高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定洋葱中的硫化丙烯和烯丙基硫醚

该研究建立了高效液相色谱-二极管阵列检测器法测定洋葱中的硫化丙烯和烯丙基硫醚方法。样品中加入丁硫醇后经乙腈提取,用无水硫酸钠吸收多余的水分后离心,用Thermo Hypersil GOLD液相色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈和水为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,进样量为10μL,高效液相色谱-二极管阵列检测器检测范围为190~400 nm,检测波长为200 nm。硫化丙烯和烯丙基硫醚在1~100μg/mL质量浓度内线性相关系数R为0.99997~0.99998,方法检出限为0.5 mg/kg,定量限为1.5 mg/kg,5、10、15μg/mL 3个浓度加标水平的回收率为96%~103%,相对标准偏差分别为0.28%~0.49%。该方法前处理简单,科学性、准确性、重现性、精密性好,适用于洋葱中硫化丙烯和烯丙基硫醚分析检测。

二烯丙基硫醚对大鼠脑缺血再灌注损伤后Nrf2、NQO1表达的影响

目的探讨二烯丙基硫醚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后Nrf2、NQO1表达的影响。方法实验动物随机分为假手术组、缺血再灌注组、200mg/kg二烯丙基硫醚预处理组。采用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型,缺血2h再灌注24h后进行神经行为学评分,测定脑梗死体积及脑组织中SOD、MDA活性,采用免疫荧光和Western Blot测定Nrf2、NQO1蛋白分子的表达。结果与缺血再灌注组相比,大鼠经二烯丙基硫醚预处理后神经损害症状减轻,脑梗死体积缩小,SOD活性增强,同时MDA活性受到抑制,Nrf2、NQO1蛋白分子表达上调。结论二烯丙基硫醚对大鼠脑缺血再灌注损伤具有一定的神经保护作用,可能与其增强大鼠脑组织抗氧化酶活性和激活Nrf2/NQO1通路有关。

二烯丙基硫醚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用和治疗时间窗

目的:研究二烯丙基硫醚(Diallyl sulfide,DAS)对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用和治疗时间窗。方法:DAS的保护作用研究,采用线栓法制备大鼠大脑中动脉阻断(Middle cerebral artery occlusion,MCAO)局灶性脑缺血模型,分别在造模前7 d采用腹腔注射法连续给予DAS 25、50、100、200 mg/kg,制备MCAO模型,缺血2 h,再灌注24 h,评价大鼠神经功能状态、脑水肿、脑梗死面积;DAS的治疗时间窗研究,采用MCAO局灶性脑缺血再灌注模型,分别在缺血1 h、再灌注损伤后2、4、6h腹腔注射DAS 50 mg/kg,缺血2 h,再灌注24 h,评价神经功能状态、脑水肿和脑梗死面积模型。结果:DAS 50 mg/kg,能最大程度的改善大鼠脑缺血再灌注后神经功能评分,减轻脑水肿和减少脑梗死面积;缺血后1 h开始用药,神经功能缺损评分明显减少,脑水肿及脑梗死面积也明显下降,再灌注2、4 h后给药,疗效下降,6 h给药,则无明显作用。结论:DAS对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤有保护作用,有效时间窗在缺血后1 h到再灌注损伤后2 h内。

水介质中Sm/CdCl_2体系促进下烯丙基硫醚、烯丙基硒醚的合成

烯丙基溴在Sm/CdCl_2体系促进下,在THF/H_2O_2介质中与二硫醚和二硒醚反应,合成烯丙基硫醚、烯丙基硒醚.该合成法反应条件温和,操作简便,并且有较高的产率.

二烯丙基硫醚铂（Ⅱ）络合物的合成与分析

以二烯丙基硫醚为原料合成组成为Pt[S(CH2CH=CH2)2]2Cl2的二烯丙基硫醚铁（Ⅱ）络合物，并对其进行红外光谱、紫外光谱、质谱和核磁共振分析。推测此络合物与顺铂的结构相似，为顺式平面四方构型。

含水介质中铟促进的烯丙基硫醚的合成

在THF/H_2O介质中,金属铟促进下,烯丙基溴与烷基硫代硫酸钠反应,合成烯丙基硫醚。该方法合成硫醚具有较高得率,操作简便,反应条件温和。

锡促进的烯丙基硒醚和烯丙基硫醚的合成

在金属锡促进下，烯丙基溴与二硒醚或二硫醚反应，生成烯丙基硒醚或烯丙基硫醚。

二烯丙基硫醚化合物的合成

二烯丙基一硫醚 ( DS) ,二烯丙基二硫醚 ( DDS) ,二烯丙基三硫醚 ( DTS)和二烯丙基四硫醚 ( DTTS)等是大蒜提取液中的主要有效成分 ,具有十分广泛独特的生理药理活性。作者以甲酸、丙三醇为起始原料合成了这些化合物 ,烯丙基硫醚化合物总含量达 83% ,其中 DDS,DTS含量分别达 30 %。产物均 GC-MS鉴定确证。合成方法简单 ,原料易得 ,反应步骤少 。

通过烯丙基碲盐合成烯丙基硫醚的新方法

近年来,有机碲试剂在有机合成中的应用愈来愈引起人们的关注。其中有机碲叶立德作为一类十分有用的碲试剂能够与羰基化合物反应得到α,β—不饱和化合物。由于 Te——C键键能小且极化度高,直接用碲盐与羰基化合物作用也得到了α,β——不饱和化合物。烯丙基碲叶立德与醛作用得到了环氧化合物,而烯丙基碲叶立德的前体——烯丙基碲盐。

二烯丙基硫醚对睡眠剥夺大鼠认知功能的影响

目的:观察二烯丙基硫醚(DAS)对睡眠剥夺(SD)模型大鼠认知功能的影响。方法:取40只SD大鼠随机分为4组(每组10只),对照(Control)组、睡眠剥夺(SD)组、DAS对照(DAS)组和DAS干预(DAS+SD)组,其中SD组和DAS+SD组大鼠用改良多平台水环境法制备SD大鼠模型,DAS组和DAS+SD组从SD前4 d开始每天腹腔注射DAS 200 mg/kg直至SD结束,其余组大鼠给予相同剂量二甲基亚砜。在3天的SD后,进行旷场实验、光辐射热甩尾实验及氧化应激指标生化检测实验。结果:①旷场实验中,SD组大鼠的穿格次数与中央格停留时间[(58.67±17.81)次,(1.34±1.08)min]均高于Control组[(43.60±8.87)次,(0.37±0.45)min](P<0.05),而DAS+SD组的各项指标[(37.25±18.09)次,(0.33±0.21)min]相比SD组呈逆转(P<0.05);②光辐射热甩尾实验中,4组大鼠的甩尾反应潜伏期(TFL)均呈现随光刺激强度增强而缩短的时反应量-效关系(TDRR,P<0.05),其中SD组大鼠的TDRR曲线较Control组左移(P<0.05),DAS+SD组较SD组右移(P<0.05),且在光强度23、31、61时SD组的TFL较Control组缩短(P<0.05),DAS+SD组较SD组延长(P<0.05);③氧化应激指标生化检测实验中,SD组的大鼠脑组织丙二醛(MDA)含量[(23.57±5.68)μmol/mg]较Control组[(18.99±2.72)μmol/mg]增加(P<0.05),DAS+SD组[(18.04±5.53)μmol/mg]较SD组减少(P<0.05)。结论:DAS干预可能通过降低脑组织氧化应激水平对SD大鼠认知功能的损害有一定程度的缓解作用。

二烯丙基硫醚通过靶向抑制CYP2E1对相关疾病治疗的潜在作用

细胞色素P450 2E1(cytochrome P450 2E1,CYP2E1)是一种能够代谢内源性或外源性物质的细胞色素P450酶,主要位于内质网上,参与类固醇、脂肪酸、前列腺素和药物、致癌物质和环境污染物等外源性化学物质的氧化代谢。在酒精性肝病、非酒精性肝病、心血管疾病、艾滋病、糖尿病、帕金森综合征等疾病的病理进程中,CYP2E1的表达水平升高,产生活性氧(reactive oxygen species,ROS),引起氧化应激、DNA、蛋白质和脂质的失活,进而造成体内重要器官损伤,因此可以通过靶向抑制CYP2E1进而治疗多种疾病的。二烯丙基硫醚(diallyl sulfide,DAS)是大蒜中的一种有效成分,后发现可作为CYP2E1的选择性抑制剂,可以通过抑制CYP2E1,降低ROS、氧化应激的产生,细胞的凋亡。本文主要综述DAS靶向抑制CYP2E1对相关疾病治疗的潜在作用。

二烯丙基硫醚的研究进展

二烯丙基二硫醚是大蒜素的有效成分。综述了大蒜素的提取和制备合成方法,即生物提取法和化学合成法,并介绍了生物提取法中的水蒸气蒸馏法、溶剂萃取法、超临界CO2萃取法等。提出生物提取法提取大蒜素成本高、转化率低;化学合成法合成大蒜素,制取率为87%~93%,得到的大蒜素粉剂有效成分纯度高,药效显著,价格低廉,建议采用化学合成法合成大蒜。

二烯丙基二硫醚对过氧化氢诱导的湖羊瘤胃上皮细胞氧化应激的缓解作用

本试验旨在探究二烯丙基二硫醚(DADS)对过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的湖羊瘤胃上皮细胞(RECs)自由基的清除能力及其对瘤胃上皮细胞氧化应激的保护作用。分别使用不同浓度(0、50、100、150、200、250μmol/L)的H_(2)O_(2)和不同浓度(0、25、50、75、100、150、200μmol/L)的DADS处理湖羊瘤胃上皮细胞24 h,使用CCK-8法检测细胞活力,荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS)含量,筛选构建湖羊瘤胃上皮细胞氧化应激模型的适宜H_(2)O_(2)浓度和DADS安全浓度范围。随后先用不同浓度(0、25、75、150μmol/L)的DADS预处理湖羊瘤胃上皮细胞2 h,对其进行保护,再使用200μmol/L H_(2)O_(2)处理湖羊瘤胃上皮细胞24 h,检测细胞活力以及细胞内ROS含量,采用试剂盒法检测细胞内总抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量及过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)活性,并采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测SOD、CAT和GPX的mRNA相对表达量。结果显示:与空白对照组(H_(2)O_(2)浓度为0μmol/L)相比,200μmol/L的H_(2)O_(2)可显著降低湖羊瘤胃上皮细胞活力(P<0.05),显著增加细胞内ROS含量(P<0.05),成功诱导湖羊瘤胃上皮细胞氧化应激。与空白对照组(DADS浓度为0μmol/L)相比,25~150μmol/L的DADS不会对湖羊瘤胃上皮细胞活力产生显著影响(P>0.05)。与空白对照组(H_(2)O_(2)和DADS浓度均为0μmol/L)相比,200μmol/L的H_(2)O_(2)显著降低细胞活力(P<0.05),显著增加细胞内ROS和MDA含量(P<0.05),显著降低T-AOC和SOD活性与mRNA相对表达量(P<0.05);与氧化应激模型组(经200μmol/L H_(2)O_(2)诱导)相比,使用75、150μmol/L DADS预处理湖羊瘤胃上皮细胞可显著降低细胞内ROS和MDA含量(P<0.05),显著增加T-AOC和SOD活性与mRNA相对表达量(P<0.05)。综上所述,适量的DADS可有效缓解H_(2)O_(2)诱导的湖羊瘤胃上皮细胞氧化应激。

气相色谱法测定保健食品中二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚

建立检测保健食品中二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚含量的气相色谱分析方法。将样品用正己烷溶解,稀释定容后,用0.22μm滤膜过滤,采用气相色谱法进行测定。以岛津SH-1色谱柱(30 m×0.32 mm,0.25μm)作为分析柱,样口温度、检测器温度均为210℃,以氮气为载气,流量为1 mL/min,分流比为10∶1,进样体积为1μL;升温程序:初始温度为100℃,保持5 min,以20℃/min升至180℃,保持13 min,利用外标法得到各化合物相对含量。经升温程序优化后,二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚保留时间分别提前至3 min和7 min且分离度达到要求。采用方法学考察进行分析,结果表明二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚的质量浓度在0.5~2.5 mg/mL范围内与色谱峰面积线性关系良好,相关系数分别为0.998和0.9999,加标回收率为95.5%~105.3%,二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚测定值的相对标准偏差分别为1.1%、1.3%(n=6)。该方法操作简单,适用于保健食品中二烯丙基二硫醚和二烯丙基三硫醚含量的测定。

二烯丙基硫醚对小鼠肝癌合并肝纤维化的干预效果

目的探讨二烯丙基硫醚(diallyl sulfide,DAS)对二乙基亚硝胺(diethylnitrosamine,DEN)和四氯化碳(carbon tetrachloride,CCl4)诱导的小鼠肝癌合并肝纤维化的干预效果。方法 14日龄雄性ICR小鼠随机分为4组:正常对照组、模型组(DEN+CCl4)、DAS低剂量干预组和DAS高剂量干预组,每组15只。除对照组外,小鼠出生第14天时腹腔注射DEN(25 mg/kg)诱发小鼠肝癌;小鼠出生6周时,每周腹腔注射CCl4(1 ml/kg)2次,持续给予14周诱发肝纤维化。DAS低和高剂量干预组在腹腔注射CCl4前2小时分别灌胃DAS(20或40 mg/kg),每天1次,连续给药16周。检测血清丙氨酸氨基转移酶(Alanine transaminase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate transaminase,AST)、γ-谷氨酰转肽酶(Gammaglutamyl transferase,GGT)的活力和甲胎蛋白(alpha-fetoprotein,AFP)的含量,比较各组小鼠肝脏系数、肝脏表面癌结节数目,并对肝脏进行病理组织学检查及天狼猩红染色。结果与正常对照组相比,模型组小鼠肝脏系数明显增加,血清ALT、AST、GGT的活力升高(P<0.05),AFP含量显著增加(P<0.05);与模型组相比,DAS干预组小鼠各项指标均明显改善(P<0.05)。DAS干预后肝脏系数明显降低、肝脏表面增生癌结节数目明显减少(P<0.05)。其中高剂量干预组小鼠肝脏表面癌结节数目和血清中AFP含量显著低于低剂量干预组(P<0.05)。HE染色和天狼猩红染色结果表明,与模型组相比,DAS低、高剂量干预组小鼠肝组织切片中肿瘤区减少、细胞核异型性降低,肝纤维化明显减轻。结论 DAS的干预显著抑制了DEN和CCl4诱发的小鼠肝癌合并肝纤维化的进展。

二烯丙基硫醚拮抗微囊藻毒素-LR致细胞凋亡

目的探讨二烯丙基硫醚(DAS)对微囊藻毒素-LR(MCLR)诱导的细胞凋亡及活性氧产生的影响。方法体外培养人肝癌细胞株HT17,用1μmol/L MCLR染毒的同时给予DAS(0.02～2 mmol/L)作用4、24h,同时设立溶剂对照组、DAS对照组和单纯MCLR染毒组。应用四甲基偶氮噻唑蓝法检测细胞存活率,流式细胞术检测细胞凋亡,采用荧光探针2-[6-(4'-羟基)苯氧基-3H-占吨醇-3-on-9-yl]-苯甲酸检测细胞内活性氧水平。结果 0.2和2 mmol/LDAS干预组细胞存活率分别为(80.91±5.25)%,(90.13±4.47)%,高于MCLR染毒组的(69.50±3.03)%,差异有统计学意义(P<0.05);而0.2和2 mmol/L DAS干预组细胞凋亡率分别为(10.87±0.52)%,(8.52±0.55)%,低于MCLR染毒组的(13.29±1.16)%,差异有统计学意义(P<0.05);0.2和2 mmol/L DAS干预组的活性氧水平明显下降(P<0.05)。结论 DAS可拮抗MCLR诱导的活性氧产生及细胞凋亡。

二烯丙基硫醚对微囊藻毒素LR致细胞毒性及DNA损伤的影响

目的研究大蒜主要活性成分之一的二烯丙基硫醚(diallyl sulfide,DAS)对微囊藻毒素LR(MCLR)诱导的细胞毒性和氧化性DNA损伤的影响。方法体外培养人肝癌细胞株HT17,用1μmol/L MCLR染毒的同时给予DAS(0.02～2 mmol/L)作用24 h,同时设立未处理对照组、单纯MCLR染毒组和单纯DAS处理组。测定乳酸脱氢酶(LDH)漏出率来反映细胞毒性,并应用免疫酶染色法检测8-羟基脱氧鸟嘌呤核苷(8-OHdG)水平。结果单纯MCLR染毒组的LDH漏出率和8-OHdG染色强度明显高于未处理对照组。0.2 mmol/L以上的DAS与MCLR联合处理细胞时,LDH漏出率和8-OHdG染色强度明显低于单纯MCLR染毒组。结论 DAS可能对MCLR诱导的细胞毒性和氧化性DNA损伤具有保护作用。

HPLC法测定大蒜油胶丸中二烯丙基三硫醚的含量

目的 建立HPLC测定大蒜油胶丸中主要有效成份二烯丙基三硫醚的方法。方法 采用HPLC法 ,spherisorbODS柱(2 5 0mm× 4.6mmBFitting) ,流动相乙腈 -水 -四氢呋喃 (7∶2 7∶3) ,检测波长 2 40nm ,流速 0 .7ml/min。结果 在检测范围内 ,二烯丙基三硫醚的线性关系良好 ,回归方程为Y =0 .0 12 5X +2 .8886 ,r为 0 .9997,回收率平均为 99.6 5 % ,RSD为 1.78% (n =8)。

HPLC法测定大蒜素胶囊中二烯丙基三硫醚的含量

目的:用高效液相色谱法测定大蒜素胶囊中的二烯丙基三硫醚的含量。方法:以kromasil C18为色谱柱;甲醇-水-甲酸(85:15:0．1)为流动相;流速0．8 ml·min-1;紫外检测波长252 nm。结果:二烯丙基三硫醚的浓度在0．22～7．62μg·ml-1范围内与峰面积呈良好线性关系,r=0．999 8;平均加样回收率为105．7％,RSD为5．4％;最低检出限为:0．2μg·ml-1。结论:本法快速、准确、灵敏,有利于实现对大蒜素胶囊的质量监控。

气相色谱法测定腌制大蒜中二烯丙基三硫醚和二烯丙基二硫醚

建立腌制大蒜中二烯丙基三硫醚(DATS)和二烯丙基二硫醚(DADS)的气相色谱测定法。样品经前处理后,用DB-1701毛细管色谱柱(30 m×0.25 mm×0.25μm)分离,FID检测器检测。在优化的色谱条件下,DATS和DADS分离度好,DATS在416.8μg/mL^8.335 mg/mL浓度范围内,DADS在256.6μg/mL^5.132 mg/mL浓度范围内均呈良好的线性;DATS和DADS的检出限分别为0.0055mg/kg和0.0051 mg/kg;两者的回收率分别为97.9%~105.1%和98.1%~112.5%;相对标准偏差(RSD,n=6)分别为1.24%和2.13%。该方法准确可靠,重现性好,适用于大蒜中大蒜素含量的测定。