焦锑酸钾沉淀法定位Ca^(2+)在梨生理研究中的应用

介绍了应用焦锑酸钾沉淀法定位Ca2＋的方法，以及在梨生理研究中的具体步骤和应用效果。结果表明：在固定液中加焦锑酸钾处理进行制样，梨树不同器官或组织细胞中的自由态Ca2＋，都能生成焦锑酸钙在原部位沉淀，经染色后在电子显微镜下呈现出黑色颗粒，而固定液中不加焦锑酸钾处理的则没有这种颗粒。再进一步用Ca2＋的专一性鳌合物EGTA进行处理，检查这些黑色颗粒是否消失，以证实黑色颗粒就是Ca2＋，从而可对Ca2＋进行定位标记。在不同的组织细胞及同一组织细胞在不同的生理时期，其被标记的Ca2＋密度和场所是不同的，可通过其动态变化来探讨它的作用机理。还对用此方法定位Ca2＋的注意事项进行了讨论。

原子吸收分光光度法测定焦锑酸钾中锑含量

比较详细地研究用火焰原子吸收分光光度法测定焦锑酸钾中锑含量的技术条件和测定方法。

用焦锑酸钾技术研究玉米叶片中的钙

应用改良的焦锑酸钾沉淀技术,研究了玉米叶绿体钙的亚细胞定位和缺钙对玉米叶片细胞结构的影响,结果表明,在玉米两种叶绿体的被膜、片层结构和基质中均有锑酸钙沉淀存在,其中的基粒类囊体和基质类囊体具有较高的钙水平.研究结果还表明,缺钙会引起玉米叶片维管束鞘细胞、筛管分子、伴胞和叶肉细胞内与膜结合的钙离子释放出来,呈不规则的锑酸钙沉淀散布在细胞内,同时使细胞的内膜结构(如内质网、液泡等)遭到破坏而解体,随着缺钙程度的加深,叶绿体的片层结构开始解体.这说明钙对叶绿体的功能和维持细胞膜结构的完整性起着重要的作用.

焦锑酸钾沉淀法在百合花柱钙分布研究中的应用

以百合为试材，研究了焦锑酸钾沉淀法用于定位百合花柱钙分布的条件和效果及固定液的pH值对固定效果的影响。结果表明：焦锑酸钾沉淀法准确稳定，样品经含焦锑酸钾的固定液处理后钙沉淀颗粒非常明显，易于识别；而固定液中未添加焦锑酸钾的对照中则不存在黑色钙沉淀颗粒；固定液pH为7．0～7．6时细胞结构清晰度较pH为6．8好．该范围内不同的pH值对固定效果的影响不是很明显。

利用焦锑酸钾沉淀法和电镜—能谱技术研究失血心肌细胞内Ca^（2＋）的分布

利用焦锑酸钾沉淀法和电镜－能谱技术研究失血心肌细胞内的Ｃａ（２＋）的分布。结果表明：在失血心肌细胞的线粒体和内质网内的Ｃａ（２＋）明显增多。这一结果对探讨失血肌细胞损伤机理具有一定意义。

烟草花药发育过程中钙动态分布的初步观察

在烟草花药发育过程中,用焦锑酸钾沉淀的松弛结合钙显示出了一个与花药发育事态有关的动态:在孢原细胞时期的花药中几乎看不到钙颗粒.但到小孢子母细胞时期,花药中开始有钙颗粒沉淀,而且显示出向花药室中流动的迹象.当花粉母细胞进行减数分裂时,花药绒毡层细胞和花粉母细胞中出现了许多的细小钙颗粒.在小孢子发育时期,在绒毡层细胞解体之前,细胞中的钙被集中到小液泡中.在小孢子细胞质中仍有较多的钙颗粒,同时在花粉壁上也有钙颗粒沉积在外壁的基部.到小孢子分裂形成二胞花粉后,细胞质中的钙明显减少.当二胞花粉中的大液泡消失,细胞质中积累淀粉粒以后,花粉中可看到的钙颗粒很少.同时,在花药维管束周围的薄壁细胞中,又出现了较多的钙颗粒,表明花粉对钙离子的需求可能已降低.烟草花药发育过程中钙的动态分布特征暗示着钙参与了调控花粉发育过程,尤其是与小孢子转变过程中的重要事态有密切关系.

烟草花粉萌发和花粉管生长期间柱头和花柱中的钙分布

烟草柱头表面有两层覆盖物,其中含有少量细 小的钙颗粒。花粉落到柱头上后,储存在花粉外壁中 的钙被释放到覆盖层中。当花粉管穿过覆盖层长入柱 头细胞之间时,花粉管顶端的细胞壁中出现了大量的 细小钙颗粒。开花后22 h观察时,在花柱引导组织中 形成了钙的梯度分布:花柱上部引导组织中的钙较少, 而下部连接子房处的花柱引导组织中含有较多的钙颗 粒。去雄花开花后1d时,花柱上部引导组织中的钙明 显增多;3d时,连柱头细胞中也出现了较多的钙颗粒。 讨论了烟草花柱引导组织中钙梯度分布和花粉管生长 的关系。

水稻胞质雄性不育系珍汕97A及其保持系珍汕97B绒毡层发育过程中的Ca^(2+)分布变化

利用焦锑酸钾沉淀法研究了野败不育系珍汕97A及其保持系珍汕97B绒毡层细胞的发育过程及其细胞中Ca2+的分布变化。研究发现保持系绒毡层细胞在单核花粉晚期才开始迅速解体,而不育系绒毡层细胞在花粉母细胞时期就开始出现核膜、细胞膜解体,此过程持续到二核花粉时期。珍汕97A绒毡层细胞从花粉母细胞时期开始,细胞质内有少量颗粒状的Ca2+沉淀;减数分裂时期,绒毡层细胞的内切向壁表面有大量大颗粒的Ca2+沉淀;单核花粉时期绒毡层细胞周围集聚一层Ca2+沉淀。而保持系绒毡层细胞遮花粉母细胞时期和减数分裂时期细胞内没有Ca2+沉淀;单核花粉时期绒毡层细胞内的Ca2+沉淀主要分布在解体的细胞质内。推测绒毡层细胞结构发育的异常和Ca2+的异常分布可能与花粉的败育有关。

不同类型水稻不育系药隔发育过程中Ca^(2+)的分布变化

采用焦锑酸钾沉淀法研究了不同类型水稻不育系与其相应保持系及其可育花药药隔发育过程中Ca2+的分布变化.结果显示在正常花药的发育过程中,药隔中的Ca2+呈以下变化规律:(1)花药发育早期药隔中的Ca2+沉淀很少;(2)随着花药的发育,药隔中的Ca2+沉淀增加,木质部细胞的次生加厚壁上有较多的Ca2+沉淀,连接组织中的Ca2+沉淀也大大增加;(3)到了花粉内容物充实后期及成熟花粉时期,药隔中的Ca2+又略有减少.而不育花药药隔中的Ca2+在花药发育的各时期均比可育花药要多.败育类型不同,药隔中出现大量Ca2+沉淀的时期也不同,无花粉型不育系在花粉母细胞时期药隔中就有大量Ca2+沉淀,而农垦58S从单核花粉时期药隔中才出现大量Ca2+沉淀.实验结果表明:Ca2+在不同类型的不育水稻中呈现出一定的规律性变化,药隔中Ca2+的异常分布可能与水稻花粉的败育有关.

肉鸡腹水综合征患鸡右心组织钙沉积和Ca^(2+)-ATPase活性变化

右心肥大衰竭是腹水综合征患鸡发病的重要环节之一,而心肌细胞内Ca2+浓度在调节心脏收缩和舒张功能及其生长方面都起着重要作用。本试验应用右心导管法测定AS患鸡右心压力变化情况,采用焦锑酸钾沉淀法、电镜酶细胞化学法研究AS患鸡右心组织Ca2+和钙泵(Ca2+-ATPase)活性变化及其精确定位。结果显示AS组肉鸡右心室舒张压极显著高于对照组(P<0.01),同时,右心室内压最大变化速率也极显著降低(P<0.01);对照组肉鸡右心组织偶见少量散在的Ca2+沉淀颗粒,低温诱发AS患鸡右心组织发生了明显的钙沉积;对照组肉鸡的右心组织Ca2+-ATPase以高电子密度颗粒分布于肌浆网、线粒体膜等处,AS患鸡心脏组织的Ca2+-ATPase的电子密度颗粒显著减少或缺失。本研究揭示,在低温条件下AS患鸡具有明显的右心舒张功能障碍,Ca2+浓度增高和Ca2+-ATPase功能抑制可能在其中起着重要作用。

热胁迫对辣椒花药发育过程中Ca^(2+)分布的影响

运用焦锑酸钾沉淀法 ,研究了不同热胁迫时间对辣椒 (Capsicum annuum L .)小孢子发生和花粉发育过程中 Ca2 +分布的影响。在小孢子母细胞中 ,细胞表面有少量 Ca2 +分布 ,细胞核中基本上观察不到 Ca2 + ,热胁迫 12 h后 ,细胞质和细胞核中 Ca2 +明显增多 ,液泡膜内侧也有许多 Ca2 +分布 ,热胁迫 2 4 h后 ,大量的 Ca2 +分布在细胞质中、液泡膜上和液泡内 ;在四分体时期 ,与小孢子母细胞相比 ,四分小孢子表面和细胞质中 Ca2 + 数量明显增加 ,热胁迫 2 4 h后 ,细胞质和细胞核中 Ca2 +更多 ;在小孢子中 ,大量 Ca2 +分布在壁上、质膜内侧、液泡膜上 ,少量分布在细胞质和细胞核中 ,热胁迫 12 h后 ,质膜上 Ca2 + 增多 ,2 4 h后 ,细胞质、细胞核中、质膜内侧的 Ca2 + 继续增多 ;热胁迫对成熟花粉中 Ca2 +

麻疯树花药发育过程中Ca^(2+)的分布特征

采用超薄切片技术,在透射电镜下观察麻疯树(Jatropha curcasL.)花药发育过程中Ca2+的分布特征。在孢原细胞时期的花药中几乎看不到Ca2+沉淀,但花药维管束周围的细胞中有较多的Ca2+沉淀;到小孢子母细胞时期,细胞质中Ca2+沉淀依然较少,绒毡层壁上Ca2+沉淀明显增多;四分体形成时,小孢子细胞质和绒毡层细胞质中出现了较多的Ca2+沉淀;在小孢子发育早期,细胞质中Ca2+沉淀增加不明显,花粉壁部位累积有很多的Ca2+沉淀,绒毡层中Ca2+沉淀数量达到最多;到小孢子发育晚期,小孢子大液泡的液泡膜上有大量的Ca2+沉淀,绒毡层中Ca2+沉淀明显减少;随着二胞花粉中的大液泡消失,细胞质中积累淀粉粒以后,花粉中看到的Ca2+沉淀极少,同时,在花药维管束周围的薄壁细胞中,又出现了较多的Ca2+沉淀,表明花粉对Ca2+的需求可能降低。麻疯树花药发育过程中钙的动态分布特征暗示着钙参与了调控花粉发育过程,Ca2+的运输途径是由药隔薄壁组织运输到绒毡层,再进一步转移到小孢子表面和细胞质中,整个花药发育过程中,Ca2+沉淀表现为少—增加—减少的变化趋势。

大鼠胰腺β细胞分泌颗粒内钙离子超微结构定位的研究

目的:观察大鼠胰腺β细胞内钙离子在亚细胞水平的分布情况.方法:用胶原酶原位灌注法分离大鼠胰岛,在含100mL/L胎牛血清、11.1mmol/L葡萄糖的RPMI-1640培养基中培养过夜后,离心,将胰岛细胞团分为实验组(外源性胰岛素100mU/L孵育240min)和对照组(外源性胰岛素100mIU/L孵育0min),采用改进的焦锑酸钾沉淀的细胞化学方法对胰腺β细胞分泌颗粒内钙离子进行超微结构定位.结果:超微结构显示胰腺β细胞内钙离子呈高电子密度的黑色颗粒状.对照组的胰岛素分泌颗粒内钙离子沉积明显高于实验组,并伴有钙离子外排.实验组胰腺β细胞靠近细胞膜区钙离子沉积增加.结论:离子细胞化学定位法是研究组织中钙离子分布的有效方法.胰腺β细胞的分泌功能可能与胰岛素分泌颗粒内钙离子浓度密切相关.

包台型水稻不育系花药发育过程中的Ca^(2+)分布

用焦锑酸钾沉淀法研究了包台型不育水稻及其保持系花药发育早期细胞中的Ca2+分布变化.从花粉母细胞时期开始,不育系与保持系花药中的Ca2+分布出现差异,不育系药壁外层和药室内壁及药隔中均有Ca2+出现,而保持系花药中基本没有Ca2+分布,在减数分裂时期表现更加明显,不育系药壁和药隔中的Ca2+相对于花粉母细胞时期明显地有所增加,特别是绒毡层细胞和药隔中木质部细胞的次生加厚壁上Ca2+增加尤其明显,而保持系花药中的Ca2+较少.笔者从花药发育的更早期去寻找水稻雄性不育的机理.

肉鸡腹水综合征患鸡肺脏组织钙沉积和Ca^(2+)-ATPase活性变化

肺动脉收缩和重塑在肉鸡AS发生过程中起着重要作用.本实验经采用右心导管法研究发现AS患鸡PASP、PADP和mPAP极显著高于对照组(P<0.01).同时,采用焦锑酸钾沉淀法、电镜酶细胞化学法研究AS患鸡肺脏组织Ca2+和Ca2+-ATPase活性变化,发现AS患鸡肺脏组织中钙沉积量显著增多,且Ca2+-ATPase的电子密度颗粒显著减少或缺失.表明AS患鸡具有明显的肺动脉高压,其可能与肺脏组织,特别是肺动脉平滑肌细胞钙处理能力异常导致的钙离子浓度升高和肌浆网Ca2+-ATPase酶活性降低有关.

水稻非花粉型细胞质雄性不育系及其保持系花药发育过程中Ca^2＋的分布变化(英文)

钙在高等植物中被称为第二信使,与植物的有性生殖有关。为了研究水稻(Oryza sativa L.)花药中钙的定位与花粉败育的关系,利用焦锑酸钾沉淀法研究了非花粉型细胞质雄性不育系G37A及其保持系G37B花药的发育过程及其细胞中Ca2+的分布变化。研究发现,在2个材料间花药中钙的分布存在大量差异。G37B的可育花药在花粉母细胞时期及二分体时期,很少看到有Ca2+的沉积;而在单核花粉时期,Ca2+沉积急速地增加,主要定位在绒毡层细胞、花粉外壁外层及乌氏体的表面;随后花药壁上沉积的Ca2+减少而花粉的外壁外层仍然有很多Ca2+沉积物。相反,G37A的不育花药在花粉母细胞时期和二分体时期有大量的Ca2+沉积在小孢子母细胞和花药壁,中间层和绒毡层特别多。在二分体时期之后,不育花药的Ca2+沉积减少,特别是绒毡层内切向质膜附近的Ca2+几乎消失。但是同时期的可育花药中,有大量的Ca2+沉积在绒毡层。不育花药的Ca2+沉积在开花几天后消失。根据研究结果推测在不育花药发育早期中更多的钙离子与花粉败育有一定的关系。

表皮钙离子超微结构定位的研究(英文)

目的 观察钙离子在表皮的分布情况。 方法 裸鼠皮肤经丙酮处理后 ,采用离子捕获细胞化学法对裸鼠表皮钙离子的分布进行超微结构的定位。 结果 超微结构观察显示在正常的表皮中 ,基底层钙离子的浓度最低 ,由基底层到棘层钙离子的浓度逐渐增加 ,在颗粒层上部 ,钙离子的浓度最高。另外 ,裸鼠皮肤经丙酮处理后可导致表皮钙离子浓度梯度的丧失。 结论 表皮中存在一钙离子浓度梯度 ,离子细胞化学定位法是研究组织中钙离子分布的有效方法。

华北落叶松花粉发育过程中的钙动态分布

运用焦锑酸钾沉淀法研究了华北落叶松(Larix principis-rupprechtii Mayr)小孢子发育过程中不同阶段Ca^2+的分布情况。减数分裂时期，小孢子囊壁表皮和中层细胞的细胞壁及细胞间隙Ca^2+分布较多，绒毡层只有外切向面的细胞膜有Ca^2+分布，小孢子母细胞的各部位则很少有Ca^2+；四分体时期，包围四分小孢子的胼胝质壁上有大量的Ca^2+分布，在四分孢子壁上也有较多沉淀；游离小孢子时期，钙离子在小孢子壁的分布较四分体时期有所减少，而到花粉成熟时又逐渐增多；从四分体到花粉成熟，乌氏体周围的Ca^2+有增多的趋势。对四分体外壁Ca^2+的大量分布与花粉壁的形成及信号物质在花粉表面贮存的关系，以及小孢子囊的外壁、绒毡层和乌氏体在Ca^2+向花粉运输中所起的作用进行了讨论。

90dB次声作用后大鼠下丘脑神经细胞钙离子的分布

目的观察16Hz、90dB次声连续作用后大鼠下丘脑内钙离子的分布变化规律。方法用16Hz、90dB次声连续作用1、7、14、21d,每天1次,2h/次,分别于作用后0.5、12h观察大鼠下丘脑内钙离子的分布。结果空白组、对照组下丘脑神经细胞结构正常,钙离子呈规则的圆形黑色小颗粒,边缘整齐,主要分布于神经细胞核、线粒体、内质网、神经细胞和胶质细胞的突起中。次声组下丘脑神经细胞的超微结构都有损伤改变并伴随钙离子颗粒减少。结论次声可损伤大鼠下丘脑内神经细胞,损伤程度和次声作用参数及机体代偿作用有关。