刚地弓形虫热休克蛋白21体外条件下对小鼠巨噬细胞功能的影响

[目的]本试验旨在探究刚地弓形虫热休克蛋白21(TgHSP21)在体外对小鼠巨噬细胞系(Ana-1)功能的调节作用。[方法]构建重组表达载体pET-32a/TgHSP 21,获得重组蛋白TgHSP21(rTgHSP21)。用免疫荧光抗体试验(IFA)验证rTgHSP21在体外与Ana-1细胞的结合情况。Ana-1细胞分别用不同质量浓度(5、10、20、40、80μg·mL^-1)的rTgHSP21处理后,采取细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖情况,应用Transwell细胞小室检测细胞趋化情况,应用流式细胞术检测Ana-1细胞凋亡和吞噬能力。分别用总一氧化氮(NO)试剂盒和细胞因子ELISA试剂盒检测Ana-1细胞的NO和肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素12(IL-12)、IL-6、IL-1β的分泌量。[结果]成功获得纯化的rTgHSP21,其具有与Ana-1细胞结合的能力。5和10μg·mL^-1的rTgHSP21均显著促进Ana-1细胞的增殖,各个浓度的rTgHSP21均显著促进细胞凋亡和吞噬能力。80μg·mL^-1 rTgHSP21明显促进Ana-1细胞分泌NO。在不同浓度rTgHSP21作用下,细胞因子IL-6和TNF-α的表达量均明显上升,而其质量浓度为10、20、40和80μg·mL^-1时IL-12的分泌被抑制。此外,rTgHSP21显著抑制了Ana-1细胞的迁移能力。[结论]TgHSP21能够与Ana-1细胞结合并在体外条件下调节Ana-1细胞的增殖、吞噬、凋亡、迁移及分泌。