人肺癌组织热休克蛋白70-肿瘤肽纯化方法比较

目的 从人体肺癌组织分离纯化热休克蛋白70-肿瘤肽（HSP70-肿瘤肽），比较两种层析系统分离纯化的结果。方法 采用快速蛋白液相层析（FPLC）自动系统及简单离子交换层析系统，运用亲和层析、离子交换层析、SDS—PAGE、Western-blot方法从肺癌病人手术切除肿瘤组织分离纯化HSP70-肿瘤肽。结果收集两种方法所纯化蛋白洗脱液，经电泳显示于70KD处有一纯蛋白带，定性鉴定该蛋白确系HSP70肽蛋白。结论两种层析系统均能够纯化出纯度较高的热休克蛋白70-肿瘤肽，两种方法均切实可行，实验室可根据自身条件选择应用。

慈苓化浊方对痛风大鼠滑膜组织环氧化酶-2、热休克蛋白70表达的影响

目的:分析慈苓化浊方对痛风大鼠滑膜组织中环氧化酶-2(COX-2)、热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法:选取50只SPF级SD大鼠,10只大鼠作为对照组,另外40只建立痛风模型,将30只建模成功的大鼠分为模型组、药物对照组、慈苓化浊方组,每组10只。观察各组大鼠组织病理学、关节肿胀度、COX-2、HSP70表达、炎症因子、磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)/叉头框转录因子O亚族1(FoxO1)通路相关因子及其mRNA表达量。结果:与对照组相比,模型组、药物对照组、慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、PI3K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量升高,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量降低(均P<0.05)。与模型组相比,药物对照组、慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6、PI3K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量降低,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量升高(均P<0.05)。与药物对照组相比,慈苓化浊方组关节肿胀度、COX-2、TNF-α、IL-1β、IL-6、PI3K mRNA、AKT mRNA、FoxO1 mRNA表达量降低,HSP70 mRNA、Caspase-3 mRNA表达量升高(均P<0.05)。结论:采用慈苓化浊方干预痛风大鼠,可降低大鼠关节肿胀程度,降低滑膜组织COX-2、HSP70表达,抑制炎症反应,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT/FoxO1通路有关。

热休克蛋白90α、β_(2)-微球蛋白及胃泌素释放肽前体在肺癌患者血清中的表达水平及检测意义

目的:探讨热休克蛋白90α(HSP90α)、β_(2)-微球蛋白(β_(2)-MG)及胃泌素释放肽前体(ProGRP)在肺癌患者血清中的表达水平及检测意义。方法:选取接受诊治的肺癌患者133例为肺癌组,另选择肺部良性结节患者106例(良性肺病组)及体检健康者112例(对照组)。比较三组血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平,并分析HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP对肺癌的诊断价值;比较肺癌组不同病理类型患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP阳性检出率以及肺癌组化疗后不同疗效患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平。结果:肺癌组血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平高于对照组、良性肺病组(均P<0.05)。血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP联合检测肺癌的AUC为0.861,高于三者单独检测的AUC(均P<0.05)。血清HSP90α、β_(2)-MG在NSCLC阳性检出率高于SCLC,血清ProGRP在SCLC阳性检出率高于NSCLC(均P<0.05)。肺癌组化疗后,无效患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平高于有效和稳定患者(均P<0.05)。稳定患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平高于有效患者(均P<0.05)。结论:肺癌患者血清HSP90α、β_(2)-MG、ProGRP水平升高,且与不同病理类型和化疗效果有关,三者联合检测对肺癌诊断价值较高。

重组人热休克蛋白70-抗原肽复合物对肿瘤的免疫治疗作用研究

目的:使用以毕赤酵母X-33为宿主菌,重组表达制备的rhHSP70与合成的HER2/neu抗原肽体外结合形成复合物,探讨其在肿瘤免疫治疗中的有效性。方法:在ADP存在的条件下,将rhHSP70与纯化的HER2/neu抗原肽体外非共价结合形成复合物,并分次免疫BALB/c小鼠,通过ELISPOT和颗粒酶释放法,检测该复合物诱导特异性CTL的能力。通过检测小鼠体内肿瘤的生长情况和肿瘤的组织切片,来观测该复合物对小鼠乳腺癌的免疫治疗作用。结果:rhHSP70-HER2/neu抗原肽复合物免疫小鼠后,可以增加T细胞分泌IFN-γ的能力,诱导出肿瘤特异性CTL,并对小鼠的乳腺癌有明显的治疗作用。结论:在毕赤酵母中重组表达的rhHSP70可以在体外与一定的抗原肽非共价结合形成复合物,该复合物具有较强的诱导特异性CTL的能力,可对实验鼠的乳腺癌起到明显的治疗作用。

肺癌热休克蛋白70-多肽复合物的抗肿瘤免疫效应研究及其与热证的相关性

目的:观察不同证候患者肺癌组织热休克蛋白70-多肽复合物(HSP70-PC)对人类肺癌A-549细胞的抗肿瘤免疫效应,探讨其抗瘤效应是否存在证候相关性。方法:运用ADP亲和层析、DEAE离子交换层析、SDS-PAGE、Westem-blot、细胞培养、MTT检测等方法从人体肺癌组织及远端正常肺组织分离纯化HSP70-PC,观察不同证候患者肿瘤来源HSP70-PC对人外周血单个核细胞(PBMC)的激活增殖效应及致敏淋巴细胞对人肺癌A-549细胞的肿瘤细胞毒杀伤效应。结果:①热证癌PC组和非热证癌PC组促淋巴细胞增殖效应较空白对照组显著升高;所致敏淋巴细胞对人肺癌细胞均有很强的杀伤效应,与空白对照组相比,有显著性差异。②热证癌PC组较非热证癌PC组促淋巴细胞增殖效应及肿瘤细胞毒杀伤效应均有明显增高趋势。③肺癌患者远端正常肺组织HSP70-PC未见显著刺激淋巴细胞增殖作用,杀伤效应也未见明显升高。结论:人类肺癌组织HSP70-PC能够诱导针对人肺癌细胞的抗肿瘤免疫效应,其抗瘤效应很有可能与热证存在相关性。

人软骨糖蛋白-40、热休克蛋白-70及儿茶酚胺对急性冠脉综合征患者病情严重程度的预警作用研究

目的:探究人软骨糖蛋白-40(YKL-40)、热休克蛋白-70(HSP-70)及儿茶酚胺与急性冠脉综合征(ACS)患者病情严重程度之间的关联性,为临床诊疗提供参考价值。方法:研究对象选取心血管内科就诊并进行治疗的急性冠脉综合征(ACS)患者共213例,并根据冠状动脉造影(CAG)及临床生理指标结果将所有患者分为急性心肌梗死(AMI)105例和不稳定心绞痛(UAP)108例;根据Gensini评分分为低危组(评分≤30分)59例、中危组(30分<评分≤60分)69例和高危组(评分>60分)85例;根据冠脉病变支数将患者分为单支组35例、双支组106例和多支组72例。①记录并比较AMI组、UAP组及对照组研究对象YKL-40、HSP-70、儿茶酚胺水平;②记录并比较低、中、高危组及对照组研究对象YKL-40、HSP-70、儿茶酚胺水平;③分析YKL-40、HSP-70、儿茶酚胺水平与冠脉病变支数的关联性;④分析YKL-40、HSP-70、儿茶酚胺水平与Gensini评分的相关性。结果:①与健康对照组相比,UAP组、AMI组患者YKL-40、HSP-70、儿茶酚胺水平均明显升高(均P<0.05);与UAP组相比,AMI组患者YKL-40、儿茶酚胺水平明显升高(均P<0.05),HSP-70水平无明显变化(P>0.05)。②随着患者病情严重程度的增加,YKL-40、儿茶酚胺水平显著升高(均P<0.05),且各组间比较差异有统计学意义(均P<0.05);与低危组及中危组患者相比,高危组患者HSP-70水平显著降低(P<0.05)。③随着患者冠脉病变支数的增加,YKL-40、儿茶酚胺水平升高,HSP-70水平降低;与单支组及双支组患者相比,多支组患者YKL-40、儿茶酚胺水平显著升高(均P<0.05),HSP-70水平无明显变化(P>0.05)。④相关性分析显示,YKL-40、儿茶酚胺水平与Gensini评分均呈显著正相关,HSP-70评分与Gensini评分呈显著负相关。结论:ACS患者YKL-40、HSP-70及儿茶酚胺水平均明显高于健康人群;随着患者病情严重程度及冠脉病变支数的增加,YKL-40、儿茶酚胺水平升高,HSP-70水平降低。同时,YKL-40、HSP-70及儿茶酚胺水平均与Gensini评分显著相关,且能够很好的评估ACS患者病情及冠脉病变状况,具有较高的临床价值。

热休克蛋白70(HSP70)-肿瘤肽的纯化

目的本文主要探讨热休克蛋白70(HSP70)-肿瘤肽的纯化。方法肝癌患者行手术切除后的肝癌组织,经处理后-70℃冰箱保存。然后分别经过透析、蛋白质分子量鉴定、蛋白质性质鉴定、蛋白质浓度测定并及时观察记录。结果 10g肝癌组织经上述分离纯化过程最终获得HSP70-肽复合物总量为8mg。结论利用二步蛋白纯化法有益于HSP70-肽复合物对肿瘤作用机制和肿瘤疫苗安全性的进一步研究与推广。

热休克蛋白70-多肽复合物在肿瘤免疫领域的研究进展

热休克蛋白(Heat Shock Proteins，HSPs)是一组广泛存在于细胞内的可溶性蛋白，在应激(如热休克、高温、感染、缺氧、氧化应激、异常代谢物积聚等)条件下高效表达。主要参与胞内新生肽的结合、折叠、装配、降解与跨膜转运，在维持细胞的正常结构和功能方面起着重要作用。根据其分子量的大小分为4个家族，即HSP90(83～90kD)家族、HSP70(66～78kD)家族、HSP60家族及小HSP家族。此外还有分子量为100～110kD而特性不同于上述家族的大分子HSP。

脐血来源树突状细胞负载热休克蛋白70-肿瘤抗原肽复合物的细胞表型鉴定及其特异性杀伤效应

目的:观察从脐血中提取的树突状细胞负载热休克蛋白70-肿瘤抗原肽复合物的细胞表面表型特点及其所激活的细胞毒T淋巴细胞的杀伤活性。方法:实验于2003-10/2005-12在解放军军事医学院兽医研究所完成。①脐血来源于长春市妇产医院足月顺产的非高危妊娠产妇,要求无急慢性感染及血液系统疾病,产妇及其家属均签署知情同意书。热休克蛋白70由本室制备纯化。人骨肉瘤细胞Saos-2(北京肿瘤研究所,批号222RXB013538)。②封闭式采集脐带血,体外分离脐血单个核细胞,调整浓度为1×109L-1,接种于24孔细胞培养板,每孔均加入100μg/L人重组粒-巨噬细胞集落刺激因子、50μg/L白细胞介素4、10μg/L肿瘤坏死因子α。培养14d后,鉴定细胞表面CD1a、HLA-DR的百分率。③用含胎牛血清的IMDM培养Saos-2骨肉瘤细胞至对数生长期,胰酶消化后调整细胞数为5×107L-1。集传20代生长的Saos-2,冻融2次,低渗震荡,离心,上清用盐酸调pH至7.0,过滤后即为肿瘤抗原肽,与热休克蛋白70体外结合。④另取脐血40mL,分离T淋巴细胞,诱导分化至第4天,加入热休克蛋白70-肿瘤抗原肽100μL,促使T淋巴细胞活化为细胞毒T淋巴细胞。⑤效应细胞(细胞毒T淋巴细胞)与靶细胞(Saos-2)按效靶比50∶1,25∶1,12.5∶1,6.25∶1,3.125∶1梯度,四甲基偶氮唑盐法检测细胞毒T淋巴细胞杀伤活性。结果:①细胞形态学观察:细胞因子诱导后第3天,镜下脐血细胞呈均匀散布的细胞聚体,胞体拉长;第7天可见不明显突起;第14天出现具有典型树枝状突起的树突状细胞。②细胞因子诱导后脐血单核细胞表面表型鉴定结果:经细胞因子诱导后,脐血单核细胞CD1a与HLA-DR表达率均较诱导前明显升高[0,(18.43±3.26)%;(4.03±1.66)%,(59.69±8.47)%;P均<0.01]。③细胞毒T淋巴细胞杀伤活性检测结果:培养72h后,细胞毒T淋巴细胞与靶细胞Saos-2效靶比为50∶1时可杀伤决大部分肿瘤细胞,杀伤率为(97.50±11.24)%,效靶比从50∶1至3.125∶1可使靶细胞Saos-2生长呈梯度受到不同程度的抑制。单纯的树突状细胞及未经激活的T淋巴细胞对Saos-2细胞仅有微弱的生长抑制作用。结论:脐血来源的树突状细胞经过热休克蛋白70-肿瘤抗原肽复合物负载致敏后,激活的细胞毒T淋巴细胞对人骨肉瘤细胞Saos-2具有极强的杀伤能力。

β-榄香烯体外诱导大鼠神经胶质瘤细胞热休克蛋白70的表达及肿瘤细胞的凋亡

目的探讨β-榄香烯体外对胶质瘤细胞的抑制作用及其机制。方法用MTT法观察β-榄香烯作用下大鼠神经胶质瘤细胞(C6细胞)生存情况；用FCM法检测C6细胞膜热休克蛋白70(HSP70)的表达及细胞周期；电镜观察瘤细胞的超微结构变化。结果(1)榄香烯组、丝裂霉素组、榄香烯+丝裂霉素组C6细胞的生存率均下降,生存的抑制作用呈剂量依赖性。(2)榄香烯组、榄香烯+热休克组C6细胞株胞膜上HSP70蛋白的表达率(63．88%、97．84%)均较对照组(平均4．72%)显著增高(P＜0．05)。(3)FCM检测经β-榄香烯(0．2mg/ml)处理的C6细胞S期细胞比例上升(53．80%),G_2-M期的细胞数目下降(4．67%),有亚二倍体峰(23．37%),电镜发现凋亡小体。结论β-榄香烯能抑制C6细胞的增殖,可诱导C6细胞膜HSP70蛋白的表达。使肿瘤细胞凋亡可能是其抗瘤效应的一个重要机制。

热休克蛋白70-H22肽刺激DC诱导特异性抗肝癌免疫

目的探讨热休克蛋白70(TB.HSP70)-H22肽是否能促进树突状细胞(DC)活化成熟并诱导H22特异性抗肿瘤免疫。方法取小鼠骨髓于培养第7天分为A、B、C 3组,分别给予未刺激、TB.HSP70-H22肽(10μg/mL)、TB.HSP70-H22肽(20μg/mL)干预24h,取上清液用ELISA法检测IL-12、IL-10,用FACS法检测CD40、CD80,用混合淋巴细胞反应检测淋巴细胞增殖,用MTT法检测DC活化淋巴细胞对H22和B16肿瘤细胞杀伤率。结果与A组比较,B、C组除对B16细胞杀伤率差异无统计学意义外,B、C组IL-10明显降低,CD40、CD80、IL-12、淋巴细胞增殖程度和对H22杀伤率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与B组比较,C组对B16细胞杀伤率差异无统计学意义,IL-10明显降低,CD40、CD80、IL-12、淋巴细胞增殖程度和对H22杀伤率均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论TB.HSP70-H22肽能明显促进DC活化成熟,诱导H22特异性抗肿瘤免疫,为该疫苗用于肝癌免疫治疗提供了理论基础。

家兔发热过程中单核细胞热休克蛋白70表达与白细胞介素-1β、肿瘤坏死因子-αmRNA表达的关系

目的探讨HSP70参与体温调控的作用及其可能机制。方法复制家兔LPS发热模型,RT-PCR和Western blot检测在发热过程中单核细胞IL-1β、TNF-αmRNA与HSP 70的表达。结果注射LPS0.5μg/kg后家兔体温明显升高,出现两个体温高峰;由LPS引起的发热过程中单核细胞TNF-α、IL-1βmRNA的表达水平分别在60 min和180 min达高峰,400 min以内降至基础水平;单核细胞HSP70的含量在注射LPS后160 min时开始升高,实验结束时达最高值;LPS引起发热的过程中单核细胞HSP70含量与单核细胞TNF-α、IL-1βmRNA的表达量之间呈负相关关系。结论 LPS致发热时,HSP70可能通过抑制TNF-α、IL-1β等内生致热原基因的表达而限制体温升高。

肿瘤热休克蛋白70联合IL-2对荷瘤小鼠的治疗作用

目的:研究肿瘤热休克蛋白70(HSP70)与IL-2联合应用对荷瘤小鼠的治疗作用。方法:用液相色谱法纯化小鼠肿瘤细胞 株中的HSP70。对纯化产物用SDS-PAGE及Western blot进行定性分析,再用毛细管电泳鉴定其纯度。通过动物实验,观察HSP70与IL-2单独应用及联合应用的抗肿瘤作用。结果:HSP70与IL-2联合应用较单独应用的治疗效果更明显,但治疗作用仍以HSP70为主。单独应用IL-2只能延长小鼠的生存期限[平均为(36.6±13.0)d],而HSP70 10μg组可使40％荷瘤小鼠的肿瘤最终全部消退,生存期最长者>90[平均生存期(>59.2±29.6)d],与对照组相比较差异显著(P<0.01)。HSP70与IL-2联合应用组可使60％荷瘤小鼠的肿瘤完全消退,平均生存期(>70.8±26.5)d,与对照组相比差异十分显著(P<0.01)。结论:合适剂量的HSP70与IL-2联合应用,对荷瘤小鼠有明显的治疗作用,可明显抑制肿瘤进展,提高生存率。以上结果对研究人类恶性肿瘤的免疫治疗具有较大的参考价值。

血清热休克蛋白70、白细胞介素-4和白细胞介素-17在过敏性紫癜中的临床意义

目的探讨血清热休克蛋白70(HSP70)、白细胞介素(IL)-4和IL-17水平检测在过敏性紫癜(HSP)中的临床意义,同时了解其对HSP患儿的诊断价值。方法选取2020年9月至2022年4月在该院初次就诊的158例HSP患儿作为观察组,另选取同期50例健康体检儿童作为健康对照组。分别收集观察组(急性期和恢复期)、健康对照组的血液标本,采用酶联免疫吸附试验检测并比较两组儿童HSP70、IL-4及IL-17的水平变化情况;采用Spearman相关分析HSP70水平与IL-4、IL-17水平的相关性;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血清HSP70、IL-4和IL-17水平对HSP的临床诊断效能。结果与健康对照组比较,观察组血清HSP70、IL-4和IL-17水平均明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05);急性期HSP患儿HSP70、IL-4、IL-17水平均明显高于恢复期,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,急性期HSP患儿HSP70水平与IL-4、IL-17水平均呈明显正相关(r=0.784、0.553,P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,HSP70诊断急性期HSP的曲线下面积(AUC)为0.966,95%CI为0.945~0.987,最佳截断值为1.765 ng/mL时诊断灵敏为86.00%,特异度为93.04%;IL-4诊断急性期HSP的AUC为0.973,95%CI为0.955~0.991,最佳截断值为4.700 pg/mL时诊断灵敏为84.00%,特异度为92.83%;IL-17诊断急性期HSP的AUC为0.929,95%CI为0.882~0.976,最佳截断值为10.250 pg/mL时诊断灵敏为86.00%,特异度为93.04%。结论HSP70在HSP的发病过程中对免疫功能紊乱的调节具有重要作用,且HSP70可能通过上调Th2和Th17细胞的免疫应答来介导HSP的发病,HSP70、IL-4和IL-17水平检测有助于对早期HSP的辅助诊断。

热休克蛋白70-甲胎蛋白抗原表位肽疫苗抗小鼠H22肝癌细胞免疫机制的研究

分别以AFP多肽、HSP70和HSP70-AFP多肽复合物免疫小鼠,检测各组CD8^+T细胞培养上清IFN-γ、TNF-α、穿孔素、颗粒酶B水平及CD8^+T细胞对H22细胞的杀伤作用,探讨热休克蛋白70(HSP70)-甲胎蛋白(AFP)抗原表位肽复合物对小鼠H22肝癌细胞的免疫效应。

谷氨酰胺对脂多糖血症大鼠热休克蛋白70和肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:观察谷氨酰胺对脂多糖血症大鼠热休克蛋白70和肿瘤坏死因子-α的影响。方法:将大鼠分为脂多糖组(LPS)、谷氨酰胺组(Gln)和对照组(C)。各组动物均在给予LPS前(对照组在给予生理盐水)和后2、4、6h采血。用放射免疫法测定血浆肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量。于术后6h处死,取肺、肝、肠组织,采用SABC方法,免疫组织化学染色进行HSP70检测,并HE染色,观察组织变化。结果:注射LPS后2h,LPS组血浆TNF-α表达显著升高(P<0·01),Gln可显著抑制其升高(P<0·01)。而注射LPS后4、6h,两组血浆TNF-α浓度没有明显差异。LPS组肺、肝、肠组织的HSP70灰度值分别为(107·94±10·96)、(120·04±5·73)和(123·31±14·81)。Gln组的HSP70灰度值显著降低,分别为(89·71±9·64)、(89·38±12·03)和(107·61±14·02)(均P<0·05)。病理学观察显示,Gln组肺、肝、肠组织损伤程度比LPS组轻。结论:谷氨酰胺可提高热休克蛋白70的表达,对脂多糖血症大鼠有防治作用。

人肺腺癌GLC-82细胞热休克蛋白70多肽复合物的提取及对细胞毒性T淋巴细胞作用的实验研究

摘 要:目的 探讨GLC -82细胞中HAC 70的提纯方法及其诱导的CTL表型变化和CTL及其上清液抗瘤效应。方法 GLC- 82 细胞热休克诱导 HSP 表达,离子交换层析提纯 HAC 70, SDS -PAGE 和ELISA法进行定量和定性检测,活化PBMC,T淋巴细胞亚群试剂盒测定 HAC- 70 诱导 CTL细胞表型变化情况,MTT法测定CTL及上清液杀瘤活性。结果 热休克处理能使 GLC- 82 细胞 HAC- 70 表达增加,离子交换层析可提纯 GLC-82 细胞中 HAC- 70。经热休克处理的 HAC -70 诱导 T淋巴细胞,其CD3+、CD^(4+)、CD^(8+)细胞与对照组的CTL细胞阳性率明显提高,其诱导的 CTL杀瘤活性显著提高,且其CTL培养上清液肿瘤杀伤活性最高。结论 离子交换层析可提纯 GLC -82 的 HAC -70;HAC- 70 可使CTL细胞CD^(4+)/CD^(8+)倒置,活化的CTL及上清液有较高的杀瘤活性,为肺癌肿瘤疫苗的制备和临床应用提供了实验依据。

BAG-1蛋白和热休克蛋白70在甲状腺肿瘤中的表达及临床意义

目的研究BAG-1、热休克蛋白70(HSP70)在甲状腺肿瘤中的表达及意义。方法采用免疫组织化学法检测BAG-1和HSP70在甲状腺乳头状癌、甲状腺腺瘤及正常甲状腺组织中的表达,并分析2种蛋白在甲状腺乳头状癌中的表达与临床特征的相关性。结果 BAG-1在甲状腺乳头状癌中的阳性表达高于甲状腺腺瘤组织和正常甲状腺组织,差异有统计学意义(P<0.01)。HSP70在甲状腺乳头状癌组、甲状腺腺瘤组及正常甲状腺组中的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05),而各组中强阳性率比较差异均有统计学意义(P<0.05)。BAG-1在甲状腺乳头状癌组织中的表达与患者的年龄、肿瘤大小、有无淋巴结转移无明显相关性(P>0.05);与是否绝经相关(P<0.05)。HSP70与各病理参数均不相关(P>0.05)。甲状腺乳头状癌中BAG-1和HSP70表达呈正相关(P<0.05)。结论BAG-1蛋白及HSP70在甲状腺乳头状癌组织中过表达可能与甲状腺乳头状癌的发生、发展有关。

小鼠肺腺癌热休克蛋白70-抗原肽复合物的纯化

目的 探索肿瘤热休克蛋白 70抗原肽复合物 (HCA70 )分离、纯化的方法。方法 采用低渗、反复冻融匀浆、ADP -Agarose亲和层析结合DEAE离子交换层析 ,从体外培养的小鼠肺腺癌细胞 (LA - 795)中纯化HAC70 ;通过SDS -PAGE电泳、Westernblot检测、小鼠移植瘤动物实验证实所获得蛋白是否为HAC70。结果 获得蛋白分子量为 70kD左右 ,与抗HSP70特异单抗结合 ,用此蛋白主动免疫的小鼠可抵抗LA795细胞的攻击 ,获得了高纯度的HAC70。结论 采用ADP -Agarose亲和层析结合DEAE离子交换层析可获得高纯度的HAC70。

热休克蛋白-肽复合物与肿瘤免疫

热休克蛋白（heat shock protein,HSP）是一类在生物进化过程中高度保守,广泛表达于所有生命机体组织细胞并具有管家功能的蛋白质。根据分子量的差异,HSP可分为10个家族,包括HSP110/grp170、gp96/grp94、HSP90、HSP70/grp78、HSP65、HSP25/27等,每个家族有1~5个成员[1]。在正常生理状态下,