肿瘤坏死因子-α和NF-κB在单核巨噬细胞促煤焦沥青烟气提取物诱导BEAS-2B细胞恶性转化中的作用

目的探讨肿瘤坏死因子-α（TNF-α）和NF．KB在人单核巨噬细胞系（THP-1）细胞促煤焦沥青烟气提取物（CTPE）诱导人支气管上皮细胞系（BEAS-2B）细胞恶性转化中的作用。方法在第10代BEAS-2B和THP-1细胞共培养组中分别加入NF—KB的抑制剂一吡咯烷二硫代氨基甲酸（PDTC）和TNF-α中和抗体，用细胞周期检测、染色体核型分析和软琼脂集落形成实验检测第20代PDTC组和TNF-α中和抗体组BEAS-2B细胞的恶性转化情况，并与第10代、第20代共培养组进行比较；采用实时定量PCR和免疫印迹法（Westernblot）法检测各组BEAS．2B细胞中TNFR相关因子2（TRAF2）和细胞周期蛋白D1（CyclinDl）基因及其蛋白的表达。结果第20代PDTC组和TNF-α中和抗体组BEAS．2B细胞中S期细胞的比例分别为（33．97％±2．16％）和（34．29％±2．04％），明显低于第20代共培养组（44．46％±0．83％％），差异有统计学意义（P〈0．05）。第20代PDTC组和TNF-α中和抗体组100个细胞中出现异常染色体核型的细胞数量为40个和37个，而第20代共培养组为75个，差异有统计学意义（P〈0．05）。第20代PDTC组软琼脂集落形成数（15．17±2．48）个，集落形成率为（1．51‰±0．25‰），第20代TNF—α中和抗体组集落形成数为（13．33±2．58）个；集落形成率为（1．33‰±0．26‰），均明显低于20代共培养组[集落形成数：（172．33±12．09）个和集落形成率：（17．23‰±1．20‰）]，差异有统计学意义（P〈0．05）；PDTC组和TNF．d中和抗体组TRAF2和CyclinD1基因及其蛋白的表达明显低于第20代共培养组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论TNF．仅和NF-KB在THP-1细胞促进煤焦沥青烟气提取物诱导BEAS-2B细胞恶性转化的早期阶段发挥重要的作用，并可能通过影响TRAF2和CyelinD1的表达促使细胞恶性变发生。