慢性间歇性缺氧调控mTOR-自噬信号致小鼠焦虑和抑郁样行为机制研究

目的研究慢性间歇性缺氧(CIH)对小鼠焦虑和抑郁样行为的影响及可能机制。方法14只8周龄C57BL/6雄性小鼠随机分为对照组(Ctrl组)和CIH组。通过悬尾实验评价小鼠抑郁状态,通过旷场实验评价小鼠基本运动功能和焦虑状态。Western blot检测小鼠海马区中mTOR、p-mTOR、Atg7、p62、NLRP3、NLRP1等自噬相关蛋白及神经炎症水平。结果与Ctrl组比较,CIH组小鼠在旷场实验中运动距离(t=6.377,P<0.001)、运动速度(t=6.362,P<0.001)、穿线次数(t=6.131,P<0.001)、中央区域时间降低(t=9.295,P<0.001),而悬尾实验中不动时间增加(t=4.684,P<0.001),海马区NLRP3(t=15.320,P<0.001)、p-mTOR蛋白(t=5.076,P<0.05)表达水平增加,Atg7蛋白(t=3.511,P<0.05)表达水平降低,而前额叶皮层中上述蛋白均无变化。结论CIH通过激活小鼠海马区mTOR信号,引起海马区自噬水平降低、NLRP3炎性小体累积,最终导致小鼠出现焦虑和抑郁样行为。

电针通过调节小鼠腹外侧眶皮层中谷氨酸能神经元缓解神经病理性疼痛诱发的焦虑和抑郁样行为

目的:探讨电针“阳陵泉”“悬钟”能否缓解神经病理性疼痛诱发的焦虑和抑郁样行为,以及其机制是否与腹外侧眶皮层(VLO)中谷氨酸能神经元有关。方法:用腓总神经结扎(CPNL)法建立神经病理性疼痛小鼠模型。选取“阳陵泉”“悬钟”进行电针干预,每次15 min,每日1次,共7 d。VLO注射rAAVVGLUT1-CRE-WPREs和rAAV-Ef1a-DIO-hM3Dq-mCherry-WPREs或rAAV-Ef1a-DIO-hM4Di-mCherry-WPREs化学遗传病毒,腹腔注射氯氮平-N-氧化物(CNO)以特异调节VLO中谷氨酸能神经元的活动水平。使用足底触觉测痛仪和足底热痛觉测痛仪分别检测小鼠的机械缩足阈值(MWT)和热缩足潜伏期(PWL);通过旷场、高架十字迷宫、强迫游泳及悬尾等行为学实验检测小鼠的焦虑和抑郁样行为;免疫荧光染色法观察神经元激活与抑制水平。结果:与假手术组相比,CPNL组小鼠术后第3天的MWT和PWL显著降低(P<0.001),一直持续到第28天;与假手术组相比,CPNL组小鼠旷场实验中央区域停留时间显著减少(P<0.001),高架十字迷宫实验进入开臂次数和进入开臂时间显著减少(P<0.01,P<0.05),强迫游泳实验和悬尾实验不动时间显著增加(P<0.01,P<0.05);与CPNL组相比,CPNL+电针组小鼠焦虑和抑郁样行为均减轻(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。与激活病毒+盐水组相比,激活病毒+CNO组小鼠的焦虑和抑郁样行为均减轻(P<0.05,P<0.01)。与抑制病毒+电针+盐水组相比,抑制病毒+电针+CNO组小鼠的焦虑和抑郁样行为均较严重(P<0.001,P<0.01,P<0.05)。结论:电针“阳陵泉”“悬钟”可能通过激活VLO中谷氨酸能神经元缓解神经病理性疼痛诱发的焦虑和抑郁样行为。