水稻种子室温贮藏最适含水量及其热稳定蛋白的研究

【目的】通过使用在不同气候区室温保存8年的两个不同类型水稻品种,测定水稻室温贮藏的最适含水量,以及在贮藏过程中种子中的热稳定蛋白的变化。【方法】通过发芽试验和热稳定蛋白的测定,比较贮藏8年后种子的发芽率、活力指数和热稳定蛋白的变化。【结果】在北京地区贮藏种子,籼稻桂早2号(Oryza sativa L.ssp.indica Kato)最适种子含水量为5.5%～6.0%,而粳稻幸实(Oryza sativa L.ssp.japonica Kato)为6.5%～7.0%。在南昌地区,籼稻最适种子含水量为4.5%左右,而粳稻为5.5%～6.0%。耐超干的籼稻品种桂早2号种子中有一条分子量为39.4 kD的特异性蛋白条带,而不耐超干的粳稻品种幸实却没有这条带。当桂早2号种子发芽率为零时,该特异性热稳定蛋白条带消失。在分子量为41.6 kD处,桂早2号和幸实品种间的热稳定蛋白电泳图谱也存在差异。当幸实种子发芽率降至零时,该热稳定蛋白条带消失。【结论】在同一地区室温贮藏条件下,其最适含水量水平粳稻幸实高于籼稻桂早2号。而对于在不同气候地区贮藏,其最适含水量水平随该地区年平均温度和大于0℃积温升高而降低。发现的两类热稳定蛋白可能与水稻种子耐脱水性及其种子活力丧失有关。

不同水稻品种种子耐超干性差异及其热稳定蛋白的研究

以不同水稻品种 (籼稻、粳稻、杂交稻等 )为材料 ,研究了品种之间种子耐超干能力的差异及其与热稳定蛋白的关系。结果表明 ,供试的粳稻品种 (春江 15和春江 6 83)不耐超干 ,当含水量降低至 4.5 %以下 ,种子发芽率和活力指数极显著下降 ,而籼稻品种 (J10 6和 J174)耐超干能力强 ,含水量降低至 3.5 %以下对种子发芽率和活力指数没有影响 ,杂交稻 (汕优 6 3)和中香糯介于两者之间。耐超干的品种存在一特异性的热稳定蛋白条带 ,其分子量为 36 .3k D,而不耐超干的品种种子无此条带 。

超干燥处理对豌豆种子抗氧化系统酶及热稳定蛋白的影响

将含水量为12·2%,11·3%,8%,5%,4%,3%的碗豆种子置于50℃干燥箱中人工老化,定期测定老化种子生活力和活力指标,抗氧化系统酶活性及热稳定蛋白。结果表明:与对照相比,含水量4%和3%超干燥种子的活力指数、根干样质量显著下降,而含水量8%,5%的种子活力指数、发芽率和根干样质量没有出现明显下降。POD活性和CAT活性与种子的发芽率、活力呈正相关,当老化处理6个月后,含水量3%和4%的POD活性和CAT活性低于对照,但含水量5%和8%的高于对照。超干燥种子中没有发现新的热稳定蛋白谱带,但含水量为8%和5%的种子其热稳定蛋白质的含量增加。

渗透胁迫下水杨酸对玉米幼苗根系63.5kD热稳定蛋白的调控作用

以抗旱性较强的玉米品种‘鲁单50’幼苗为材料,采用等渗的离子胁迫(0.8%NaCl,-0.6 MPa)和非离子胁迫(20%PEG)进行渗透胁迫处理,从受胁迫的玉米幼苗根系中分离出63.5 kD热稳定蛋白。用水杨酸(SA)处理幼苗96 h,取材进行SDS-PAGE电泳,发现63.5 kD热稳定蛋白既可被渗透胁迫诱导,也可被SA诱导产生,且SA对非离子渗透胁迫和离子渗透胁迫下诱导的该蛋白的表达表现出不同的作用,SA对非离子渗透胁迫下该蛋白的表达有抑制作用,而对离子渗透胁迫下该蛋白的表达有促进作用。SA对非离子渗透胁迫或离子渗透胁迫+ABA处理下的该蛋白的表达都表现出促进作用。研究表明,63.5 kD热稳定蛋白受SA信号途径的调控,并且在不同条件下,SA在参与和影响代谢过程的信号途径及其对代谢调控的机理可能存在差异。

渗透胁迫下ABA及Ca^(2+)/CaM信使系统对玉米幼苗根系63.5kD热稳定蛋白的调控作用

以玉米 (Zeamays)鲁单 5 0幼苗为实验材料 ,采用等渗的离子胁迫 (0 8%NaCl - 0 6MPa)和非离子胁迫 (2 0 %PEG)模拟渗透胁迫处理 ,从受胁迫的玉米幼苗根系中分离出 6 3 5kD热稳定蛋白。用ABA、Ca2 + 、Ca2 + 螯合剂EGTA、CaM抑制剂TFP处理幼苗 ,96h后取材进行SDS PAGE电泳。结果表明 ,该蛋白既可被渗透胁迫 ,也可被ABA诱导产生 ,且两者同时处理时 ,该蛋白的表达量更大 ;Ca2 + 促进该蛋白的表达 ;Ca2 + 螯合剂EGTA对该蛋白的表达有抑制作用 ;CaM抑制剂TFP对该蛋白的表达也有抑制作用 ,且高浓度TFP对非离子胁迫下的作用比离子胁迫时明显。说明 6 3 5kD热稳定蛋白受Ca2 + CaM信号传导途径的调控。

大麦发芽过程中热稳定蛋白质的变化及部分生化特性

大麦中的热稳定蛋白质具有独特的生理生化特性,对大麦品质有重要影响,而且其耐热性具有潜在的商业价值。本文建立了热稳定蛋白的提取和分析方法,对其在大麦发芽过程中的变化规律及部分生化特性进行了研究和阐述。结果表明,种子中热稳定蛋白含量在发芽过程中先降后升,在焙焦后下降,且总量呈减少趋势。麦芽中热稳定蛋白分子质量主要分布在约40 ku和10 ku两个区域;具有对内蛋白水解酶的稳定性;且其中某些组分能够抑制外源蛋白酶活性。

高温胁迫对大白菜抗氧化系统酶及可溶性蛋白质和热稳定蛋白质的影响

在智能人工气候培养柜中,耐热性不同的大白菜幼苗在36℃/29℃和40℃/29℃(昼/夜)下分别进行高温胁迫处理10 d,定期测定抗氧化系统酶活性以及可溶性蛋白和热稳定蛋白含量。结果表明:在不同高温处理下,大白菜的SOD和POD活性均呈升高趋势;CAT活性在36℃处理时呈现先升高后下降的变化,在40℃处理时呈下降趋势;而可溶性蛋白质含量表现为先下降后上升;热稳定蛋白含量呈下降趋势,且恢复处理后没有明显的回升,并且不同品种的含量差异不明显。耐热品种的SOD、POD、CAT活性和可溶性蛋白含量总体高于热敏品种。

不同红麻种子耐老化性差异及热稳定蛋白的研究

利用10份红麻品种为材料,研究红麻种子在人工老化过程中耐老化差异及其与热稳定蛋白的关系。结果表明:(1)随着老化处理程度加深,10份红麻品种种子的发芽率、发芽指数及活力指数均逐渐下降,但品种之间有显著差异;(2)热稳定蛋白含量随着老化处理的加深呈现上升的趋势,通过SDS-PAGE电泳显示,辽55在140h老化处理中出现一条差异带,分子量为62.8kD,其他9个品种各个处理间未出现差异带。10份红麻品种在老化过程中,辽55最耐老化,在辽55中发现的热稳定蛋白可能与红麻品种的耐老化性及种子活力的丧失有关。

离子强度和pH对大麦中热稳定蛋白稳定性的影响

大麦中的热稳定蛋白对啤酒的非生物稳定性以及啤酒的冷浑浊都有着重要的影响。本实验利用考马斯亮蓝法(Bradford法)和SDS-PAGE电泳技术对pH和离子强度改变后的大麦中的热稳定蛋白的稳定性进行了研究,结果发现,pH及离子强度对热稳定蛋白的稳定性均有较大的影响,碱性环境比酸性环境对蛋白质的稳定性影响大;离子强度与热稳定蛋白稳定性之间成负相关;随着离子价态的升高,蛋白质稳定性随着降低。本研究为热稳定蛋白特性的研究提供可靠的参数,同时为啤酒生产有针对性的改进提供参考。

不同蛋白质含量的同品种大麦中热稳定蛋白质及泡沫蛋白质的变化

利用Bradford法和SDS-PAGE电泳技术进行分析,直观地比较了不同蛋白质含量的同品种大麦中热稳定蛋白质与萌发过程中泡沫蛋白质的含量及组成。结果显示,大麦中热稳定蛋白质含量与大麦总蛋白质含量呈正相关,同品种大麦在热稳定蛋白质及泡沫蛋白质含量上虽然存在差异,但其蛋白质组成基本相同;在发芽过程中,高蛋白质含量大麦中的泡沫蛋白质含量略高于低蛋白质含量的大麦。此实验数据及方法可为评估大麦以及预测麦芽和啤酒泡沫的品质提供借鉴。

不同品种大麦热稳定蛋白——蛋白质Z与LTP蛋白耐热温度的研究

大麦中的热稳定蛋白对麦芽以及成品啤酒的质量有着重要的作用和影响。实验利用考马斯亮蓝法(Bradford法)和SDS-PAGE电泳技术对大麦中的热稳定蛋白的耐热性进行了研究,结果发现,4种大麦的热稳定蛋白在115℃时组分含量明显下降,其蛋白质Z近乎消失,LTP含量小幅下降。该研究为热稳定蛋白特性的研究提供了可靠参数,为热稳定蛋白在啤酒生产中的应用提供了参考。

花生种子耐脱水力的获得与热稳定蛋白的关系

花生（ＡｒａｃｈｉｓｈｙｐｏｇａｅａＬ．）种子的耐脱水能力在果针入土后４５ｄ以后的胚胎发育期逐渐增加，与一组９～１５．５ｋＤ低分子量热稳定蛋白的丰富表达有关。缓慢干燥可以诱导不耐脱水的果针入土后２５ｄ及３５ｄ花生胚获得耐脱水能力并同时诱导胚轴表达这组热稳定蛋白。成熟脱水促进花生胚耐脱水能力的获得，并增加了花生球蛋白的热稳定性。

家蝇幼虫血淋巴蛋白组及血淋巴中热稳定蛋白研究

目的初步研究家蝇幼虫血淋巴蛋白组学特征及其中的热稳定蛋白。方法使用破壁法提取三龄幼虫血淋巴原液,设置全血淋巴组、沸水浴处理组,采用不同pH范围双向电泳胶条,分析血淋巴中蛋白的pH、分子量分布特点,采用二级质谱对蛋白点进行分子鉴定。结果家蝇幼虫血淋巴中蛋白的分子量主要分布在10kDa～66kDa之间,采用pH3～10的IPG胶,检测到286个蛋白点,采用pH4～7的IPG胶,测到601个蛋白点;血淋巴经沸水浴处理后,检测到41个蛋白点,分子量低于30kDa,比未处理组减少了93.1%,对其中11个蛋白点进行质谱分析,鉴定出4个功能蛋白,包括存储蛋白、气味结合蛋白、铁蛋白重链样蛋白和铁蛋白2轻链蛋白同系物。结论双向电泳能很好地分析家蝇幼虫血淋巴中的蛋白,血淋巴中的蛋白等电点主要分布在pH4～7之间;血淋巴经沸水浴处理后可去掉大量变性蛋白,其上清中可能包含耐热性较好的功能蛋白。

国产主要东北大麦和华东大麦热稳定蛋白的比较

大麦热稳定蛋白的含量及组成对啤酒泡沫的形成和稳定均具有重要的作用。利用Bradford法和SDS-PAGE电泳技术对国产东北大麦和华东大麦发芽过程中热稳定蛋白的含量及组成进行了分析和比较,结果显示,两地区间大麦的热稳定蛋白含量及组成存在明显差异,为改良国产大麦的种植及蛋白构成提供借鉴。

响应面优化大麦中热稳定蛋白质的提取条件

利用响应面分析法考察缓冲液提取大麦热稳定蛋白的浸提时间、液料比和浸提温度对大麦中热稳定蛋白含量的影响。通过试验数据分析得到,其最佳浸提温度为20.126℃,液料比为6.437:1(mL/g),浸提时间为119.326min,此时通过缓冲液提取得到的热稳定蛋白含量为2.189mg/g。

大麦热稳定蛋白质的品种间差异研究

酿造大麦热稳定蛋白的含量和组成对麦芽及啤酒品质具有重要影响。文中采用优化的蛋白提取方法,使用Bradford法和SDS-PAGE定量分析和比较了不同产地的3个品种大麦在发芽过程中热稳定蛋白的总体含量、蛋白质Z和LTP1(Lipid Transport Protein)的相对含量及变化情况。热稳定蛋白含量在发芽过程中总体呈下降趋势,存在品种间的明显差异,2种国产大麦波动较大,且二者LTP1含量较高,蛋白质Z含量低。以上结果解释了国产和进口大麦间品质差距的部分原因,表明国产大麦的蛋白构成有待优化。

PLC/PLD抑制剂对盐胁迫下玉米幼苗根系新的69.5kD热稳定蛋白表达调控的影响

逆境蛋白在植物抵抗逆境胁迫中具有重要作用。广泛存在于植物中的磷脂酶(PhospholipaseC/D ,PLC/PLD)是一种逆境信号传递物质,在逆境蛋白的诱导表达中具有重要意义。该文探讨了不同胁迫及PLC/PLD抑制剂处理后一种新发现的6 9.5kD热稳定蛋白的表达情况,为进一步研究PLC/PLD在逆境蛋白表达中的作用机理提供依据。以玉米(Zeamays)‘鲁单90 0 2’幼苗为材料,用2 70mmol·L-1NaCl胁迫处理,然后进行SDS_PAGE (Sodiumdo decylsulfate_Polyacrylamidegelelectrophoresis)电泳,从受胁迫的玉米幼苗根系中分离出一种新的6 9.5kD热稳定蛋白,其表达量随胁迫时间的延长逐渐增加。该蛋白在恢复正常条件后仍然表达,表明其可能是一种胁迫适应性蛋白;2 0 μmol·L-1ABA处理也能引起该蛋白的表达,但表达量远低于同期的2 70mmol·L-1NaCl胁迫处理。NaCl+ABA处理后该蛋白表达量低于NaCl处理,但高于ABA处理。PLC/PLD抑制剂硫酸新霉素(Neomycinsulfate,NS)和正丁醇(n_Butylalcohol,BA)对NaCl、ABA和NaCl+ABA诱导的6 9.5kD热稳定蛋白表达均有明显的抑制作用,且对ABA和NaCl+ABA两个处理蛋白表达的抑制作用均随抑制剂浓度升高或处理时间延长而逐渐增强,但对NaCl处理蛋白表达的抑制作用则表现出复杂性。结果表明,不同处理诱导6 9.

种子热稳定蛋白的研究进展

植物种子中含有大量热稳定蛋白,这类蛋白质包含了LEA蛋白、蛋白酶抑制剂、甜蛋白和热激蛋白等重要的蛋白组分。热稳定蛋白的结构和功能研究揭示了这些蛋白成分与种子胁迫耐性密切相关。对种子热稳定蛋白的深入研究将进一步揭示这些蛋白在种子发育过程和抵御环境胁迫的作用机理,其应用研究对改良作物品质、提高种子和植物体对逆境胁迫的耐性及相关食品加工业具有重要意义。现综述与种子热稳定蛋白的类型和相关机理及应用研究进展。

萌发中花生胚轴的耐干性与热稳定蛋白

成熟花生种子吸胀１８ ｈ 发芽率达１００ ％ 。在这１８ ｈ 的范围内，胚轴即使经干燥处理，萌发生长率仍保持１００ ％ ，而热稳定蛋白含量变化很小。吸胀２４ ｈ 后，经干燥的花生胚完全丧失萌发生长能力。ＳＤＳＰＡＧＥ和双向电泳表明，花生胚轴的热稳定蛋白主要是贮藏蛋白，该蛋白中的花生球蛋白大亚基，伴花生球蛋白Ｉ和２Ｓ 蛋白的降解与胚轴的耐干性丧失有关。

利用热稳定蛋白特异条带鉴别籼粳稻的方法研究

以85份栽培稻为材料,利用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和蛋白免疫印迹技术分析籼稻和粳稻热稳定蛋白的表达差异,探讨利用特异蛋白来建立籼粳稻的鉴别方法。结果表明,在籼粳稻品种之间存在热稳定蛋白的差异表达,尤其在分子量约42～47kD范围。其中45.2kD条带(BandⅠ)和46.5kD(BandⅡ)条带为典型粳稻特异蛋白(Os03g0168100)的标志带,42.0kD条带(BandⅢ)为典型籼稻特异蛋白(OsI_10172)的标志带。以这3条带作为鉴别方法,并与程氏指数法进行比较,典型籼稻和粳稻的一致度分别为80.0%和86.4%,表明热稳定蛋白标志带法在一定程度上可用于鉴别典型的籼稻和粳稻。