响应面法优化烯丙醇酮乙酸酯水解酶的产酶条件

采用响应面方法对一株能够选择性水解(R)-烯丙醇酮乙酸酯的菌株的发酵产酶培养基进行了优化。首先考察了不同碳、氮源的影响,在此基础上通过Plackett-Burman设计法对发酵培养基主要因子进行筛选,确定主要影响因子为橄榄油的质量浓度,黄豆饼的质量浓度和K2HPO4的质量浓度。用最陡爬坡实验逼近以上三因素最优水平,并用中心组合设计以及响应面分析确定主要影响因子的最佳浓度。在优化培养条件下,发酵液中酶产量从94U/L提高到了358U/L,增加了281%。

不动杆菌生物合成新型羧酸酯酶的摇瓶培养条件优化

对一株产(R)-烯丙醇酮乙酸酯对映选择性水解酶的不动杆菌(Acinetobactersp.CGMCC0789)摇瓶发酵产酶条件进行了优化。培养基最佳组成为(g?L?1):蔗糖8.5,吐温-801.5,黄豆饼粉20.0,(NH4)2SO42.0,K2HPO42.0,NaCl1.0,MgSO4·7H2O0.2;优化后酯酶产量提高了8.3倍(由46增至427U?L?1)。添加吐温-80可以诱导酶的合成。摇瓶培养最佳条件为:装液量15%,发酵起始pH8.0,接种量6%,发酵温度30℃。考察了细胞生长及产酶的时间进程,最佳培养时间为30h.