血清乙肝病毒DNA煮沸抽提法的建立和应用

目的 建立一种简便的血清HBV DNA抽提方法一煮沸抽提法,并将其应用于巢式PCR扩增。方法 选取16份CHB血清,分别应用直接煮沸法和异硫氰酸胍-酚/氯仿法进行HBV DNA抽提后,进行荧光定量PCR测定;并以煮沸法抽提样品为模板,进行HBV DNA P区部分片段巢式PCR扩增。结果 将上述两种抽提方法的荧光定量PCR结果取对数后进行直线相关分析和配对样本t检验,结果显示:两种方法的定量PCR结果之间存在良好的相关性(r=0.696,P=0.003),且二者定量PCR结果无差异(P=0.663)。16份标本巢式PCR扩增均为阳性,PCR产物分子量大小与预期值相符。结论 直接煮沸法抽提HBV DNA,简便、快速、效果好,适用于HBV的科研和临床检测工作。

索氏煮沸抽提法快速测定粮食油料粗脂肪含量

一、试验目的粮食油料粗脂肪含量的测定,多年来,一直采用索氏抽提的标准方法。此法经过长期操作实践,存在一定的弊端。主要是操作时间长工作人员劳动强度大、能源(电、水消耗大。索氏抽提法做一个测定结果仅抽提时间一般需八小时以上,工作效率低。

裂解液加热煮沸法在血清HBV DNA抽提中的应用

目的建立裂解液加热煮沸法抽提血液HBV DNA的方法。方法选取浓度分别为106、105、104、103copies/ml的HBV DNA阳性血清,采用5种方法抽提HBV DNA,并用SYBR GreenI荧光定量PCR检测抽提产物。结果在HBV DNA浓度为106、105、104copies/ml时5种抽提法(异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/kit/SDS加热煮沸/chelex-100加热煮沸)均能得到阳性结果,而在HBV DNA为低浓度103copies/ml时,只有异硫氰酸胍加热煮沸/盐酸胍加热煮沸/chelex-100加热煮沸能得到阳性结果。结论chelex-100裂解液加热煮沸抽提HBV DNA操作简便、省时、经济,为血液标本HBV基因检测在临床上的大规模应用奠定基础。