并且抑制H2O2预处理对HSP70和HSP90的表达上调。结论:PI3K/Akt通路、HSP70和HSP90均参与H2O2预处理诱导的细胞保护作用。并且HSP70和HSP90参与PI3K/Akt信号通路介导H2O2预处理的抗细胞凋亡作用。

热休克蛋白70在心理应激诱发的C3H/HeJ雌鼠乳腺癌中的表达

目的探讨热休克蛋白 70 (Heatshockprotein70 ,Hsp70 )在心理应激诱发的乳腺癌中的表达、作用及可能的机制。方法动物随机分为实验组 ( 2 1只 )和对照组 ( 14只 ) ,对实验组小鼠给予饮水冲突和限制应激 ,以建立心理应激的动物模型 ,然后比较实验组和对照组的乳腺癌发病率、皮质酮水平和Hsp70的表达水平。 结果 ( 1)实验组的乳腺癌发病率 ( 71.4% )明显高于对照组的发病率 ( 2 1.4% ) (P <0 .0 5 ) ;( 2 )实验组血浆皮质酮水平 ( 161.5 1± 162 .82 ) μg/ml明显高于对照组 ( 10 .63± 8.3 7) μg/ml( P <0 .0 1) ;( 3 )实验组Hsp70的阳性细胞数目 ( 12 .47± 11.63 )显著高于对照组 ( 3 .16± 1.77) ( P <0 .0 1)。结论心理应激促进了Hsp70在C3H/HeJ雌鼠乳腺组织中的表达 ,Hsp70的过度表达和乳腺癌的发生密切相关。

黑色素瘤B16细胞热休克蛋白-抗原肽复合物的体内外抑瘤效应

目的：黑色素瘤Ｂ１６细胞胞浆ＨＳＰ－抗原肽复合物（ＨＡＣ）的制备、免疫原性的诱导及其抑瘤作用的研究。方法：采用Ｔｒｉｓ－ＨＣＩ提取和Ｓｅｐｈａｃｒｙｌ Ｓ－２００凝胶过滤制备Ｂ１６细胞ＨＡＣ，通过Ｃ５７ＢＬ／６Ｊ小鼠体内诱导特异性ＣＴＬ，再经体内、体外实验检测其抑癌作用。结果：凝胶过滤获得的含６０～９７ｋＤ蛋白的４１，４７和５３管的ＨＡＣ可以降低肿瘤发生率、延长肿瘤出现时间及降低小鼠死亡率。结论：Ｂ１６细胞胞浆中的６０～９７ｋＤ的ＨＡＣ具有免疫原性及抑瘤作用，为制备肿瘤疫苗提供了实验依据。

热休克蛋白70在3T3细胞创伤愈合中的作用

目的 :探讨热休克蛋白 70 (HSP70 )在细胞创伤后增殖中的作用。方法 :采用细胞机械创伤模型 ,检测创伤后 48h时热处理细胞及非热处理细胞的增殖活性 ,并用免疫细胞化学的方法检测两组细胞生长过程中HSP70的表达。结果 :非热处理组细胞在增殖期表达 HSP70。热处理可诱导 HSP70的表达 ,热处理组创伤后细胞的增殖活性明显高于非热处理组。结论 :HSP70参与细胞增殖过程 ,热处理引起的细胞增殖活性升高可能与 HSP70的功能有关。

肝细胞癌中磷脂酰肌醇蛋白聚糖3、热休克蛋白和谷氨酰胺合成酶的表达及其临床意义

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)、热休克蛋白70(HSP70)和谷氨酰胺合成酶(GS)在肝细胞癌中的表达及临床意义。方法运用组织芯片技术,通过免疫组织化学Envision法检测182例肝细胞癌和92例癌旁肝组织中GPC3、HSP70和GS的表达情况,并结合临床病理因素进行分析。结果 GPC3、HSP70和GS在肝细胞癌中表达均明显高于癌旁肝组织(P<0.05),GPC3表达与肝细胞癌分化程度、脉管内瘤栓、TNM分期与转移显著相关(P<0.05);HSP70和GS表达与肝细胞癌TNM分期、转移和术后复发显著相关(P<0.05)。结论 GPC3、HSP70和GS在肝细胞癌的发生、发展中起着不同程度的作用。联合检测GPC3、HSP70和GS可能有助于判断肝细胞癌的恶性程度、转移潜能及预后分析。

甲胎蛋白异质体3、高尔基体蛋白73及热休克蛋白27在原发性肝癌中的诊断价值

目的探讨甲胎蛋白异质体3(AFP-L3)、高尔基体蛋白73(GP73)、热休克蛋白27(HSP27)在原发性肝癌患者中的诊断价值。方法收集98例患者血清,其中原发性肝癌36例,肝转移癌14例,胃癌20例,健康对照28例,采用电化学发光法检测AFP,采用酶联免疫吸附试剂盒检测各组血清中AFP-L3、HSP27、GP73的表达情况。结果 AFP、AFP-L3、GP73、HSP27在原发性肝癌组的表达情况明显高于肝转移癌组、胃癌组及健康对照组,明显差异有统计学意义(P<0.01)。通过受试者工作特征曲线(ROC)评价作图,AFP、AFP-L3、GP73及HSP27曲线下面积分别为:0.969、0.977、0.978、0.985。AFP-L3、GP73及HSP27与AFP的相关性为0.896、0.853、0.838(P<0.05);AFP、AFP-L3、GP73及HSP27与乙肝表面抗原的相关性为0.076、0.119、0.176、0.176(P>0.05)。结论 AFP-L3、HSP27、GP73均可以作为原发性肝癌的肿瘤标记物,与AFP相比,具有更高的诊断价值,它们与表面抗原的表达情况无关。

细辛脑注射液对槐定碱致痫大鼠Caspase3及热休克蛋白-70表达的影响

目的通过对槐定碱致痫大鼠脑内Caspase3及热休克蛋白-70(hsp-70)含量的测定,探讨细辛脑注射液抗癫痫作用的机制。方法随机将42只大鼠分为6组,空白组、模型组、卡马西平阳性对照组及细辛脑低剂量组、中剂量组和高剂量组。通过免疫组化学法和Nissle染色法,研究细辛脑注射液对Caspase3和hsp-70含量的影响。结果研究表明与模型组比较,细辛脑注射液中、高剂量组可显著减轻大鼠癫痫发作(P<0.05),可使槐定碱致痫大鼠的脑组织中减少Caspase3释放,降低hsp-70在大鼠脑内的表达。结论细辛脑注射液具有良好的抗癫痫效果,可减轻大鼠癫痫发作时对脑组织的损伤。

热休克蛋白gp96表达对B16F10细胞生长的影响

目的 探讨热休克蛋白gp96表达对B16F10细胞株生物学行为的影响。 方法 构建gp96正义和反义真核重组表达质粒 pcDNA hgp96和 pcDNA anti96P ,并转染B16F10细胞 ,G 418筛选稳定转染的阳性细胞克隆 ,然后Western印迹分析细胞gp96的表达情况 ,绘制细胞生长曲线 ,观察 gp96表达对细胞生长特性的影响。 结果 转染了 gp96正义表达质粒的B16F10细胞gp96表达水平升高 ,细胞生长缓慢 ,倍增时间延迟 ;反义gp96表达质粒明显抑制了B16F10细胞 gp96表达 ,使细胞倍增时间提前。结论 热休克蛋白 gp96表达水平升高可抑制肿瘤细胞的生长 ,而 gp96表达水平下降则肿瘤细胞生长速度加快 。

Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的树突状细胞瘤苗对肝细胞癌瘤内CD25^+Foxp3^+Treg细胞的影响

目的:观察注射Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的骨髓来源树突状细胞(bone marrowderived dendritic cells,BMDCs)瘤苗对小鼠肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)瘤内CD25+叉头盒转录因子P3(forkhead box p3,Foxp3)+调节T淋巴细胞(regulatory T cells,Tregs)浸润的影响.方法:在粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony stimulatingfactor,GM-CSF)和白介素-4(interleukin-4,IL-4)诱导下体外扩增BMDCs,使用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白体外致敏BMDCs制备瘤苗,荧光免疫化学染色和FACS检测致敏前后BMDCs CD11c、CCR7、CD80和CD86的表达变化.使用Hepal-6细胞皮下注射的方法制备小鼠(C57BL/6J)HCC模型,成瘤小鼠分组注射Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs瘤苗(足垫部和瘤内,每7 d注射1次,共2次),并另设对照(空白对照组、BMDCs组和Hepal-6细胞裂解蛋白组).在治疗结束后9 d获取组织标本,免疫荧光组织化学染色和FACS检测瘤苗注射后肿瘤内CD8+T细胞和CD25+Foxp3+Tregs细胞的浸润情况.结果:光镜和扫描电镜显示:GM-CSF和IL-4在体外诱导扩增的BMDCs具有树突状细胞特征性的形态特征,且免疫细胞化学染色显示:该细胞表达CD11c,CCR7,CD80和CD86.使用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs组,与对照组(BMDCs组和Hepal-6细胞裂解蛋白组)相比该组细胞CD11c(67.2±4.49 vs 52.4±5.20,58.4±4.43,P<0.01),CCR7(65.4±5.34 vs 45.9±5.04,57.0±3.46,P<0.01),CD80(62.9±4.69 vs 46.9±4.75,54.4±3.47,P<0.01)和CD86(73.3±3.58 vs 60.1±2.98,63.7±3.10,P<0.01)的表达均明显增高.使用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs瘤苗为HCC荷瘤小鼠进行注射治疗,治疗后的检测结果显示:该组小鼠瘤内CD8+T细胞的浸润明显高于对照组(空白对照组、BMDCs组和Hepal-6细胞裂解蛋白组)(55.0±4.11 vs 38.2±3.34,44.6±4.29,45.6±4.92,P<0.01),而同时瘤内CD25+Foxp3+Tregs细胞的浸润则明显低于相应对照组(0.37±0.028 vs 1.31±0.020,0.77±0.057,0.57±0.062,P<0.05).结论:使用Hepal-6细胞热休克后裂解蛋白致敏的BMDCs瘤苗进行治疗,可增强HCC小鼠瘤内CD8+T细胞的浸润,并同时减少CD25+Foxp3+Tregs细胞的浸润,该瘤苗具有抗肿瘤免疫效果.

热休克蛋白-27与磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3在原发性肝癌中的表达及意义

目的通过检测热休克蛋白-27(HSP-27)、磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC-3)在原发性肝癌(PHC)中的表达,探讨二者在诊断PHC的作用及其临床病理特征的关系。方法采用免疫组织化学染色法检测32例PHC组织、30例肝硬化组织、25例肝脏良性占位组织及31例肝炎组织中GPC-3、HSP-27的水平,并分析其与PHC的临床因素之间的关系。结果 HSP-27和GPC-3均在肝癌组织中高表达,与肝硬化、肝脏良性占位、肝炎组织中的表达水平比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HSP-27在肝癌组织的表达与肿瘤的病理分级及TNM分期有关,但GPC-3的表达与肿瘤的病理分级及TNM分期无关。结论 HSP-27、GPC-3在肝癌组织中高表达,与肝癌的发生、发展、转移有关,可能成为新的肿瘤标志物。

磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3及热休克蛋白70在肝细胞结节性病变中的表达及意义

目的探讨磷脂酰肌醇蛋白聚糖-3(GPC3)、热休克蛋白70(HSP70)在局灶性结节性增生、肝细胞腺瘤、异型增生结节和高分化肝细胞癌组织中的表达及意义。方法用免疫组化检测局灶性结节性增生21例、肝细胞腺瘤10例、低级别异型增生结节13例、高级别异型增生结节34例及高分化肝细胞癌32例患者病灶组织中GPC3、HSP70的表达。结果 GPC3在局灶性结节性增生、肝细胞腺瘤、低级别异型增生结节、高级别异型增生结节、高分化肝细胞癌组织中的阳性率分别为0、0、7.69%(1/13)、14.71%(5/34)、59.38%(19/32)。HSP70在局灶性结节性增生、肝细胞腺瘤、低级别异型增生结节、高级别异型增生结节、高分化肝细胞癌组织中的阳性率分别为9.52%(2/21)、0、0、20.59%(7/34)、62.5%(20/32)。高分化肝细胞癌组织的GPC3、HSP70阳性率均高于其他组织(P<0.05),局灶性结节性增生、肝细胞腺瘤、低级别异型增生结节、高级别异型增生结节间GPC3、HSP70阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 GPC3、HSP70对鉴别良恶性肝细胞结节性病变有重要意义,但对非癌性结节性病变间的鉴别无意义。

热休克蛋白90α激活PI3K/Akt通路介导乳腺癌他莫昔芬耐药的机制研究

目的:探讨乳腺癌他莫昔芬(TAM)耐药的潜在机制。方法:筛选乳腺癌细胞HCC1937和MCF7的抗性细胞系(HCC1937/TR和MCF7/TR细胞)。TAM处理后,通过高通量测序和siRNA筛选鉴定乳腺癌细胞TAM耐药的关键分子。结果:高通量测序发现TAM可影响多个基因的表达水平。当敲低HSP90α时,HCC1937/FR细胞凋亡水平升高(P<0.05)。过表达HSP90α后,HCC1937/TR和MCF7/TR细胞凋亡水平显著降低(P<0.05)。敲低HSP90α后,MCF7/TR细胞凋亡水平显著升高(P<0.05)。在HCC1937和MCF7细胞中过表达HSP90α后用TAM处理,HCC1937和MCF7显示出对TAM抑制增殖的抵抗(P<0.05)。敲低HSP90α后,PI3K/Akt通路受到抑制。过表达HSP90α后,PI3K/Akt通路激活。PI3K/Akt通路抑制剂Pectolinarin或Miltefosine处理后再以TAM处理,HCC1937/TR和MCF7/TR细胞凋亡水平显著升高(P<0.05)。TAM处理后,MCF7/TR和HCC1937/TR细胞中miR-5003-3p表达水平降低(P<0.05)。在HCC1937/TR和MCF7/TR细胞中,过表达miR-5003-3p后HSP90α表达水平降低(P<0.05);敲低miR-5003-3p后,HSP90α表达水平升高(P<0.05)。TAM处理后过表达miR-5003-3p,HCC1937和MCF7细胞凋亡水平升高(P<0.05);TAM处理后敲低miR-5003-3p,HCC1937和MCF7凋亡水平降低(P<0.05)。此外,敲低miR-5003-3p后,PI3K/Akt通路激活。过表达miR-5003-3p后PI3K/Akt通路受到抑制。结论:在受到持续化疗药物TAM处理后,乳腺癌细胞HCC1937和MCF7中靶向HSP90αmRNA的miR-5003-3p表达水平降低,HSP90α表达水平升高可激活PI3K/Akt通路,最终引起乳腺癌细胞对TAM耐药。

雷公藤多苷通过PI3K/Akt通路对糖尿病肾病大鼠热休克蛋白90及PGC-1α表达的影响

目的探究雷公藤多甙(TG)通过PI3K/Akt通路对糖尿病肾病(DN)大鼠热休克蛋白90(HPS90)及过氧化物酶体增殖物激活受体-γ共激活因子-1α(PGC-1α)水平的影响。方法通过腹腔注射链脲佐菌素复制DN大鼠模型,并将其随机分为DN组、DN+TG组和DN+TG+SC79组(每组15只),另取15只健康大鼠作为对照组。TG灌胃剂量为20 mg/kg。大鼠腹膜内注射SC79(0.04 mg/g)以激活PI3K/Akt通路。通过HE染色验证模型复制结果和TG对肾组织的保护作用。生化检测大鼠24 h尿蛋白和肌酐,酶联免疫吸附试验检测炎症因子水平,HE染色观察各组大鼠肾损伤情况,Masson染色观察各组大鼠肾纤维化情况,qRT-PCR和Western blotting分别检测HPS90和PGC-1αmRNA和蛋白相对表达量。结果DN组24 h尿蛋白、肌酐、肾组织纤维化面积百分比、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、HSP90 mRNA和蛋白相对表达量、IL-1β及IL-6高于对照组(P<0.05),PGC-1αmRNA和蛋白相对表达量低于对照组(P<0.05);DN+TG组24 h尿蛋白、肌酐、肾组织纤维化面积百分比、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、HSP90 mRNA和蛋白相对表达量、IL-1β及IL-6低于DN组(P<0.05),PGC-1αmRNA和蛋白相对表达量高于DN组(P<0.05)。DN+TG+SC79组24 h尿蛋白、肌酐、肾组织纤维化面积百分比、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt、HSP90 mRNA和蛋白相对表达量、IL-1β及IL-6高于DN+TG组(P<0.05),PGC-1αmRNA和蛋白相对表达量低于DN+TG组(P<0.05)。结论TG可以通过抑制PI3K/Akt通路抑制HSP90的转录和翻译,从而促进PGC-1α的表达,并发挥抗炎和抗纤维化作用,从而缓解DN。