NLRP3炎症小体在热应激损伤中的作用研究

目的:探讨NLRP3炎症小体在热应激损伤中的作用机制,并梳理NLRP3炎症小体和热应激损伤的相关性。方法:首先,选择2019年5月1日-2021年11月1日在南通大学附属医院就诊的90例6个月-6岁FS患儿作为热性惊厥组(FS组),将同一时间段的25例到我院正常体检的25例儿童作为正常对照组。抽取外周血2.5ml后在2500r/min的情况下离心15min,按照ELISA说明测定样品的浓度。构建FS的动物模型,选择20只SPF级2周龄的正常SD大鼠作为研究对象,通过热水浴诱导惊厥动物模型进行建模,取脑组织RIPA裂解液进行蛋白裂解,温度为4℃,12000g离心15min,取上清液借助BCA法进行定量分析。将大鼠分为FS组和FS+NLRP3炎症小体抑制剂组,分析NLRP3炎症小体在热应激损伤的保护作用及相关性。结果:研究结果表明,热性惊厥组细胞上清的IL-1β、ASC、NLRP3、Caspase-1mRNA明显升高,且在与正常对照组的数据对比中具有统计学差异(P<0.05);复杂性热性惊厥患儿的IL-1β含量是最高的。在大鼠试验当中,经过PCR检测,FS组的ASC、NLRP3、Caspase-1mRNA、IL-1β基因表达水平相较于对照组明显升高。在动物保护实验当中,FS组相较于对照组,IL-1β的分泌水平增加,且具有统计学差异(P<0.05)。结论:经过试验研究表明,NLRP3炎症小体会参与到热应激损伤的反应,抑制了NLRP3炎症小体可以提高LPS复合热损伤大鼠的生存时间,NLRP3炎症小体的激活与IL-1β有着密切的关系。

持续热应激状态下肉鸡心脏和肾脏组织损伤与hsp_(60) mRNA转录

为研究环境胁迫条件下热休克蛋白60 mRNA(hsp60mRNA)转录水平和应激性损伤的关系,将30日龄AA肉鸡的饲养环境温度从(22±1)℃突然升高到(37±1)℃分别热应激1、2、3、5和10 h后剖杀,利用临床血液病理学、组织病理学和荧光定量PCR方法,观察热应激不同时间对肉鸡重要器官心脏和肾脏组织损伤及其hsp60mRNA表达水平的影响。结果显示,持续热应激处理后的肉鸡血液肌酸激酶(CK)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)均显著升高,CK在2、3、5和10 h与对照组(无热应激)差异极显著(P<0.01),ALT在3 h与对照组差异显著(P<0.05),在5 h和10 h差异极显著(P<0.01);持续热应激处理2 h后的肉鸡心脏和肾脏组织均呈现出不同程度的以颗粒变性和水泡变性为主要特征的病理性损伤;心脏和肾脏组织中hsp60mRNA转录水平在热应激2 h时显著高于对照组(P<0.05),而在5、10h逐渐恢复正常。提示:hsp60mRNA转录水平与其相应蛋白的表达和肉鸡组织的热应激损伤存在一定程度的关联性。

桂花提取物对雄性果蝇抗氧化及抗衰老作用的研究

研究桂花提取物对雄性果蝇体内抗氧化及应激状态下抗衰老的作用。乙醇提取桂花,减压浓缩后得桂花醇提物,收集2 d龄雄性果蝇成虫,随机分为对照组、桂花提取物剂量组(2.5、5、10、15 mg/mL)共5组,进行雄性果蝇的生存实验和应激实验,测定平均寿命、最高寿命绘制生存曲线及体内蛋白质,超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(catalase,CAT)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)等抗氧化酶活力活性。桂花提取物10、15 mg/mL剂量能极显著延长雄性果蝇的寿命(P<0.01);15 mg/mL能显著提高45 d龄果蝇体内血清总蛋白(total protein,TP)含量(P<0.05);10、15 mg/mL剂量组能显著增加25 d龄果蝇体内CAT活性(P<0.05),所有剂量组能极显著增加45 d龄果蝇体内CAT活性(P<0.01);5 mg/mL能显著降低25 d龄果蝇体内MDA含量(P<0.05),10、15 mg/mL剂量组能极显著降低25 d龄果蝇体内MDA含量(P<0.01),10 mg/mL剂量组能显著降低45 d龄果蝇体内MDA含量(P<0.05),15 mg/mL剂量组能极显著降低45 d龄果蝇体内MDA含量(P<0.01);5、10、15 mg/mL剂量组能极显著增加25 d龄和45 d龄果蝇体内SOD活性(P<0.01)。桂花提取物可以提高SOD、CAT等抗氧化应激酶活性,可以缓解机体衰老引起的氧化应激产生的自由基对机体的损伤,具有延长寿命的作用。