妊娠期糖尿病患者血清分泌性卷曲相关蛋白-5、热休克蛋白60、溶质载体家族16成员11的表达及其与胰岛素抵抗的关系

目的探讨分泌性卷曲相关蛋白-5(sFRP5)、热休克蛋白60(HSP60)、溶质载体家族16成员11(SLC16A11)在妊娠期糖尿病(GDM)患者血清中的表达及其与胰岛素抵抗的关系。方法选取2022年1月—2023年12月在本院就诊的120例GDM患者为研究组,另选取同期120例健康孕妇为对照组。检测血清sFRP5、HSP60、SLC16A11表达水平;检测并计算胰岛素抵抗相关指标[空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)]的水平;采用Pearson法分析血清sFRP5、HSP60、SLC16A11与胰岛素抵抗的相关性;采用Logistic回归分析法与受试者工作特征(ROC)曲线分析血清sFRP5、HSP60、SLC16A11与GDM的相关性。结果研究组血清sFRP5表达低于对照组,血清HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关性分析显示,血清sFRP5与HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR呈负相关(P<0.05);血清HSP60与SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05);血清SLC16A11与FBG、FINS、HOMA-IR呈正相关(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,HSP60、SLC16A11、FBG、FINS、HOMA-IR是妊娠期患者发生GDM的影响因素,sFRP5是保护因素(P<0.05)。血清sFRP5、HSP60、SLC16A11联合诊断妊娠期患者发生GDM的曲线下面积(AUC)为0.924,3项指标联合诊断价值优于各指标单独诊断(P均<0.05)。结论GDM患者血清sFRP5水平降低,HSP60、SLC16A11水平升高;3项指标均为妊娠期患者发生GDM的影响因素,且与胰岛素抵抗相关;3项指标联合对GDM具有较高的诊断效能。

热休克蛋白27/60在胃癌中的表达及意义

目的研究热休克蛋白27和60(HSP27/60)在胃癌组织中的表达及与胃癌生物学行为关系。方法采用免疫组化SABC法检测48例胃癌组织中热休克蛋白27和60的蛋白表达。结果胃癌组织中HSP27和HSP60蛋白表达阳性率分别为64.6%、81.3%;HSP27在胃癌中表达与肿瘤有无远处转移、淋巴结转移个数及浸润深度有关;HSP60表达与肿瘤细胞分化程度及Ki-67增殖指数有关;HSP27/60的表达存在相关性。结论 HSP27/60表达与胃癌生物学行为有相关性,在胃癌的发生、发展过程中发挥着重要的作用。

热休克蛋白27,60和90在胃癌中表达及其临床价值

目的:探讨HSP-27、-60和-90在胃癌中的表达及其临床意义。方法:采用免疫组织化学检测66例胃癌组织中HSP-27、-60和-90的表达情况,并结合临床病理特征、肿瘤增殖能力和患者生存期分析三种热休克蛋白表达的临床意义。结果:HSP-27、-60和-90在胃癌组织中异常高表达。HSP-27表达与肿瘤大小(p T,P=0.026)、器官转移(p M,P=0.046)及病理分期(P=0.041)相关,而HSP-27染色强度与淋巴腺状态明显相关(p N,P=0.042)。HSP-60表达与患者性别相关(P=0.011),而HSP-60染色强度与患者年龄(P=0.027)和肿瘤病理组织学分级(P=0.031)相关。HSP-90表达与本研究分析的临床病理参数无相关性;但是,HSP-90染色强度与肿瘤大小存在着显著关系(p T,P=0.020)。单因素分析表明HSP-90高表达与生存期更长显著相关(P=0.033),多因素分析证实HSP-90高表达是胃癌独立预后因素(P=0.026)。结论:HSP-27、-60和-90与某些临床病理参数有关,这些参数对于胃腺癌患者的治疗至关重要。胃腺癌患者HSP-90高表达是独立预后指标。

热休克蛋白27对水泡性口炎病毒体外增殖的调控作用

本研究旨在探究热休克蛋白27(heat shock protein 27, HSP27)对水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus, VSV)体外增殖及VSV感染介导的维甲酸诱导基因I样受体家族(retinoid acid-inducible gene-I-like receptor, RLR)信号通路的作用及机制。利用实时荧光定量PCR、免疫印迹、免疫共沉淀、病毒滴度测定及免疫荧光等方法,首先检测VSV感染对HSP27 mRNA和蛋白表达的影响,进而验证过表达和干扰HSP27对VSV增殖的影响,进一步探究HSP27对VSV感染介导的RLR信号通路的影响,最后分析HSP27与RLR信号通路靶分子的相互作用及共定位情况。结果表明,VSV感染可促使HSP27基因转录和蛋白表达上调,稳定过表达和瞬时过表达HSP27均能显著抑制VSV的体外增殖;干扰宿主细胞中HSP27表达可促进VSV增殖。HSP27能够增强VSV及维甲酸诱导基因I蛋白(retinoic acid-inducible gene I protein, RIG-I)介导的IFN-β的产生及RIG-I的蛋白表达,而且HSP27与RIG-I相互作用并共定位于细胞质中。本研究揭示了HSP27靶向RIG-I上调其表达,增强RLR信号通路的转导,进而负调控VSV体外增殖,为深入揭示宿主因子HSP27在病毒感染中的作用机制奠定基础。

超声检查联合血清糖原合成酶激酶-3β和热休克蛋白27对慢性肺源性心脏病的诊断价值

目的 探讨超声检查联合血清糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)和热休克蛋白27(HSP27对慢性肺源性心脏病(CPHD)的诊断价值。方法 将100例CPHD患者设为观察组,100名健康体检者设为对照组。比较两组受试者一般资料、实验室检查结果、超声检查结果、GSK-3β及HSP27水平。采用Pearson相关性分析法探讨超声检查指标与血清HSP27、GSK-3βmRNA水平的相关性,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析超声检查和各项血清指标对CPHD的诊断效能。结果 观察组受试者肺动脉压高于对照组,主肺动脉内径、右室内径及右房内径均长于对照组(P<0.01)。观察组受试者血清HSP27水平高于对照组,血清GSK-3β mRNA水平低于对照组(P<0.01)。血清HSP27水平与肺动脉压、主肺动脉内径、右房内径和右室内径均呈正相关(P<0.05或0.01)。血清GSK-3β mRNA水平与肺动脉压、主肺动脉内径、右房内径和右室内径均呈负相关(P<0.05或0.01)。超声参数、血清GSK-3β、HSP27诊断CPHD的曲线下面积(AUC)分别为0.880、0.834和0.868,联合诊断的AUC为0.923,高于单独诊断。结论 超声参数、血清GSK-3β和HSP27对CPHD均具有较高的诊断价值,联合检测的诊断效果更高。

噪声作业工人血浆热休克蛋白60、70抗体滴度分析

目的 探讨噪声作业工人血浆热休克蛋白 (HSPs) 6 0、 70抗体滴度及其与累积噪声暴露量 (CNE)的关系。方法 用Westernblot免疫印迹法对 391名工人 (噪声暴露 2 0 7名 ,对照 184名 )的血浆HSP 6 0、 70抗体水平进行测定 ,用趋势 χ2 检验和多因素Logistic回归模型分析HSP 6 0、 70抗体水平与噪声暴露的关系。结果 除HSP 6 0抗体滴度 1∶80外 ,其他滴度观察组HSP 6 0、 70抗体阳性率与对照组间差别均有显著性意义 ;HSP 70抗体滴度为 1∶10阳性率随累积噪声暴露量 (CNE)增大而升高 ;用Logistic回归分析控制了混杂因素的作用后 ,血浆HSP 6 0、HSP 70抗体检出率与CNE呈正相关关系。结论 血浆HSP 6 0、

牦牛肉宰后成熟过程中热休克蛋白27表达量与食用品质的相关性分析

为研究牦牛肉宰后成熟过程中热休克蛋白27（heat？shock？protein？27,Hsp27）的变化及其与食用品质的相关性,测定了5头青海大通母牦牛背最长肌肉成熟过程中色度L＊、a＊、b＊值、p H值、剪切力、蒸煮损失以及Hsp27的表达量,进一步研究了Hsp27与肉品质的相关性。结果表明：Hsp27表达量总体呈降低的趋势,宰后0～48？h？Hsp27表达量显著降低（P〈0.05）,72～120？h？Hsp27表达量显著升高,至168 h又显著降低（P〈0.05）;Hsp27表达量与a＊值成显著正相关（P〈0.05）,与b＊值成极显著负相关（P〈0.01）,与p H值成极显著正相关（P〈0.01）。证明Hsp27与牦牛肉食用品质之间存在相关性。

心肌特异性高表达热休克蛋白27转基因鼠建立

目的:建立人热休克蛋白27(heat shock protein27,Hsp27)基因在小鼠心肌特异性表达的转基因鼠模型。方法:将人心肌Hsp27cDNA插入含有心肌特异性表达启动子αMHC的pBSⅡ-SK+载体中,限制性内切酶EcoRI酶切、纯化后,获得含有αMHC启动子-Hsp27cDNA-HGHpolyA的线性DNA片段,以显微注射法将目的基因导入受精卵,PCR筛选基因型,Western blot鉴定转移基因的表达和表达的组织特异性。结果和结论:共获得两个转基因系小鼠,均呈心肌组织特异性高表达。

热休克蛋白27在转移潜能不同人肝癌细胞系中的表达及机制研究

利用不同转移潜能肝癌细胞系探讨热休克蛋白27(HSP27)参与肝癌细胞转移潜能形成的可能分子机制.细胞免疫荧光技术、RT-PCR和免疫印迹技术显示,HSP27在转移潜能不同的肝癌细胞Hep3B、MHCC97L和MHCC97H中定位于细胞浆,亦可见于细胞核,HSP27 mRNA和蛋白质的表达水平与肝癌细胞转移潜能呈正相关.高转移潜能肝癌细胞系MHCC97H的HSP27 RNA干扰试验结果显示,HSP27 RNA干扰后MHCC97H的侵袭(MHCC97H组:21.36±2.92;对照RNAi组:19.88±2.23;RNAi组:11.40±2.05)、运动能力(MHCC97H组:26.35±3.29;对照RNAi组:24.43±3.17;RNAi组:10.92±2.27)明显减弱,细胞凋亡显著增加(MHCC97H组:15.12%;对照RNAi组:17.56%;RNAi组:27.64%).同时进行信号转导基因芯片检测发现,HSP27干扰后核因子κB(NF-κB)通路抑制,并且免疫印迹显示细胞核内活化的NF-κBp65减少,细胞内磷酸化IκBα降低.另外,免疫共沉淀检测发现,在肝癌细胞内HSP27可与IKKβ、IκBα共沉淀,且在HSP27RNA干扰后IKKβ与IKKα结合能力下降.这些结果提示,HSP27可能通过参与细胞内NF-κB通路的激活,影响细胞凋亡和细胞运动,在肝癌细胞侵袭转移过程中发挥作用.

表达幽门螺杆菌热休克蛋白60克隆的构建

目的:构建含Hp热休克蛋白60(Hsp60)基因的重组载体并在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,为进一步研究Hsp60的佐剂功能和免疫原性奠定基础.方法:提取Hp染色体基因,用PCR方法扩增Hsp60基因,将其克隆至表达载体pET-22b(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达并通过免疫印迹实验研究其免疫原性.结果:分离得到了1.6kb的Hsp60基因片段,并在大肠杆菌中实现了该基因的高效表达,在37℃诱导表达3h后,表达产物占细菌总蛋白的27.2%.表达以可溶性蛋白和包涵体两种形式存在,其中主要是包涵体的形式,目的蛋白占不溶性蛋白的76.6%.经免疫印迹证实该重组蛋白可以被Hp感染患者血清所识别.结论:成功地克隆并表达HpHsp60基因,为Hp疫苗的研制打下了基础.

血清抗幽门螺杆菌热休克蛋白60抗体与消化性溃疡的关系

目的 :探讨幽门螺杆菌 (Hp)感染患者血清抗幽门螺杆菌热休克蛋白60(Hsp60)抗体与消化性溃疡的关系。方法 :检测胃溃疡、十二指肠球部溃疡、慢性浅表性胃炎患者Hp感染及血清抗幽门螺杆菌Hsp60抗体表达情况。结果 :(1)血清抗幽门螺杆菌Hsp60抗体阳性表达仅见于Hp阳性患者。Hp阳性胃溃疡、十二指肠球部溃疡患者血清抗幽门螺杆菌Hsp抗体阳性率明显高于慢性浅表性胃炎患者 (均P<0.05)。(2)26例血清抗幽门螺杆菌Hsp抗体阳性的消化性溃疡患者在Hp根除及洛赛克疗程结束后4周 ,其中7例抗体转为阴性。结论 :血清抗幽门螺杆菌Hsp60抗体可能与Hp感染所致消化性溃疡的发生有关 ;血清抗幽门螺杆菌Hsp60抗体不能作为近期判断Hp根除与否的标准。

热休克蛋白27介导异氟醚预处理延迟相对缺血/再灌注损伤兔心肌的保护作用研究

目的探讨热休克蛋白27（HSP27）在异氟醚预处理延迟相对缺血/再灌注（I/R）兔心肌保护中的作用机制。方法将30只新西兰大白兔随机分成假手术组（C组）、I/R组和体积分数为2%的异氟醚预处理组（S组）3组,每组10只。C组吸入纯氧2h,24h后仅行左冠状动脉（冠脉）套线而不阻断血流160min;I/R组吸入纯氧2h,24h后结扎左冠脉前降支阻断血流40min,再灌注120min;S组吸入2%的异氟醚和纯氧2h,24h后处理同I/R组。再灌注后抽血测定各组丙二醛（MDA）含量;用伊文思蓝和氯化三苯四唑（TTC）染色法测定心肌梗死面积;用蛋白质免疫印迹法（Westernblotting）测定各组HSP27和核转录因子-κB（NF-κB）的蛋白表达。结果异氟醚预处理延迟相可降低I/R损伤心肌梗死面积（19.7±2.8）%比（37.8±1.75）%,上调HSP27表达（84.5±4.3）灰度值比（53.1±3.8）灰度值,下调NF-кB表达（58.6±4.2）灰度值比（119.3±5.6）灰度值,降低MDA含量（5.24±0.45）kU/L比（9.42±0.83）kU/L,差异均有统计学意义（P均〈0.05）。结论HSP27介导了异氟醚预处理延迟相对I/R心肌的保护作用。

幽门螺杆菌热休克蛋白60基因的克隆、表达及免疫原性研究

目的构建表达幽门螺杆菌热休克蛋白60(Hsp60)的候选菌株并研究其免疫原性。方法利用PCR技术扩增Hsp60基因,将其定向插入pET-22b(+)载体,在BL21(DE3)大肠杆菌中表达并通过动物实验研究其免疫原性。结果克隆的Hsp60基因序列与Genbank公布的一致,Hsp60重组蛋白表达量占菌体总蛋白的27.2%,并可被幽门螺杆菌感染者血清所识别,用其免疫小鼠可产生抗该重组蛋白的抗体。结论Hsp60有可能成为一种有效的疫苗用于幽门螺杆菌感染的预防和治疗。

热休克蛋白10和热休克蛋白的60表达、纯化及与线粒体DNA转录因子A相互结合

目的:表达、纯化热休克蛋白10(Hsp10)和热休克蛋白60(Hsp60),研究人类线粒体DNA转录因子A(TFAM)在体外与Hsp10,Hsp60间的相互交联作用。方法:使用Escherichia.Coli(E.coli)诱导表达含有6个组氨酸标记的Hsp10和Hsp60,镍离子鳌合树脂分离纯化后,体外分别与纯化TFAM共育,抗-TFAM抗体免疫沉淀,SDS-PAGE分离蛋白,CBB探测分析。结果:Hsp10可在体外与TFAM发生免疫共沉淀,Hsp60不能。结论:Hsp10可能为TFAM-复合体组分。

幽门螺杆菌热休克蛋白60脂质体疫苗的制备及其免疫预防作用

目的探讨制备脂质体包裹重组幽门螺杆菌(Hp)热休克蛋白60(Hsp60)口服疫苗的方法,并用Hp感染的小鼠模型评价其在预防Hp感染中的作用。方法将PET-22(+)/Hsp60在BL21(DE3)大肠杆菌表达,Ni-NTA琼脂糖树脂纯化Hsp60重组蛋白,用薄膜分散法制备以卵磷脂和胆固醇为膜组分包裹的Hsp60重组蛋白口服疫苗,并用透射电镜测定其粒径。75只BALB/C小鼠分为5组,分别通过灌胃方法给予PBS、空白脂质体、Hsp60重组蛋白+霍乱霉素(CT)、脂质体包裹Hsp60重组蛋白、脂质体包裹Hsp60重组蛋白+CT,每周1次共4次,末次攻击2周再用活Hp攻击3次,3周后处死小鼠,行胃组织快速尿素酶试验、Hp的定植半定量、炎症程度及其炎症活动度的评分。结果可溶性表达产物占全菌总蛋白的27%,经纯化获得纯度为95%的重组蛋白,制备的脂质体粒径为(0.7±0.4)μm。PBS组和空白脂质体组保护率均为0,而Hsp60重组蛋白+CT组、脂质体包裹Hsp60重组蛋白组、脂质体包裹Hsp60重组蛋白+CT组的保护率分别为73.3%、66.7%和86.7%,且均能使免疫小鼠胃粘膜Hp感染数目明显减少,炎症反应减轻。结论口服脂质体能分地代替免疫佐剂,作为Hp疫苗的免疫佐剂,将具有广泛的应用前景。

鼠青光眼模型中热休克蛋白27的表达及其作用(英文)

目的:探讨热休克蛋白27(HSP27)在鼠青光眼模型视网膜神经节细胞(RGCs)中的表达以及眼压对抗HSP27自身抗体的影响。方法:使用SPSS12.0软件将55只Wistar大鼠随机分为高眼压组(25只鼠)、sham对照(假手术)组(25只鼠)及正常对照组(5只鼠)。采用电凝鼠巩膜表面至少3组静脉及角膜缘周围血管,建立鼠青光眼模型。采用免疫组化和酶联免疫吸附测定(ELISA)方法分别检测术后1,2,3,4及8wk视网膜中RGCs以及神经纤维层(RNFL)HSP27的表达、分布以及血清中抗HSP27抗体水平。结果:随着眼压升高及高眼压持续时间延长,高眼压组右眼RGCs中HSP27表达逐渐增强,与其左眼、sham对照组右、左眼和正常对照组右、左眼比较,差异均有统计学意义(P<0.001),且RNFL中也出现HSP27的表达。高眼压组血清中抗HSP27抗体水平在术后1wk轻度升高(P>0.05),随着眼压升高及高眼压持续至术后8wk,血清中HSP27抗体水平逐渐升高并稳定于较高水平,与sham对照组和正常对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:内源性HSP27表达增强可能在青光眼视神经病变中具有重要作用。

胃癌患者血清热休克蛋白27、90的检测

目的:检测胃癌患者血清热休克蛋白(heatshock protein,HSP)27、90的含量,探讨其与胃癌临床及病理指标,以及预后的关系.方法:应用ELISA方法测定42例胃癌患者血清标本中HSP27、90的含量,并与40例同期正常对照组的血清标本作对比分析.同时采用单因素方差分析和相关分析探寻HSP27、90的浓度与胃癌病理类型、病理分期及TNM分期的关系,并通过生存分析探寻其与胃癌预后的关系.结果:胃癌患者血清HSP27、90的表达显著高于正常对照者(P=0.000).在胃癌患者中,血清HSP27、90在不同病理类型、病理分期及TNM分期中均无显著差异,仅HSP27在T4组显著高于其他组(P=0.036).Pearson相关分析显示,血清HSP27和HSP90之间呈显著相关(r=0.321,P=0.038),Spearman相关分析显示,血清HSP27、90的表达与病理类型、病理分期及TNM分期无显著相关关系.Kaplan-Meier生存分析未得出血清HSP27、90和胃癌预后的相关关系.结论:血清HSP27、90表达与胃癌的发病密切相关,可作为协同判断胃癌发病的指标,且两者表达呈正相关.

热休克蛋白60基因多态性与噪声性听力损失易感性的关系

目的探讨热休克蛋白60(HSP60)基因多态性与噪声性听力损失的关系。方法采用横断面流行病学研究方法,对194名噪声暴露作业工人进行调查和听力测试,按听力学评价的结果将其分为听力损失组和听力正常组;用等位基因特异扩增法(ASA)和多聚酶链反应-限制性片断长度多态性法(PCR-RFLP)检测其HSP60基因上rs11551350和rs2340690两个单核苷酸位点的多态性。结果rs11551350位点在93名噪声性听力损失的工人中GG、AA和AG基因型的频率分别为1.1%、9.7%和89.2%,等位基因G和A的频率为45.7%和54.3%;在101名听力正常的工人中,基因型频率分别为5.9%(GG)、5.9%(AA)和88.1%(AG),等位基因频率为50.0%(G)和50.0%(A)。rs2340690位点在噪声性听力损失组CC、TT和CT基因型的频率分别为51.6%、7.5%和40.9%,等位基因C和T的频率为72.0%和28.0%;在听力正常组的基因型频率分别为45.5%(CC)、4.0%(TT)和50.5%(CT);等位基因频率为70.8%(C)和29.2%(T)。两位点的基因型分布及其等位基因频率在噪声性听力损失组与听力正常组之间差异均无显著性(P>0.05)。采用多元Logistic回归对两组间年龄、性别、吸烟状况、爆震史和累积噪声暴露量等因素进行校正后,未发现两位点中任一基因型的噪声性听力损失的危险度有显著性升高(P>0.05)。结论HSP60基因的rs11551350和rs2340690两个单核苷酸位点的多态性可能不是噪声性听力损失的遗传易感性因素。

热休克蛋白60对小鼠树突状细胞成熟及免疫功能的影响

目的探讨动脉粥样硬化中重要炎性物质———热休克蛋白60(HSP60)体外对小鼠树突状细胞(mDC)功能的影响。方法从近交系C57BL/6J小鼠骨髓中提取mDC,体外培养成熟后分别与3、10μg/ml mHSP60或PBS孵育24 h,观察其形态改变;流式细胞仪检测mDC表面标志;混合淋巴细胞反应(MLR)测定mDC刺激功能;ELISA法测定MLR上清液中细胞因子浓度。结果mHSP60处理组较对照组,mDC突起增加明显;CD80及CD86表型显著增加;淋巴细胞刺激功能明显增强;上清液细胞因子IL-12、IFN-γ增加(P<0.01)而IL-4增加不明显(P>0.05),IFN-γ/IL-4比值升高。以上变化mHSP60高剂量处理组较低剂量处理组更明显。结论mHSP60体外可以促进mDC功能,且作用呈剂量依赖性。

热休克蛋白27对臂丛神经根撕脱后脊髓运动神经元NOS的影响

目的：观察热休克蛋白27（Hsp27）对大鼠臂丛神经根撕脱后脊髓运动神经元一氧化氮合酶（NOS）表达的影响。方法：Wistar大鼠60只，随机分为实验组和对照组。实验组动物分别以45℃预处理热处理15min，再置于42％维持20min，置室温恢复24h后，手术显微镜下进行脊髓C5～C8节段神经根撕脱术；对照组仅施行臂丛神经根撕脱术，两组分别于术后12h、1d、3d、5d、7d处死动物。各组取C5～C8节段脊髓，行Hsp27免疫组化、NADPH—d组化染色，结合自动图象分析系统对结果进行半定量分析。结果：①实验组在12h即有NOS大量表达，之后迅速回落；对照组伤后第5天开始大量出现NOS阳性。②两组Hsp27表达高峰均在热休克后1d，且实验组强于对照组。结论：臂丛神经根撕脱伤后Hsp27可能通过抑制NOS神经元来发挥其细胞保护作用。