短指软珊瑚(Sinularia acuta)热休克蛋白HSP70家族特征及进化分析

热休克蛋白70(heat shock protein 70, HSP70)在生物细胞或组织免受热或氧化应激等方面起着关键作用,是已知高度保守的蛋白质之一。由于全球环境持续升温,珊瑚大面积白化、死亡,珊瑚如何应对持续升温的抗逆机制是科学研究热点。本研究从高温胁迫短指软珊瑚测序蛋白序列数据库分析鉴定出了28个HSP70蛋白家族成员,均为酸性亲水蛋白,大部分蛋白质结构较为稳定。亚细胞定位表明HSP70蛋白主要分布在珊瑚细胞核、细胞质中,在线粒体、内质网上也有少量分布。信号肽预测表明, 28个HSP70蛋白成员中26个没有信号肽,大部分不属于分泌蛋白,不存在跨膜结构。系统进化树结果表明短指软珊瑚HSP70蛋白家族成员聚成5大类。短指软珊瑚HSP70蛋白家族结构和保守基序分析中预测到了10条保守基序motif分为5个亚族。短指软珊瑚HSP70蛋白家族二级结构主要以α-螺旋和无规则卷曲为主,α-螺旋的含量占比大。28个HSP70家族蛋白中有25个预测到了N-糖基化位点,且位点个数在1~9范围内。28个HSP70家族蛋白均预测到磷酸化位点和O-糖基化位点,总个数分别在41~96和1~23范围内。本研究HSP70家族蛋白结果为今后珊瑚在应对全球升温胁迫中的适应机制等方面研究奠定了基础。

血清基质金属蛋白酶-9、热休克蛋白47水平与急性脑出血术后预后的关系

目的采用血清基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、热休克蛋白47(HSP47)水平与急性脑出血术后预后的关系。方法2018年3月~2022年5月我院就诊急性脑出血病人145例,根据术后预后情况分为预后良好组(80例),预后不良组(65例)。收集病人的一般资料,采集病人入院次日的清晨空腹外周血,酶联免疫吸附法检测血清MMP-9、HSP47水平,采用多因素Logistic回归分析急性脑出血术后预后不良的危险因素,采用受试者工作曲线(ROC曲线)分析急性脑出血术后病人血清MMP-9、HSP47水平对其短期预后的预测价值。结果两组病人血肿形状是否规则、血肿量比较差异有统计学意义(P<0.05)。术后预后不良组的血清MMP-9、HSP47水平高于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归显示,手术时间、血肿形状、血肿量、血清MMP-9、HSP47水平均是急性脑出血病人术后预后不良的危险因素(P<0.05),发病时间至手术时间>24小时、血肿形状不规则、血肿量多、血清MMP-9、HSP47水平越高的急性脑出血术后的病人,其发生预后不良的风险越大。ROC曲线分析表明,血清MMP-9、HSP47水平预测急性脑出血病人术后预后情况的AUC分别为0.718、0.827,灵敏度分别为81.5%、80.0%,特异度分别为50.0%、81.2%;两个指标联合预测的AUC为0.891,灵敏度为86.2%,特异度为85.0%。结论急性脑出血术后预后不良病人的血清MMP-9、HSP47水平均升高,血肿形状不规则、血肿量、血清MMP-9、HSP47水平均是术后预后不良的危险因素。血清MMP-9、HSP47水平对急性脑出血术后的预后情况具有较高的预测价值,且联合预测的效能更高。

血清N末端B型利钠肽原和胰岛素样生长因子结合蛋白7及热休克蛋白47联合检测在慢性心力衰竭患者诊断中的应用价值分析

目的探讨血清N末端B型利钠肽原(NT-pro BNP)、胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP7)、热休克蛋白47(HSP47)联合检测在慢性心力衰竭(CHF)患者诊断中的应用价值分析。方法选取2021年12月至2023年12月唐山中心医院收治的CHF患者(n=106)为CHF组,另选取同期在本院健康体检者(n=106)为对照组。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)测定两组血清NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47表达水平,多因素logistic回归分析影响CHF发生的因素,受试者工作特征(ROC)曲线分析其对CHF患者的诊断价值。结果CHF组血清NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47水平与对照组相比,明显升高(t=0.960、8.047、11.196,P<0.05)。血清NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47三者联合诊断CHF的AUC最高,高于单独检测(Z_(三者联合-NT-pro BNP)=3.847、P=0.001,Z_(三者联合)-IGFBP7=4.672、P<0.001,Z_(三者联合-HSP47)=2.101、P=0.036)。多因素logistic结果显示,血清NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47水平是影响CHF的危险因素(P<0.05),左心室射血分数(LVEF)是影响CHF的保护因素(P<0.05)。结论CHF患者血清中NT-pro BNP、IGFBP7、HSP47表达水平升高,三者联合诊断CHF的效能最好。

颅内压联合血清热休克蛋白47检测对高血压脑出血患者神经功能缺损及预后评估的价值

目的探讨颅内压(ICP)联合血清热休克蛋白47(HSP47)检测对高血压脑出血(HICH)患者神经功能缺损及预后评估的价值。方法选择109例HICH患者,均行急诊软通道微创颅内血肿穿刺引流术,术后监测ICP,获得波幅(AMP)和压力波幅相关性指数(RAP);术前用ELISA法检测血清HSP47;收集患者临床资料。采用美国国立卫生研究院卒中量表评分对患者神经功能缺损进行评价,并将患者分为轻型组32例(<7分)、中型组48例(7~15分)、重型组29例(>15分);出院后6个月根据格拉斯哥预后评分将患者分为预后不良组(1~3分)44例、预后良好组(4~5分)65例。单因素与多因素Logistic回归分析HICH患者预后不良的影响因素;受试者工作特征曲线分析ICP参数联合血清HSP47预测HICH患者预后的价值。结果重型组AMP、RAP、血清HSP47水平高于中型组、轻型组(P均<0.05),中型组AMP、RAP、血清HSP47水平高于轻型组(P均<0.05)。单因素分析结果显示,预后不良组入院时格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分、出血量≥50 mL比例、术后再发脑出血比例、AMP、RAP、血清HSP47水平均高于预后良好组(P均<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,入院时GCS评分高、AMP高、RAP高、HSP47高是HICH患者预后不良的危险因素(P均<0.05)。AMP、RAP、HSP47预测HICH患者预后不良的曲线下面积分别为0.776、0.793、0.774,三者联合预测HICH患者预后不良的曲线下面积为0.920,高于单独预测(P均<0.05)。结论ICP参数AMP、RAP及血清HSP47水平升高与HICH患者神经功能缺损加重和不良预后有关,三者联合可提高对HICH患者预后的预测效能。

持续性非卧床腹膜透析患者血清及腹透液热休克蛋白47的表达及其与微炎症的关系

目的探讨持续性非卧床腹膜透析(CAPD)患者的血清及腹膜透析流出液中热休克蛋白47(HSP47)的表达水平及其与微炎症的关系。方法回顾性分析2018年6月至2020年2月在桂林医学院附属医院门诊规律随诊的50例CAPD患者(CAPD组)、13例血液透析(HD)患者(HD组)、12例慢性肾病(CKD)5期患者(CKD组)及10例健康体检者(健康组)临床资料,其中包括一般信息及超敏C反应蛋白(hs-CRP),检测空腹静脉血及夜间留腹腹透液标本中HSP47、转化生长因子β1蛋白(TGF-β1)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)等指标并进行分析与比较。结果与健康组比较,CAPD组、HD组中血清HSP47的水平较高(P<0.05),HD组血清TNF-α的水平较高(P<0.05)。与透析≤1年患者比较,透析>1年的CAPD患者血清IL-6、腹透液IL-6及hs-CRP的水平较高(P<0.05)。CAPD患者血清HSP47与hs-CRP呈正相关(r=0.568,P<0.001),与腹透液HSP47呈正相关(r=0.584,P<0.001)。腹透液HSP47与血清中HSP47、IL-6及hs-CRP等均呈正相关(r=0.584、0.360、0.373,P<0.001、0.031、0.028)。多因素分析提示hs-CRP、腹透液HSP47是血清HSP47的独立影响因素,hs-CRP是腹透液HSP47的独立影响因素。ROC曲线分析结果显示,血清HSP47预测CAPD患者微炎症状态的AUC为0.789(95%CI:0.612~0.911),截断值为516.65 pg/mL;腹透液HSP47预测CAPD患者微炎症状态的AUC为0.704(95%CI:0.520~0.849),截断值为640.69 pg/mL。结论CAPD患者体内存在微炎症状态。HSP47可以预测CAPD患者体内的微炎症状态。

热休克蛋白47(HSP47)-短发夹RNA的构建及其细胞水平对HSP47表达的影响

目的针对肝纤维化发病关键基因热休克蛋白47(HSP47)基因构建HSP47-shRNA,初步验证其在NIH/3T3细胞系干预HSP47基因的表达,影响HSP47 mRNA及蛋白水平表达,并观察该细胞功能学变化。方法设计HSP47-shRNA模板,并将其分别设计于U6启动子的下游引物,将U6启动子及其下游HSP47-shRNA的模板双链DNA连接入载体,构建HSP47-pGCsi-U6-shRNA重组质粒(HSP47-1-pGCsi-U6-shRNA、HSP47-2-pGCsi-U6-shRNA和HSP47-3-pGCsi-U6-shRNA)。以非相关干扰质粒作为对照,通过脂质体介导转染HSP47-shRNA至小鼠胚胎成纤维细胞(NIH/3T3)中,分别于12、24、48和72h在倒置荧光显微镜下观察细胞转染效率和荧光表达强度;同时于转染后0、24和48h收集细胞,采用RT-PCR和蛋白质印迹(Western blotting)分析HSP47 mRNA和蛋白表达情况;并观察干预后该细胞分泌胶原功能和小鼠转化生长因子(TGF-β1)表达的变化。结果成功构建HSP47-shRNA载体,通过脂质体介导转染入NIH/3T3细胞,各干扰质粒转染效率均约为60.0%,各干扰质粒转染效率间差异无统计学意义(P>0.05)。转染12 h,可见少量绿色荧光细胞,随转染时间的延长,细胞荧光表达量逐渐增加,各干扰质粒于转染72h荧光表达最强。shRNA干扰显著抑制HSP47蛋白的表达,以转染HSP47-1-shRNA 24h后对蛋白表达抑制效果最佳,对HSP47 mRNA的相对沉默效率为(25.83±1.79)%,与空白组及非相关对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。HSP47-1-shRNA转染24 h,I、III型胶原mRNA相对表达量分别下调为(56.52±1.64)%和(53.48±2.54)%,转染48 h分别下调为(54.17±2.63)%和(50.21±2.34)%,明显低于空白组和非相关对照组(P<0.05),但各实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。各组HSP47-shRNA干扰质粒对TGF-β1 mRNA的抑制效率以转染24 h效果最佳,相对表达分别为(63.23±2.18)%、(64.53±3.17)%和(75.19±4.20)%,均低于空白组和非相关对照组(P<0.01),但干预组间对TGF-β1的抑制率差异无统计学意义(P>0.05)。各HSP47-shRNA干扰质粒组细胞上清中TGF-β1的抑制率以转染24h为最佳,分别为(51.79±3.12)%、(66.67±2.13)%和(69.61±3.65)%,与空白组相比,HSP47-1-shRNA组与HSP47-2-shRNA组对TGF-β1均有显著抑制作用,且以HSP47-1-shRNA组抑制效率更佳(P<0.05),HSP47-3-shRNA组与空白对照组间差异则无统计学意义(P>0.05)。结论构建了HSP47-shRNA干扰质粒,初步证实其对HSP47的表达干预有效,并引起NIH/3T3细胞功能学的变化。

热休克蛋白47与特发性肺纤维化关系研究进展

特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)是一种慢性进行性纤维性间质性肺炎,其特征是进行性肺瘢痕形成和常见间质性肺炎的组织学表现。确诊IPF主要依靠临床病史、体格检查、实验室检查、肺功能、胸部高分辨率CT和组织病理学的结合,并且排除其它病因的间质性肺病^([1])。数据表明^([2]),IPF诊断后的中位生存期约为2~3年,男性发病多于女性,常见于老年人,尤其是75岁以后的患病率和发病率更高。

血清碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）及热休克蛋白47（HSP47）水平与房颤发病的相关性研究

目的：通过测定房颤患者血清bFGF及HSP47水平与房颤的相关性研究，探讨血清bFGF及HSP47水平在早期房颤患者中的作用及意义。方法：用酶联免疫法检测40例房颤患者的血清bFGF及HSP47的含量，其中持续性房颤及阵发性房颤各20例，另外选取20例窦性心律的健康者作为对照组，结果采用SPSS17．0软件进行统计学处理。结果：持续房颤组及阵发房颤组的血清bFGF及HSP47水平明显高于健康对照组（69．78±23．52μg／m3V828．05±2．41ng／mlvsl5．87±4．25ng／ml，150．3±29．10ng／mlVS109．23±8．18ng／mlvs64．42±18．65ng／ml，P〈0．01），且持续性房颤患者体内的血清bFGF及HSP47水平明显高于阵发性房颤组（69．78±23．52vs28．05±2．41，150．34±29．10vsl09．23±8．18，P〈0．01）。结论：房颤患者血清bFGF及HSP47水平上调且明显高于健康对照组，差异具有统计学意义（P〈0．01），bFGF及HSP47在房颤的发生和维持过程中可能发挥重要作用。

合浦珠母贝热休克蛋白hsp70基因的克隆与表达分析

采用同源克隆和RT-PCR技术对合浦珠母贝(Pinctada fucata)热休克蛋白hsp70基因进行了克隆和表达分析。获得cDNA全长序列2 365 bp,其中3’非编码区域(UTR)为318 bp,5’UTR为88 bp,开放阅读框(ORF)为1 959 bp,编码652个氨基酸,分子量约为71.39 kD,理论等电点为5.22,并含有3个HSP70家族的签名序列IDLGTTYS、DLGGGTFD和EEVD。同源性分析表明,合浦珠母贝HSP70的氨基酸序列与太平洋牡蛎(Crassostrea gigas)等双壳贝类的相似性高达86%以上,基于氨基酸序列的聚类分析表明,合浦珠母贝与牡蛎属种类亲缘关系最近。高温、高盐刺激后,半定量RT-PCR检测发现hsp70基因的表达明显增加,高温刺激的表达量高于高盐刺激,高温刺激组不同组织的表达量由大到小依次为鳃、消化腺、外套膜、肌肉、性腺,高盐刺激组不同组织的表达量由大到小依次为鳃、外套膜、肌肉、消化腺、性腺,表明HSP70参与了机体对刺激的应答过程。该基因的克隆为进一步深入研究合浦珠母贝的抗逆机理及其遗传改良奠定了重要基础。

热休克对H22细胞膜HSP70蛋白及其mRNA水平的影响

研究不同热休克条件对H22小鼠肝癌细胞的HSP70mRNA及蛋白表达的影响,以期获得最佳诱导条件.分别用MTT、RT-PCR、免疫荧光和FCM检测等方法观察不同热休克条件对鼠H22细胞的生存率、胞内HSP70mRNA转录水平及胞膜HSP70蛋白表达水平的改变.结果表明,H22细胞经轻度热休克(42～43℃),细胞生存率无影响,而中重度热休克(44～45℃)则随休克时间的延长,细胞生存率明显下降;42℃热休克初期(0.5～4小时)胞内HSP70mRNA水平低于对照组,休克后期(8～12小时)mRNA水平有所恢复并逐渐增高;不同时间热休克组H22细胞胞膜HSP70表达均较对照组显著增高(P<O.005),其中非致死性热休克以12小时表达最高,42℃为59.5%,43℃为96.8%.因此适当热休克条件可引起H22细胞HSP7OmRNA的改变及膜上HSP70蛋白表达的增加,从而增加肿瘤细胞的免疫原性.

温度刺激下栉孔扇贝不同组织热休克蛋白HSP70的表达研究

采用免疫印迹(Western blot)和流式细胞术(flow cytometry,FCM)方法,研究了热激栉孔扇贝不同组织内热休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)的表达变化.免疫印迹结果显示,HSP70的诱导表达有组织特异性,即热休克可以使扇贝鳃组织中HSP70的表达明显升高,但在肌柱、外套膜和性腺组织中,未检测到HSP70 的表达.流式细胞术结果表明:在不同的季节,相同的热刺激对扇贝血淋巴中HSP70的诱导表达存在差异.高温刺激后,栉孔扇贝血淋巴细胞中HSP70的表达量逐渐升高,在诱导7h时达到最高.

热休克蛋白65及其融合蛋白Hsp65-6×P277的分离纯化和稳定性研究(英文)

来源于牛分枝杆菌的热休克蛋白65(Hsp65)在没有佐剂的情况下可作为载体分子将抗原表位递呈给免疫系统。热休克蛋白具有蛋白酶的催化活性,容易发生自溶而降解,这制约了基于Hsp65疫苗的研究。该研究中,建立了纯化Hsp65及其融合蛋白Hsp65-6×P277(P277为来源于人热休克蛋白60的肽段,线性重复6次)的方法。Hsp65与Hsp65-6×P277以可溶形式表达于大肠杆菌。在低温及添加EDTA的条件下经细胞裂解、硫酸铵沉淀及阴离子交换树脂等纯化方法,可得到电泳纯的目的蛋白。用纯化的融合蛋白Hsp65-6×P277免疫小鼠,可激发机体产生强烈的免疫应答,该融合蛋白有希望作为免佐剂的糖尿病疫苗加以进一步研究开发。

昆虫热休克蛋白Hsp70的研究进展

热休克蛋白Hsp70诱导性显著,合成量多并具有高度的保守性。Hsp70表达于所有的活体细胞中。Hsp70具有分子伴侣、抗细胞凋亡功能,参与免疫反应、抗氧化功能,可以提高细胞对环境胁迫或伤害的耐受性。文章对Hsp70的特性以及其在昆虫学中的研究意义、研究现状及前景进行了综述。

模拟失重及再超重对猕猴腮腺组织热休克蛋白HSP70表达的影响

目的探讨模拟失重30 d及再超重对猕猴腮腺组织中热休克蛋白HSP70表达的影响。方法选用雄性猕猴23只,随机分为对照组(A组),失重(B组),超重+13 Gx/230s(C组),失重后再超重(D组,依据不同的+Gx强度和时间分为4个亚组:分别是+11 Gx/270s D1组、+13 Gx/230s D2组、+15 Gx/200s D3组、+13 Gx/230s后恢复9 d D4组)。通过HE染色观察腮腺组织形态学的变化,通过免疫组织化学染色及Western blot技术检测HSP70在腮腺中的表达。采用SPSS17.0对数据进行统计分析。结果对照组腮腺结构基本正常,实验组腮腺组织中可见不同程度的局灶性淋巴细胞浸润、腺泡细胞萎缩,导管扩张,血管扩张充血;对照组腮腺组织HSP70表达阴性,实验组腮腺组织HSP70表达阳性,随着+Gx强度的加大而表达增强的趋势。实验组(除D4组外)HSP70在蛋白水平的表达显著高于对照组(P<0.05)。结论模拟失重、超重环境可造成猕猴腮腺出现轻度病理变化,腮腺组织中HSP70表达显著增强。

热休克蛋白47在人肝癌癌周组织和大鼠胃溃疡组织中的表达和意义

目的 研究热休克蛋白 47(HSP47)在人肝癌癌周组织以及大鼠胃溃疡组织中的表达和分布 ,并讨论其意义。方法 采用免疫组织化学方法检测了 6例肝癌手术切除标本及乙酸诱导后不同时间大鼠胃溃疡组织标本内HSP47的表达和定位。结果 人肝癌包膜、癌旁肝纤维化纤维间隔内的纤维细胞以及在纤维间隔附近肝细胞周围的星状细胞表达HSP47蛋白。大鼠胃组织内成纤维细胞、血管内皮细胞以及平滑肌细胞均有HSP47蛋白的表达。溃疡基底肉芽组织内大量增生的成纤维细胞、小血管内皮细胞表现HSP47蛋白强阳性染色。结论 HSP47作为一种胶原特异的分子伴随 ,不仅参与纤维化 /硬化疾病的形成 。

热休克蛋白HSP90β在人胃癌组织及耐药细胞系中的表达

目的 了解热休克蛋白 HSP90 β在人胃癌组织及多药耐药细胞系中的表达 .方法 SABC免疫组化法 :70例胃癌组织 ,其中高分化腺癌 1 3例 ,中分化腺癌 32例 ,低分化腺癌1 8例 ,粘液癌 7例 (包括粘液腺癌和印戒细胞癌 ) .正常胃粘膜 1 7例 ,胃炎 2 3例及癌旁组织 35例作为对照 .组织切片用正常羊血清封闭后 ,加入一抗 (山羊抗人 HSP90 β多克隆抗体1∶ 2 0 0 ) ,4℃冰箱过夜 ;加二抗 (生物素化兔抗山羊 Ig G 1∶2 0 0 ) 37℃ 30 min;加 SABC-过氧化物酶复合物 (1∶ 1 0 0 ) ;DAB显色 .m RNA原位杂交方法 :探针变性后 ,加至组织块上 ,37℃杂交 48h;依次用 2× SSC,1× SSC,0 .5× SSC反复振洗 ,加碱性磷酸酶标记的抗 Dig抗体 ,NBT/ BCIP呈色 .结果 HSP90β主要分布于组织细胞的胞质 .在非癌胃粘膜HSP90 β为弱阳性表达 .正常胃粘膜组织、胃炎 (浅表性及萎缩性 )及癌旁组织 HSP90β的阳性表达率分别为 1 1 .8% ,1 3.0 %及 1 1 .4% ,各组之间无显著差异 (P>0 .0 5 ) .在胃癌组织中 HSP90 β的表达明显增强 ,阳性表达率明显增高 ,阳性率为 30 .0 % (P<0 .0 5 ) .其中在高、中、低分化腺癌及粘液腺癌中 HSP90 β的阳性率分别为 1 5 . 4% ,31 . 3% ,33. 3%及42 .9% . HSP90β的表达有随组织分化程度降低而增高?

热休克蛋白70(hsp70)基因对利什曼原虫中国分离株的系统发育分析

目的选用hsp70基因探讨我国各疫区不同宿主利什曼原虫的种系发育关系。方法采用PCR方法扩增分离自中国各疫区不同宿主的利什曼原虫之热休克蛋白70(hsp70)基因,将扩增的目的片段纯化后测序。使用MEGA 5.0软件对测序产物进行多序列比对并构建系统发育树,同时与国外利什曼原虫分离株的hsp70序列共同分析,观察利什曼原虫中国分离株在世界范围利什曼原虫的系统发育和分子进化中的地位。结果中国各流行疫区利什曼原虫均获得约1 300bp长度的hsp70基因片段,存在丰富的多态位点。中国23株利什曼原虫经hsp70基因分型聚集为四群,其中人来源的原虫分离株均在A群,为杜氏利什曼原虫(L.donovani),并分为杜氏利什曼原虫指名亚种(L.donovani)和杜氏利什曼原虫婴儿亚种(L.infantum)两个亚支;分离自新疆沙鼠或白蛉的6株利什曼原虫聚在B群,为都兰利什曼原虫(L.turanica);分离自新疆白蛉和内蒙古沙鼠的两株利什曼原虫为C群沙鼠利什曼原虫(L.gerbilli);分离自内蒙古蜥蜴和新疆白蛉的两株原虫为D群蜥蜴利什曼原虫(Sauroleishmania)。结论利什曼原虫中国分离株属于利什曼原虫亚属的不同种和蜥蜴利什曼原虫亚属,我国利什曼原虫分离株的种系发育复杂多样。

慢性肾脏病患者肾组织热休克蛋白47的表达及意义

目的探讨热休克蛋白47(Heatshockprotein47,HSP47)在慢性肾病患者肾组织中的表达及其与肾组织纤维化的关系。方法选择50例慢性肾脏病患者,根据肾组织纤维化程度积分为3组:轻度损害组20例,中度损害组15例,重度损害组15例。对照组5例,为肾肿瘤患者,取其切除肾脏远离肿瘤部分经病理检查结果正常的肾组织为对照研究对象。应用免疫组织化学方法检测4组受试对象肾组织中HSP47、Ⅳ型胶原(COL-Ⅳ)的表达,并将HSP47分别与肾脏纤维化损害程度、COL-Ⅳ、血清肌酐、内生肌酐清除率等进行相关分析。结果(1)在纤维化病变肾组织中,HSP47主要表达于病变区小管上皮细胞、肾间质细胞及肾小球内系膜细胞、上皮细胞内,且其表达量随肾脏纤维化程度加重而增加(P<0.01);(2)HSP47表达分别与COL-Ⅳ表达、肾组织纤维化积分、血清肌酐成正相关(P<0.01),与内生肌酐清除率成负相关(P<0.01)。结论随着慢性肾脏病患者纤维化病变程度加重,HSP47表达量逐渐增加,它可能通过促进胶原合成增加,参与肾脏纤维化的发生、发展。

热休克蛋白47在大鼠抗青光眼滤过术后滤过泡中的动态表达

背景抗青光眼滤过术后抗滤过泡的瘢痕化是眼科研究的热点和难点，研究已证实热休克蛋白47（HSP47）的表达上调与人体多个器官和组织胶原纤维的合成以及组织纤维化过程密切相关，但其与青光眼术后滤过泡的纤维化是否有关尚不清楚。目的探讨HSP47与大鼠抗青光眼滤过术后滤过泡组织纤维增生的关系。方法健康雄性SPF级Spargue—Dawley（SD）大鼠10只，所有大鼠右眼均行常规抗青光眼滤过手术，左眼为正常对照眼。应用随机数字法将术眼随机分为术后7d组和14d组，每组5只。术后每日在裂隙灯显微镜下观察滤过泡形态及眼前节情况。分别于术后7d和14d采用过量麻醉法处死大鼠，并制备正常对照眼结膜组织和手术眼术区组织标本，分别行苏木精-伊红染色和免疫组织化学染色，检测组织标本中胶原纤维的增生及HSP47在滤过泡中的表达情况，计算标本中HSP47阳性细胞数占总细胞数的百分比，即阳性细胞百分比。结果10只大鼠右眼术后均可见弥散隆起的结膜滤过泡，局部炎症反应轻微。苏木精一伊红染色结果表明，与正常对照眼结膜下组织比较，抗青光跟滤过术后术跟滤过泡组织中可见成纤维细胞增生，胶原纤维增多，呈疏松束状至致密束状排列。HSP47在SD大鼠正常对照眼结膜组织的成纤维细胞和血管内皮细胞的细胞质中可见棕黄色染色，而在滤过术后7d的滤过泡组织中，HSP47在阳性细胞中染色强度较正常对照组增强，HSP47阳性细胞百分比为（56．40±1．12）％，与正常对照组的（13．70±0．74）％相比，差异有统计学意义（P=0．000）；滤过术后14d时HSP47在滤过泡中的阳性细胞百分比为（23．90±0．76）％，与术后7d时比较，差异有统计学意义（P=0．000），但是仍高于正常对照组，差异有统计学意义（P=0．000）。结论SD大鼠抗青光眼滤过术后HSP47的表达量与滤过泡中成纤维细胞的活性相一致，提示HSP47在胶原合成过程中发挥作用。

栉孔扇贝热休克蛋白70(HSP70)基因的BAC-FISH定位

利用BAC-FISH技术,将包含HSP70基因的BAC克隆定位到栉孔扇贝的一对同源染色体的长臂上。HSP70基因的染色体定位将对深入研究该基因的结构及功能并将其应用于生产实践提供基础支持。同时,本研究是首次对栉孔扇贝低拷贝基因进行染色体定位的实践,其结果将为栉孔扇贝的染色体的深入研究以及染色体鉴别等工作提供必要的参考。