目的研究烯脂酰辅酶A水合酶短链1(Enoyl-coenzyme A hydratase short chain 1,ECHS1)对胆管癌细胞Warburg效应的影响以及对人胆管癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法本研究分为实验组及对照组,实验组:干扰ECHS1基因;对照组:ECHS1未干扰;采用...目的研究烯脂酰辅酶A水合酶短链1(Enoyl-coenzyme A hydratase short chain 1,ECHS1)对胆管癌细胞Warburg效应的影响以及对人胆管癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法本研究分为实验组及对照组,实验组:干扰ECHS1基因;对照组:ECHS1未干扰;采用酶标仪测定ECHS1对胆管癌QBC939糖酵解代谢的影响;采用免疫组化法检测糖酵解代谢关键酶PKM2表达水平变化,分析ECHS1对胆管癌Warburg效应的影响;同时将构建的含siECHS1-siRNA的质粒转染人胆管癌细胞QBC939,建立裸鼠皮下移植瘤模型。观察siRNA干扰ECHS1表达对胆管癌细胞QBC939裸鼠移植瘤生长的影响。结果酶标仪测定显示,实验组胆管癌细胞QBC939对葡萄糖的吸收较对照组明显减少,实验组胆管癌细胞QBC939乳酸生成降低,差异均有统计学意义(P<0.05);免疫组化法检测结果表明,较对照组而言,干扰ECHS1可降低实验组胆管癌QBC939细胞中PKM2的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。抑制ECHS1表达可减小实验组裸鼠皮下肿瘤大小(P<0.05)。结论ECHS1通过调控PKM2蛋白表达影响胆管癌QBC939细胞Warburg效应,同时抑制胆管癌的增殖。展开更多
目的研究肝细胞癌(HCC)组织中能量代谢相关酶的表达及对肝癌细胞侵袭能力的影响,探讨烯酰辅酶A水合酶短链1(ECHS1)、AMP蛋白激酶(AMPK)、脂肪合成酶(FAS)、乙酰CoA羧化酶(ACC)等相关酶及低糖环境在HCC发生发展过程中的作用。方法选取解...目的研究肝细胞癌(HCC)组织中能量代谢相关酶的表达及对肝癌细胞侵袭能力的影响,探讨烯酰辅酶A水合酶短链1(ECHS1)、AMP蛋白激酶(AMPK)、脂肪合成酶(FAS)、乙酰CoA羧化酶(ACC)等相关酶及低糖环境在HCC发生发展过程中的作用。方法选取解放军第一七五医院2015年6月-2016年6月经手术切除的32例HCC患者肝癌及癌旁组织,通过免疫组化技术,检测不同分化程度肝癌及癌旁组织中能量代谢过程中关键酶FAS、ACC及AMPK等表达情况。构建两组肝癌细胞株,对照组:转染空白对照质粒的肝癌细胞Huh7-plv、HepG2-PU6;实验组:转染小干扰RNA(siRNA)的肝癌细胞株Huh7-siECHS1、HepG2-siECHS1。应用Transwell小室实验观察ECHS1及低糖培养和加入表皮生长因子(EGF)等不同营养条件对肝癌细胞侵袭能力的影响。计量资料组间比较采用t检验;计数资料组间比较采用χ~2检验。结果免疫组化结果显示,肝癌细胞中ACC、AMPKβ表达高于癌旁组织,差异均有统计学意义(21/11 vs 7/25,χ~2=12.44,P<0.05;31/1 vs 26/6,χ~2=4.68,P<0.05)。Transwell小室实验结果显示,在正常营养条件(Huh7-plv-N、HepG2-PU6-N)及加入EGF的正常营养条件(Huh7-plv-N-EGF、HepG2-PU6-NEGF)的肝癌细胞侵袭数均明显大于相应干扰ECHS1后(Huh7-siECHS1-N、HepG2-siECHS1-N、Huh7-siECHS1-N-EGF、HepG2-siECHS1-N-EGF)的侵袭细胞数(t值分别为6.93、6.51、7.55、4.93,P值均<0.05);低糖培养环境(Huh7-plvLowGlu、HepG2-PU6-LowGlu)及加入EGF的低糖培养环境(Huh7-plv-LowGlu-EGF、HepG2-PU6-LowGlu-EGF)的肝癌细胞侵袭数亦大于相应干扰ECHS1后(Huh7-siECHS1-LowGlu、HepG2-siECHS1-LowGlu、Huh7-siECHS1-LowGlu-EGF、HepG2-siECHS1-LowGlu-EGF)的侵袭细胞数,差异均有统计学意义(t值分别为9.52、5.80、20.52、8.80,P值均<0.05)。表明不同营养条件下,干扰ECHS1后肝癌细胞Huh7、HepG2的侵袭能力均明显降低。此外,加入EGF后(Huh7-plv-N-EGF、HepG2-PU6-N-EGF)与正常营养条件(Huh7-plv-N、HepG2-PU6-N)相比,穿透小室的细胞数明显增多(t值分别为4.44、3.17,P值均<0.05);而低糖条件下(Huh7-plv-LowGlu、HepG2-PU6-LowGlu)与正常营养环境相比,发生侵袭的细胞数有所增加,但差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论 ECHS1、EGF可明显增强肝癌细胞侵袭转移能力,低糖饥饿条件亦可对肝癌细胞侵袭能力起到一定促进作用。展开更多
目的探讨烯脂酰辅酶A水合酶短链1(enoyl-coenzyme A hydratase,short chain1,ECHS1)和细胞增殖核抗原Ki-67在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法选择2013年1月至2016年12月秦皇岛市第一医院肿瘤科收治的50例结直肠癌...目的探讨烯脂酰辅酶A水合酶短链1(enoyl-coenzyme A hydratase,short chain1,ECHS1)和细胞增殖核抗原Ki-67在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法选择2013年1月至2016年12月秦皇岛市第一医院肿瘤科收治的50例结直肠癌患者手术切除的组织标本,以10例癌旁组织作为对照,采用免疫组织化学SP法检测结直肠癌组织及癌旁组织中ECHS1和Ki-67的表达,并分析其与临床病理学特征的关系。结果 ECHS1和Ki-67在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为56.0%(28/50)和62.0%(31/50),均显著高于癌旁组织中的表达,差异有显著性(P<0.05)。ECHS1和Ki-67的异常表达与结直肠癌的Dukes分期、分化程度及有无淋巴转移有关(P<0.05)。ECHS1和Ki-67的表达呈正相关关系(r=0.501,P=0.010)。结论在结直肠癌组织中ECHS1和Ki-67的表达明显升高,与Dukes分期、分化程度和淋巴转移有关,且二者具有协同作用。展开更多
文摘目的研究烯脂酰辅酶A水合酶短链1(Enoyl-coenzyme A hydratase short chain 1,ECHS1)对胆管癌细胞Warburg效应的影响以及对人胆管癌裸鼠移植瘤生长的影响。方法本研究分为实验组及对照组,实验组:干扰ECHS1基因;对照组:ECHS1未干扰;采用酶标仪测定ECHS1对胆管癌QBC939糖酵解代谢的影响;采用免疫组化法检测糖酵解代谢关键酶PKM2表达水平变化,分析ECHS1对胆管癌Warburg效应的影响;同时将构建的含siECHS1-siRNA的质粒转染人胆管癌细胞QBC939,建立裸鼠皮下移植瘤模型。观察siRNA干扰ECHS1表达对胆管癌细胞QBC939裸鼠移植瘤生长的影响。结果酶标仪测定显示,实验组胆管癌细胞QBC939对葡萄糖的吸收较对照组明显减少,实验组胆管癌细胞QBC939乳酸生成降低,差异均有统计学意义(P<0.05);免疫组化法检测结果表明,较对照组而言,干扰ECHS1可降低实验组胆管癌QBC939细胞中PKM2的表达,差异有统计学意义(P<0.05)。抑制ECHS1表达可减小实验组裸鼠皮下肿瘤大小(P<0.05)。结论ECHS1通过调控PKM2蛋白表达影响胆管癌QBC939细胞Warburg效应,同时抑制胆管癌的增殖。
文摘目的研究肝细胞癌(HCC)组织中能量代谢相关酶的表达及对肝癌细胞侵袭能力的影响,探讨烯酰辅酶A水合酶短链1(ECHS1)、AMP蛋白激酶(AMPK)、脂肪合成酶(FAS)、乙酰CoA羧化酶(ACC)等相关酶及低糖环境在HCC发生发展过程中的作用。方法选取解放军第一七五医院2015年6月-2016年6月经手术切除的32例HCC患者肝癌及癌旁组织,通过免疫组化技术,检测不同分化程度肝癌及癌旁组织中能量代谢过程中关键酶FAS、ACC及AMPK等表达情况。构建两组肝癌细胞株,对照组:转染空白对照质粒的肝癌细胞Huh7-plv、HepG2-PU6;实验组:转染小干扰RNA(siRNA)的肝癌细胞株Huh7-siECHS1、HepG2-siECHS1。应用Transwell小室实验观察ECHS1及低糖培养和加入表皮生长因子(EGF)等不同营养条件对肝癌细胞侵袭能力的影响。计量资料组间比较采用t检验;计数资料组间比较采用χ~2检验。结果免疫组化结果显示,肝癌细胞中ACC、AMPKβ表达高于癌旁组织,差异均有统计学意义(21/11 vs 7/25,χ~2=12.44,P<0.05;31/1 vs 26/6,χ~2=4.68,P<0.05)。Transwell小室实验结果显示,在正常营养条件(Huh7-plv-N、HepG2-PU6-N)及加入EGF的正常营养条件(Huh7-plv-N-EGF、HepG2-PU6-NEGF)的肝癌细胞侵袭数均明显大于相应干扰ECHS1后(Huh7-siECHS1-N、HepG2-siECHS1-N、Huh7-siECHS1-N-EGF、HepG2-siECHS1-N-EGF)的侵袭细胞数(t值分别为6.93、6.51、7.55、4.93,P值均<0.05);低糖培养环境(Huh7-plvLowGlu、HepG2-PU6-LowGlu)及加入EGF的低糖培养环境(Huh7-plv-LowGlu-EGF、HepG2-PU6-LowGlu-EGF)的肝癌细胞侵袭数亦大于相应干扰ECHS1后(Huh7-siECHS1-LowGlu、HepG2-siECHS1-LowGlu、Huh7-siECHS1-LowGlu-EGF、HepG2-siECHS1-LowGlu-EGF)的侵袭细胞数,差异均有统计学意义(t值分别为9.52、5.80、20.52、8.80,P值均<0.05)。表明不同营养条件下,干扰ECHS1后肝癌细胞Huh7、HepG2的侵袭能力均明显降低。此外,加入EGF后(Huh7-plv-N-EGF、HepG2-PU6-N-EGF)与正常营养条件(Huh7-plv-N、HepG2-PU6-N)相比,穿透小室的细胞数明显增多(t值分别为4.44、3.17,P值均<0.05);而低糖条件下(Huh7-plv-LowGlu、HepG2-PU6-LowGlu)与正常营养环境相比,发生侵袭的细胞数有所增加,但差异均无统计学意义(P值均>0.05)。结论 ECHS1、EGF可明显增强肝癌细胞侵袭转移能力,低糖饥饿条件亦可对肝癌细胞侵袭能力起到一定促进作用。
文摘目的探讨烯脂酰辅酶A水合酶短链1(enoyl-coenzyme A hydratase,short chain1,ECHS1)和细胞增殖核抗原Ki-67在结直肠癌组织中的表达及其与临床病理特征的关系。方法选择2013年1月至2016年12月秦皇岛市第一医院肿瘤科收治的50例结直肠癌患者手术切除的组织标本,以10例癌旁组织作为对照,采用免疫组织化学SP法检测结直肠癌组织及癌旁组织中ECHS1和Ki-67的表达,并分析其与临床病理学特征的关系。结果 ECHS1和Ki-67在结直肠癌组织中的阳性表达率分别为56.0%(28/50)和62.0%(31/50),均显著高于癌旁组织中的表达,差异有显著性(P<0.05)。ECHS1和Ki-67的异常表达与结直肠癌的Dukes分期、分化程度及有无淋巴转移有关(P<0.05)。ECHS1和Ki-67的表达呈正相关关系(r=0.501,P=0.010)。结论在结直肠癌组织中ECHS1和Ki-67的表达明显升高,与Dukes分期、分化程度和淋巴转移有关,且二者具有协同作用。
