BMSCs-BMP2-煅烧牛骨复合物的制作及其在兔尺骨骨缺损修复中的应用

目的制作兔骨髓间充质干细胞(BMSCs)-骨形态蛋白2(BMP2)-煅烧牛骨复合物,并观察其在兔尺骨骨缺损修复中的应用。方法将兔BMSCs分离、培养及成骨诱导后,接种于BMP2-煅烧牛骨复合物,扫描电镜下观察复合情况。将54只新西兰大白兔随机分为观察组、对照组、空白组各18只,于无菌条件下造成右侧尺骨中段10mm长缺损。观察组植入BMSCs-BMP2-煅烧牛骨复合物,对照组植入BMP2-煅烧牛骨复合物,空白组不植入任何材料,术后均不做任何内外固定。各组术后4、8、12周每组随机处死6只,分别行骨缺损处的放射学和组织学检查。结果成骨诱导后的BMSCs均匀分布在煅烧骨表面及孔洞内,与煅烧骨表面贴附紧密,细胞呈圆形,表面光滑,胞体较大,直径15μm。随着术后时间的延长,观察组和对照组Lane-Sandhu放射学评分、组织学评分均逐渐升高,P均<0.05;空白组无变化,P均>0.05。术后4、8、12周,观察组和对照组Lane-Sandhu放射学评分、组织学评分均高于空白组,观察组升高更明显,P均<0.05。结论 BMSCs能够较好地与BMP2-煅烧牛骨复合物进行体外复合培养,BMSCs-BMP2-煅烧牛骨复合物植入有助于兔尺骨骨缺损的修复。

高压氧联合碱性成纤维细胞生长因子对煅烧牛骨修复大鼠骨缺损的作用及其与骨保护素、CD34表达的关系

目的研究高压氧(HBO)联合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对天然煅烧牛骨(CBB)修复骨缺损的作用,并初步探讨该作用与骨保护素(OPG)、CD34表达变化的关系。方法32只SD大鼠随机分为两组,一组接受HBO治疗(HBO组,n=16),另一组不接受HBO治疗(NHBO组,n=16)。在大鼠左右侧顶骨处制作骨缺损,一侧移植CBB(CBB组)或CBB联合bFGF(CBBbF组),另一侧不移植作为对照(Con组)。HBO组接受2周HBO暴露,在术后4、8、12周时分别处死大鼠,通过影像学及组织学观察大鼠的骨缺损愈合情况,通过免疫组织化学染色观察骨缺损修复组织中OPG和CD34的表达情况。结果术后12周时,HBO-CBB组和HBO-CBBbF组、NHBO-CBB组和NHBO-CBBbF组大鼠骨缺损区骨密度(BD)分别大于HBO-Con组和NHBO-Con组,HBO-CBBbF组BD大于其他各组(P均<0.01)。术后12周时,HBO-CBB组和HBO-CBBbF组、NHBO-CBB组和NHBOCBBbF组新骨形成面积百分比分别大于HBO-Con组和NHBO-Con组(P均<0.01),血管数量分别多于HBO-Con组和NHBO-Con组。术后各时间点HBO-CBBbF组、HBO-CBB组和NHBO-CBBbF组血管数量均多于NHBO-CBB组。术后各时间点HBO-CBBbF组、HBO-CBB组和NHBO-CBBbF组OPG和CD34表达水平较NHBO-CBB组、HBO-Con组和NHBO-Con组升高(P<0.05,P<0.01)。结论CBB对骨缺损修复有促进作用,bFGF可增加骨缺损修复中骨再生和血管数量,HBO对bFGF联合CBB修复骨缺损有协同作用,其机制与促进OPG和CD34表达有关。

不同条件煅烧牛骨物理性能差异分析

寻找煅烧牛骨的合适条件，为骨缺损的修复治疗提供一种较理想的异种生物材料。方法：将４０ｍｍ×５ｍｍ×２．５ｍｍ骨条按不同温度、时间进行烩煅烧处理后，进行气孔率、吸水率、体积密度、抗折强度的测定，以及差热分析、材料矿物组成分析。结果：牛煅烧骨的成分为结晶程度不高的羟基磷灰石，煅烧时间和温度以４５０℃，３２小时为较合适，此时气孔率５０．６４％，抗折强度１７．５７Ｍｐａ，低于或高于这种条件则会使其物理性能降低，及残留一定的免疫性。结论：煅烧条件以４５０℃，３２ｈ为宜，该异种生物骨成分为羟基磷灰石，保留了牛骨的原有框架和一定的力学强度，具有潜在的传导性修复骨缺损的能力。

超微牛煅烧骨的制备、表征和生物相容性评价

以天然牛骨为原材料,采用化学法脱除有机成分,经过煅烧、超微粉碎制备了超微牛煅烧骨(TrueBoneCeramic,TBC)。对超微粉碎前后和不同煅烧温度、煅烧时间条件下的超微TBC进行了扫描电镜(SEM)测试和X射线衍射(XRD)分析,结果表明,温度越高,TBC颗粒粒径越小,同时超微粉碎后TBC颗粒粒径分布更均匀。也证明了制备的超微牛煅烧骨的成分是羟基磷灰石(Hydroxyapatite,HA),对制备的超微TBC进行了溶血实验、全身急性毒性实验,结果表明,制备的超微牛煅烧骨具有良好的生物相容性。

国产牛煅烧骨填充材料用于拔牙窝位点保存及种植骨增量的临床效果评价

目的评价国产骨填充材料(牛煅烧骨)用于拔牙窝位点保存及种植骨增量的临床疗效。方法选取青岛大学附属医院种植中心就诊患者40例,前牙或前磨牙需拔除。采取双盲法将患者随机分为试验组(国产骨填充材料)和对照组(Bio-Oss骨填充材料)。患者行牙拔除术并在拔牙窝植入对应骨粉,术后即刻和术后6个月均拍CT,计算牙槽嵴垂直向和颊舌向骨吸收量,评价2种植骨材料骨增量的临床效果评价。结果两种材料均显示出了较好的结果,无感染及排斥反应。CT示实验组和对照组患者的成骨效果佳,组间无明显差异(P>0.05)。结论国产骨填充材料(牛煅烧骨)牙槽嵴保存效果良好,值得临床推广。

羟基磷灰石与国产牛煅烧骨在拔牙窝位点保存的临床效果评价

目的分析国产骨粉(羟基磷灰石)及国产牛煅烧骨此两种骨填充材料在拔牙窝位点保存及拔牙术后牙槽窝感染中的临床效果。方法以2017年1月-2019年6月随机选取的164例接受单颗前磨牙或前牙拔除治疗患者,随机分为两组,A组(羟基磷灰石)、B组(牛煅烧骨),在牙拔除术中分别采用羟基磷灰石骨填充材料、国产牛煅烧骨填充材料进行牙窝填充处理。对研究结果进行统计分析,比较两组术后拔牙创面愈合或感染情况、术后拔牙窝位点保留情况。结果A组(羟基磷灰石)与B组(牛煅烧骨)两组1~3月拔牙窝位点保留,未见明显差异(P>0.05)。创面愈合情况A组(羟基磷灰石)未见明显材料外漏、感染等现象,B组(牛煅烧骨)少量病人出现创面感染、红肿、疼痛、出血情况,两组间统计学上可见差异(P<0.05)。结论在拔牙窝位点保存中,国产骨粉(羟基磷灰石)及国产牛煅烧骨两种骨填充材料未见明显差异,效果均较佳;在拔牙术后创面愈合情况中国产骨粉(羟基磷灰石)牙槽窝感染情况优于国产牛煅烧骨。

天然煅烧骨修复材料(骼瑞)修复动物骨缺损的有效性研究

目的:观察煅烧牛骨(骼瑞)修复动物骨缺损的有效性。方法:分别建立犬牙槽骨缺损修复模型、SD大鼠和新西兰白兔颅骨极限缺损模型,对照组骨缺损不植入修复材料,实验组骨缺损中植入骼瑞,每个组取材6只动物。术后用HE染色、Micro CT、Masson三色染色等方法观察缺损修复效果。结果:犬牙槽骨缺损修复8周后牙槽骨缺损修复良好。兔的颅骨修复实验中,实验组术后6周,煅烧骨颗粒周围有大量新骨形成。术后12周,骨缺损区新骨部分连接成片,已改建成板层骨,煅烧骨颗粒大多被新生骨包围。术后24周,新生骨成熟度进一步提高。SD大鼠颅骨缺损修复实验,术后8周,实验组骨缺损区域愈合,且填充修复区域的骨密度几乎接近于正常骨的骨密度。3种动物实验中,实验组骨缺损修复均优于对照组。结论:骼瑞材料对于骨缺损修复具有显著的促进作用。

兔骨髓基质细胞体外成骨分化鉴定及与煅烧骨复合培养的实验研究

目的研究兔骨髓基质细胞体外向成骨细胞分化的生物学特性及其与牛煅烧骨体外复合培养的生物相容性。方法将体外培养1周的兔骨髓基质细胞向成骨细胞诱导分化,于1、2、4周时提取RNA,采用RTPCR技术检测ALP和I型胶原mRNA表达,并对培养2周的细胞行VonKossa染色观察钙结节形成;另制备细胞煅烧骨复合物,继续培养1、7、14d后取出,扫描电镜观察及X射线衍射仪检测。结果体外诱导培养2、4周后,兔骨髓基质细胞成功表达ALT和I型胶原,VonKossa染色可见钙结节形成。扫描电镜及X射线衍射分析证实细胞在煅烧骨表面大量贴附成活,14d后细胞铺满支架表面,合成并分泌胶原纤维及钙盐。结论兔骨髓基质细胞体外可成功向成骨细胞诱导分化,成骨特性表达佳;与牛煅烧骨体外复合培养显示良好的生物相容性。

牛骨转化双相磷酸钙生物陶瓷材料的制备

对牛骨转化双相磷酸钙生物陶瓷的制备方法进行了研究,通过控制前处理方法、煅烧过程条件成功制备出孔径连通、孔隙率85%、孔径大小100μm-700μm、力学性能优于世面上大部分骨修复材料产品的条状、颗粒状多孔双相磷酸钙材料。通过XRD实验分析物相得到HA/β-TCP两相比,通过SEM实验观察材料的表面形貌,综合分析结果认为此方法制备的BCP材料具有骨诱导性。

牛骨转化双相磷酸钙的制备及表征

多孔双相磷酸钙,即多孔羟基磷灰石HA与β磷酸三钙β-TCP的复合物,是近年来研究广泛的一种骨修复材料,用于各类骨缺损的修复,本文研究了牛骨的前处理方法,对制得的牛松质骨进行了表征。材料中TCP及TTCP的比例随着煅烧温度的升高、时间的增加而增加,材料中的晶粒也逐渐变大,制品适宜作为骨修复材料应用。本文以新鲜成年牛股骨为原料,采用先酸性、后常规的浸泡顺序模拟植入人体后的环境变化,研究了多孔BCP材料植入体内后沉积类骨磷灰石的情况。

牛煅烧骨/Ⅰ型胶原复合骨修复材料制备及评价

将牛煅烧骨(TBC)和Ⅰ型胶原(CoL)按不同质量比混合,经戊二醛交联、冷冻干燥等处理后制得复合支架,研究了不同材料比例及胶原交联对材料性能的影响,分析了支架材料的理化性能,通过CCK-8法评价了细胞在支架上的增殖情况.结果表明,所制TBC/CoL支架具有多孔结构,平均孔隙率为93.5%,杨氏模量为4.36±0.21 MPa;复合支架中TBC在CoL上发生了化学吸附,CoL结构保持完整;MC3T3-E1细胞在支架上培养24 h在支架表面生长良好,增殖情况与对照组无明显差别(P>0.05).