HTLV—I相关性脊髓病／热带痉挛性瘫痪病的研究进展

HTLV—I相关性脊髓病（HTLV—I associated myelopathy，HAM）／热带痉挛性瘫痪病（Tropical spastic paralysis disease，TSP）是人类T淋巴细胞病毒-I（Human T lymphotropic virus—I，HTLV—I）导致的一种慢性、进行性神经性疾病，表现为脊髓退行性病变。

Th17细胞及其效应分子IL-17在HAM/TSP患者体内的变化及Tax蛋白对IL-17的影响

目的研究Th17细胞及其效应分子IL-17在HTLV-Ι相关性脊髓病/热带痉挛性截瘫(HTLV-Ιassociated myelopsthy/tropical spastic paraparesis,HAM/TSP)患者中的变化及Tax蛋白对IL-17的影响。方法分别应用ELISA法和流式细胞技术检测HAM/TSP患者CSF上清液中的IL-17水平及外周血Th17细胞的百分率。应用RNAi干扰技术抑制Tax蛋白的表达,并用ELISA法检测干扰后细胞培养悬浮液中IL-17的表达。结果HAM/TSP患者脑脊液上清中IL-17含量(4.58±0.70)pg/mL较对照组(0.76±0.17)pg/mL显著升高(P<0.01);HAM/TSP患者外周血中Th17细胞的百分率(2.00%±0.64%)较对照组(0.41%±0.24%)显著升高(P<0.01)。RNAi技术干扰Tax蛋白表达后,IL-17水平(5.04±1.27)pg/mL较未干扰组细胞培养悬浮液中IL-17水平(7.69±2.11)pg/mL显著降低(P<0.05)。结论 Th17细胞及其效应分子IL-17在HAM/TSP患者体内显著提高,提示在其发病机制中发挥一定作用,而且IL-17的表达水平受Tax蛋白调控。

FQ-PCR同步检测HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ方法的建立及临床应用

目的:建立可同时检测HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ的双重荧光定量PCR(FQ-PCR)方法,并对所建体系进行方法学评价。方法:根据HTLV-Ⅰpol基因和HTLV-Ⅱtax基因的保守序列设计引物及TaqMan-LNA探针,构建重组质粒作为荧光定量PCR的标准品。优化荧光定量PCR反应条件,建立起可同时检测HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ的双重荧光定量PCR(FQ-PCR)的方法。结果:结果显示该方法对HTLV-Ⅰ及HTLV-Ⅱ的线性范围分别为108-102 copy/μl和107-10copy/μl;检测灵敏度分别为102copy/μl和10copy/μl。对阳性标本检测均呈阳性,对非目标菌检测均呈阴性。应用该方法对175例临床标本进行考核,有HTLV-Ⅰ阳性6例,HTLV-Ⅱ阳性3例,其中HTLV-Ⅰ和HTLV-Ⅱ双阳性2例。结论:本研究建立的双重FQ-PCR方法特异、快速、灵敏,对HTLV的血液筛查有重要意义。