小动物断层扫描系统在小鼠爆发性肝损伤模型中的应用

目的 利用小动物断层扫描（MicroCT）系统观察内毒素联合D-氨基半乳糖（LPS/D-GalN）所致小鼠爆发性肝损伤模型中的影像学表现和CT值变化,并分析影像学表现与小鼠肝损伤之间的关系及机制.方法 取5只雄性C57BL/6小鼠进行爆发性肝损伤造模（LPS 10 μg/kg＋D-GalN700 mg/kg,腹腔注射）,分别于造模前,造模后3h、6h利用MicroCT行小鼠活体肝组织扫描,根据扫描图像所获得资料测量小鼠肝脏的平均CT值,分析比较各组肝损伤征象的显示率差异.同时,取20只小鼠分为4组,造影剂（ExiTron nano 6000）组,给予造影剂注射,检测造影剂对肝脏有无毒性;PBS组,给予同造模组相同剂量的PBS注射;造模3h组,肝损伤造模后3h取血和组织标本;造模6h组,造模后6h取标本.然后比较MicroCT显像与小鼠血液及病理结果的相关性.结果 以ExiTron nano 6000做为造影剂,MicroCT可清晰的显影肝脏和脾脏的二维和三维结构.LPS/D-GalN可以造成严重的肝脏损伤.给予LPS/D-GalN处理后3h,小鼠肝脏的CT值明显升高,体外实验证明LPS可增强巨噬细胞吸收造影剂的能力.结论 MicroCT可通过无创方法在小鼠爆发性肝损伤早期反应肝脏损伤的变化,具有较高的应用前景.

AMPK激活剂减轻TNF-α诱导的爆发性肝损伤

探讨腺苷酸活化蛋白激酶(AMP activated protein kinase,AMPK)激活剂A-769662对肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)诱导的爆发性肝损伤中肝细胞凋亡的影响及机制。本研究在雄性BALB/c小鼠经腹腔内注射肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)及D氨基半乳糖胺(D-galactosamine,D-Gal),诱导爆发性肝炎模型。实验分为4组:正常对照组、A-769662单独处理组、模型组和A-769662干预组。采用比色法检测血浆转氨酶活性及肝组织中caspase-8、caspase-9、caspase-3的相对活性,Western blotting法检测肝组织中激活型caspase-3蛋白水平,TUNEL法检测肝细胞凋亡,HE染色观察肝组织病理变化,并记录各组小鼠生存情况。A-769662干预抑制了TNF-α/D-Gal诱导的肝组织中caspase-8、caspase-9、caspase-3的活性和激活型caspase-3蛋白表达水平的升高,显著减少肝细胞凋亡数目,明显下调血浆中天冬氨酸氨基转氨酶(aspartate transaminase,AST)与丙氨酸氨基转氨酶(alanine transaminase,ALT)水平,减轻肝组织病理学改变,提高小鼠生存率。AMPK激活剂A-769662在TNF-α诱导的爆发性肝损伤中,可发挥抗凋亡保护效应,这可能是其在保肝效应的新机制。