肝癌组织中遗传印记基因PEG10表达的特异性及其意义

目的:研究PEG10在肝癌组织中表达的特异性,为其作为一个潜在的肝癌基因治疗的新的分子靶点提供实验依据.方法:从来自不同器官组织的肿瘤细胞系(人肝癌细胞株HepG2、人胃癌细胞株SGC7901、人结肠癌细胞株Lovo、人胰腺癌细胞株PC3、人黑色素瘤细胞株A375、人T淋巴瘤细胞株Jurkat)、正常人胎肝细胞株L02、32例肝癌患者的肝癌组织、癌旁组织、10例良性肝病患者肝组织、10例正常人外周血单个核细胞中抽提总RNA,经RT逆转录合成cDNA,再以PCR方法检测PEG10的表达.同时,肝癌组织和癌旁组织标本经RT-PCR检测AFP的表达.结果:经RT-PCR扩增的PEG10基因片段为455bp,AFP基因的扩增片段为140bp,与原设计一致;PEG10在人肝癌细胞株HepG2中明显表达,人胃癌细胞株SGK7901、人结肠癌细胞株Lovo、人胰腺癌细胞株PC3中弱表达,而正常人胚胎肝细胞株LO2和其他肿瘤细胞株(人T淋巴细胞瘤、人黑色素瘤)中表达均为阴性雇32例肝癌及相应癌旁组织中,PEG10的表达阳性率分别为78.1%和0%;而AFP基因的阳性率分别为93.8%和59.4%.经McNemar检验,显示PEG10基因在肝癌组织中表达的敏感性与AFP表达敏感性之间无显著性差异(X20.01,1=1.78,P>0.05);而癌旁组织中PEG10表达率(0/32)明显低于AFP表达率(19/32)(X20.01,1=17.05,P<0.01).另外10例良性肝病患者(肝硬化4例,自身免疫性肝病2例,肝血管瘤2例,丙型肝炎1例,血色素病1例)肝组织标本及正常人的外周血细胞进行PEG10基因检测,结果均为阴性.结论:PEG10的表达不但具有比AFP更高的肝癌组织特异性,而且具有相对器官组织特异性.本实验为PEG10作为一个新的肝癌标志物和基因治疗的分子靶点提供了实验依据.

靶向遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体的构建及鉴定

目的构建并鉴定针对遗传印记基因PEG10的siRNA真核表达载体。方法根据PEG10基因cDNA序列,设计针对目的基因的4个siRNA靶序列,将其插入H1启动子下游,克隆到真核表达载体psiRNA-hH1neo中,通过酶切鉴定和DNA测序鉴定。结果酶切鉴定及DNA测序结果显示插入片断正确。结论本研究成功构建针对PEG10的真核表达载体,可能成为肝癌基因治疗中的一种新型、高效的治疗载体。

肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10转基因载体的构建和鉴定

目的构建小鼠肝脏特异性表达人遗传印记基因PEG10的转基因载体pALB-PEG10-EGFP,为制备转基因小鼠做准备。方法RT-PCR扩增PEG10基因cDNA序列,克隆入T载体进行酶切、测序鉴定,后将其定向克隆至真核表达载体pALB-EGFP中ALB的下游,构建转基因载体pALB-PEG10-EGFP;在Lipofectamine介导下转染L02细胞,经G418抗性筛选,挑选阳性克隆并扩大培养;采用RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学等方法分析PEG10在L02细胞中的表达和细胞内定位。结果酶切和测序结果表明pALB-PEG10-EGFP构建成功;稳定转染后的L02表达有PEG10的mRNA及蛋白,且主要定位于胞浆。结论重组体pALB-PEG10-EGFP的构建初步奠定了转基因小鼠制备的基础。

父系表达基因10蛋白在肝细胞癌组织中的表达及临床意义

目的研究父系表达基因10(PEG10)在肝细胞癌中的表达及其临床意义。方法收集2006年3月至2011年5月52例肝细胞癌组织,采用免疫组织化学法检测组织中PEG10表达,分别以31例癌旁组织、10例正常肝组织标本和10例胎盘组织作为对照。回顾52例肝细胞癌患者各项指标检测结果,并分析各项指标与PEG10表达的关系。结果 PEG10在肝细胞癌组织中阳性表达率为90.38%(47/52),显著高于癌旁正常组织[67.74%(21/31)]和正常肝组织(0),差异有统计学意义(P<0.01)。PEG10表达的阳性程度与肝细胞的分化程度呈正相关(r=0.441,P<0.01)。PEG10表达在肿瘤大小、不同年龄和性别患者间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PEG10在肝细胞癌组织中表达的阳性程度与肿瘤分化程度有关,对肝细胞癌的敏感性好,但其特异性不强。

人肝癌细胞遗传印记基因PEG10印记状态不受DMR甲基化调控

目的探讨人肝癌细胞遗传印记基因(genetic imprinted gene)PEG10差异性甲基化区(differntially DNA methylated region,DMR)甲基化状态在其印记调控中的作用。方法以单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)位点为等位基因标记,分析人肝癌HepG2细胞PEG10印记状态;采用RT-PCR、免疫组化及Western-blot检测PEG10表达水平;重亚硫酸盐修饰DNA测序法分析PEG10-DMR甲基化状态;再应用甲基基团供体S-腺苷蛋氨酸(S-adenosyl-L-methionine,SAM)及DNA甲基转移酶抑制剂5-氮杂胞苷(5-azacytidine,5-azaC)在体外及荷瘤裸鼠体内调控HepG2细胞PEG10-DMR甲基化状态,观察PEG10-DMR甲基化状态改变对PEG10印记状态及表达水平的影响。结果遗传印记基因PEG10在HepG2细胞呈双等位基因表达的印记丢失。与正常肝细胞HL7702相比,其PEG10-DMR甲基化水平显著升高。调控PEG10-DMR甲基化水平可改变PEG10的表达水平,但对其印记状态无影响。结论 PEG10-DMR甲基化不参与人肝癌细胞PEG10的印记调控,但可调控其表达水平。

父系表达基因10(PEG10)单克隆抗体的制备和鉴定

目的获得印记基因父系表达基因10(PEG10)单克隆抗体(mAb),为进一步研究PEG10的功能以及肝癌的实验室诊断奠定基础。方法采用细胞融合技术,以PEG10抗原免疫BALB/c小鼠的脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞进行融合,通过多次阳性筛选和有限稀释,建立了抗人PEG10 mAb杂交瘤细胞株。采用间接ELISA和Southern biotech试剂盒对mAb的特性进行鉴定,采用Western blot法及免疫组织化学染色验证mAb与肝癌细胞内源性PEG10蛋白的结合。结果成功建立2株稳定分泌抗PEG10蛋白的mAb杂交瘤细胞株,分别命名为3E8和3F3,均属IgG1亚类,κ型,且无交叉反应。Western blot法及免疫组织化学实验证实,mAb 3E8均能特异性结合肝癌细胞内源性PEG10蛋白。结论成功制备了效价高、特异性好的PEG10 mAb,该抗体有可能用于肝癌的实验室诊断。

C-Kit、父系表达基因10在原发性肝癌患者中的表达及与临床特征和预后的关系

目的探讨C-Kit、父系表达基因10(PEG10)在原发性肝癌(PLC)患者中的表达及与临床特征和预后的关系。方法收集PLC患者的PLC组织90例及癌旁正常组织90例,采用免疫组织化学染色法检测C-Kit和PEG10的表达情况。比较PLC组织和癌旁正常组织中C-Kit和PEG10蛋白的表达情况,比较不同临床特征PLC患者PLC组织中C-Kit和PEG10蛋白的表达情况。采用Logistic回归模型分析PLC患者预后的影响因素。结果PLC组织中C-Kit和PEG10蛋白的高表达率均明显高于癌旁正常组织,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、低分化、甲胎蛋白(AFP)水平﹥200 ng/ml的PLC患者PLC组织中C-Kit和PEG10蛋白高表达率分别明显高于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、中高分化、AFP水平≤200 ng/ml的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。随访3年,90例PLC患者的3年生存率为51.11%(46/90)。单因素分析结果显示,临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、低分化、预后评分﹤7分、C-Kit蛋白高表达、PEG10蛋白高表达、AFP水平﹥200 ng/ml的PLC患者的3年生存率分别明显低于临床分期为Ⅰ~Ⅱ期、中高分化、预后评分≥7分、C-Kit蛋白低表达、PEG10蛋白低表达、AFP水平≤200 ng/ml的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。多因素Logistic回归分析结果显示,临床分期为Ⅲ~Ⅳ期、低分化、预后评分﹤7分、C-Kit蛋白高表达和PEG10蛋白高表达均是PLC患者预后的独立危险因素(P﹤0.05)。结论C-Kit和PEG10在PLC组织中高表达,其表达情况与患者的临床特征及预后有关,C-Kit和PEG10蛋白有可能作为理想的PLC预后标志物。

肝癌组织中父系表达基因10的表达变化

目的观察不同肝癌细胞系、肝癌和邻近癌旁组织及不同分化程度的肝癌组织中印记基因父系表达基因10(PEG10)的表达。方法应用本实验室制备的高特异性抗PEG10单克隆抗体,采用Western blotting法检测肝癌细胞系MHCC97L、Hep G2、BEL-7404、Hep G2.215、SMMC-7721细胞及正常肝细胞系L02、卵巢癌细胞系HO8910、食管癌细胞系EC9706中PEG10表达;采用免疫组化法检测不同分化程度肝癌组织、癌旁组织中PEG10表达。肝癌分化程度与PEG10表达间的关系采用Spearman相关性分析。结果五株肝癌细胞系均较强表达PEG10蛋白,而正常肝细胞系L02和卵巢癌细胞系HO8910、食管癌细胞系EC9706均不表达PEG10蛋白。免疫组化实验结果显示,同一病例的肝癌组织高表达PEG10蛋白,而相应的邻近癌旁组织低表达或不表达PEG10蛋白。相关分析显示,肝癌分化程度与PEG10蛋白表达呈正相关(r=0.822,P<0.05)。结论 PEG10在肝癌组织及肝癌细胞系中呈高表达,而在正常肝组织、肝细胞中及其他器官的肿瘤细胞株中均不表达;PEG10表达与肝癌分化程度呈正相关关系。

长链非编码RNA父系表达遗传印记基因10靶向微小RNA-34a对口腔鳞状细胞癌生物学功能的影响

目的探讨长链非编码RNA父系表达遗传印记基因10(lncRNA PEG10)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达,以及通过调节微小RNA(miR)-34a对OSCC细胞增殖和迁移的影响。方法收集53例口腔鳞癌组织和癌旁组织作为研究对象,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)分析组织中lncRNA PEG10和miR-34a的表达水平。口腔鳞癌SCC-25细胞采用随机数表法分为si-NC组、si-lncRNA EG10组、miR-34a mimics组、miRNA-NC组。采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、细胞划痕实验和Transwell实验检测各组细胞增殖和迁移能力;双荧光素酶实验报告基因实验验证lncRNA PEG10与miR-34a的靶向关系。计量数据组间比较采用独立样本t检验,计数数据采用皮尔森卡方检验。结果lncRNA PEG10在OSCC肿瘤组织中的平均表达量(2.452±0.750)高于癌旁组织(1.293±0.326),差异有统计学意义(t=8.365,P<0.05)。lncRNA PEG10组细胞lncRNA PEG10表达水平(2.868±0.115)高于lncRNA对照组(0.973±0.003),差异有统计学意义(t=11.99,P<0.01)。miR-34a mimics组细胞miR-34a表达水平(1.310±0.010)高于miRNA对照组(0.251±0.020),差异有统计学意义(t=34.16,P<0.01)。lncRNA PEG10的高表达与淋巴结转移(χ^(2)=5.577,P<0.05)和临床分期(χ^(2)=6.606,P<0.05)相关。lncRNA PEG10沉默后,SCC-25细胞的增殖能力在48 h(0.416±0.009)和72 h(0.555±0.048)的检测点A值明显低于对照组(0.561±0.037和0.894±0.025,F_(48 h)=590.1,F_(72 h)=105.8,P<0.05)。lncRNA PEG10敲减组细胞划痕愈合率[(157.000±18.457)%]明显低于lncRNA对照组[(74.000±14.256)%],差异有统计学意义(t=19.452,P<0.05)。结论lncRNA PEG10在口腔鳞癌中表达上调,而miR-34a表达水平下调,lncRNA PEG10通过靶向结合miR-34a调节口腔鳞癌细胞增殖和迁移。

腹腔镜下射频消融联合静脉化疗对肝癌患者血清肿瘤标志物甲胎蛋白、细胞角蛋白19、父系表达基因10表达的影响

目的探讨腹腔镜下射频消融联合静脉化疗对肝癌患者血清肿瘤标志物甲胎蛋白(AFP)、细胞角蛋白19(CK19)、父系表达基因10(PEG10)表达的影响。方法选取原发性肝癌患者86例,随机分为对照组43例,予临床常规静脉化疗治疗;实验组43例,在对照组静脉化疗的基础上联合应用腹腔镜下射频消融治疗。观察2组患者治疗前后血清肿瘤标志物AFP、CK19、PEG10、肿瘤组织相关基因mRNA表达量,以及治疗后4个月复发率及生存时间水平变化。结果与治疗前相比,治疗后2组患者的血清AFP、CK19、PEG10水平均比治疗前明显降低;与对照组比较,实验组患者治疗后血清AFP、CK19、PEG10水平、HIF-1、VEGF mRNA、β-catenin、Cyclin D1、c-myc及MMP-7 mRNA表达量水平均低于对照组,PTEN mRNA表达量水平高于对照组;实验组中位生存期(28.3个月)显著高于对照组(13.7个月),上述差异均有统计学意义(P<0.05)。结论腹腔镜下射频消融联合静脉化疗能有效降低肝癌患者血清肿瘤标志物AFP、CK19、PEG10水平,通过PTEN通路、Wnt通路抑制肝癌细胞生长,延长生存时间。

父系表达基因10(PEG10)在肝细胞癌中的表达及其临床意义

目的:检测父系表达基因10(PEG10)在肝细胞癌组织中的表达,分析PEG10与肝细胞癌生物学行为及预后的相关性。方法:应用免疫组化方法检测88例肝细胞癌组织与癌旁组织中PEG10的表达情况,并分析PEG10阳性表达与癌组织生物学行为及患者预后的相关性。结果:PEG10阳性与低分化等级、Ki67(+)及mDFS缩短具有明显相关性(P<0.05)。结论:PEG10阳性表达提示肝细胞癌预后较差。

IL-10基因多态性与足月新生儿败血症易感性的相关性

【目的】探讨白细胞介素-10(IL-10)基因多态性与足月新生儿败血症易感性的相关性。【方法】前瞻性选取分析2020年6至2021年5月本院收治的107例汉族足月新生儿,根据是否确诊为败血症将其分为败血症组(败血症新生儿,56例)和对照组(咽下综合征、非感染性腹泻的新生儿,51例)。采用一代测序技术检测IL-10基因rs1800872、rs1800896多态性,比较两组基因型和等位基因频率的分布差异,采用Logistic回归分析IL-10基因rs1800872C/A、rs1800896G/A基因型与足月新生儿败血症易感性的相关性。【结果】败血症组血培养阳性15例,其中大肠埃希菌9例,葡萄球菌2例,溶血葡萄球菌、草绿色链球菌、无乳链球菌、屎肠球菌各1例。对照组血培养均为阴性。败血症组白细胞(WBC)计数及C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)水平均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。两组患儿IL-10基因rs1800872C/A、rs1800896G/A基因型及等位基因频率分布比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Logistic回归分析显示,IL-10基因rs1800872C/A、rs1800896G/A基因型与足月新生儿败血症的易感性无相关性(P>0.05)。【结论】IL-10基因rs1800872C/A、rs1800896G/A基因型可能不是足月新生儿败血症的易感基因。

白细胞介素-10对人外周血白细胞β-防御素2基因诱导性表达的影响

目的:探讨炎症抑制因子白细胞介素-10(白介素-10)在β-防御素2(hBD-2)基因诱导性表达中的作用。方法:22例健康人被纳入本研究中,以终浓度0 ng/m l的LPS、100 ng/m l的LPS、10ng/m l的IL-10、100 ng/m l的LPS+10 ng/m l的IL-10加入900μl人外周血中,于37℃刺激培养6 h后,提取外周血白细胞总RNA,用实时定量RT-PCR的方法测定外周血白细胞hBD-2mRNA的表达水平。结果:0 ng/m l的LPS或10 ng/m l的IL-10刺激6 h的白细胞中未检测到hBD-2 mRNA,100 ng/m l的LPS刺激6 h后hBD-2mRNA的表达水平为166.9±35.14,而IL-10与LPS共同刺激6 h后hBD-2 mRNA的表达水平为30.40±9.18。IL-10使hBD-2mRNA的诱导性表达水平明显降低(P<0.05)。结论:人外周血白细胞中hBD-2基因呈现诱导性表达,IL-10能下调hBD-2的诱导性表达。

Y染色体A10和C4基因座遗传多态性及其法医学意义

Y染色体(除拟常染区外)呈单倍型、父系遗传,在法医学中具有重要而独特的应用价值.目前,法医实际工作中常用的8个Y-STR构成的单倍型个人识别率为93.6%,不能满足法医学的要求[1、2],有必要寻找新的Y-STR.

转BpTCP10基因抑制表达白桦的耐盐性分析

【目的】TCP家族基因是植物特有的一类转录因子,广泛参与了植物的各类生命进程,起到至关重要的调控作用。白桦BpTCP10基因是属于TCP家族的一个重要基因,探究BpTCP10基因在白桦生长发育及非生物胁迫过程中的作用,能为揭示该基因的功能、培育白桦耐盐良种提供理论依据。【方法】以白桦为试材,在克隆BpTCP10基因的基础上,对其进行生物信息学分析和启动子元件分析,研究该基因的时空表达特性,同时使用CRES-T技术构建植物抑制表达载体,通过农杆菌介导法获得抑制表达转基因白桦株系,对转基因株系进行形态学分析,采取小叶盘法,在进行NaCl胁迫后,测定胁迫处理各时间点转基因株系的超氧化物歧化酶及过氧化氢含量,并进行DAB及NBT染色,分析其耐盐性。【结果】白桦BpTCP10基因含有高度保守的bHLH结构域,属于TCP家族基因中的PCF亚类,与拟南芥AtTCP11基因有一定的亲缘关系,而且BpTCP10基因的启动子上有多个胁迫响应元件。qRT-PCR结果显示,BpTCP10基因在叶片、茎节、顶芽、雄花序及雌花序中均有不同程度的表达;并且该基因参与NaCl等非生物胁迫及ABA和JA的应答。成功获得6个抑制表达白桦株系;对转基因株系进行NaCl处理后,DAB和NBT染色及超氧化物歧化酶和过氧化氢含量测定结果均表明,转基因株系表现为盐敏感。【结论】白桦BpTCP10基因可能参与白桦茎节的发育及非生物胁迫响应过程。

miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响

目的探讨miR-30c-5p对人绒毛滋养层细胞线粒体自噬、间充质转化及PEG10水平影响。方法人绒毛滋养层细胞HTR-8/SVneo分为空白组(HTR-8/SVneo细胞正常培养)、低氧组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养)、miR-30c-5p mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p mimics)、NC-mimics组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-mimics)、miR-30c-5p inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染miR-30c-5p inhibitor)、NC-inhibitor组(HTR-8/SVneo细胞低氧培养转染NC-inhibitor)。qRT-PCR检测各组细胞miR-30c-5p表达;Transwell小室检测细胞侵袭数目;划痕试剂盒检测细胞划痕愈合率;相关试剂盒检测ROS水平;免疫印记检测PEG10、Parkin、PINK1蛋白水平。结果空白组、低氧组、miR-30c-5p mimics组、NC-mimics组、miR-30c-5p inhibitor组及NC-inhibitor组的miR-30c-5p表达分别为1.00±0.00、1.00±0.00、1.61±0.15、1.03±0.13、0.75±0.08及0.96±0.10,差异有统计学意义(F=45.750,P<0.05);与空白组相比,低氧组HTR-8/SVneo细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05);低氧组与NC-mimics组、NC-inhibitor组比较上述指标,差异均无统计学意义(P>0.05);与低氧组相比,miR-30c-5p mimics组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1降低,ROS升高,差异均有统计学意义(P<0.05),miR-30c-5p inhibitor组细胞侵袭数目、划痕愈合率、PEG10、Parkin、PINK1升高,ROS降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论抑制miR-30c-5p可加快低氧状态下的人绒毛滋养层细胞侵袭及迁移,并通过促进线粒体自噬降低ROS表达,机制与抑制PEG10水平相关。

长链非编码RNA PEG10在结直肠癌中表达的临床意义和生物学功能

目的探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)父系表达遗传印记基因10(paternally expressed 10,PEG10)在人结直肠癌(colorectal cancer,CRC)中的表达、临床意义及生物学作用。方法利用实时定量聚合酶链反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)的方法检测66例CRC肿瘤组织及正常癌旁对照组织中lncRNA PEG10 mRNA的表达水平,分析lncRNA PEG10的表达与CRC患者临床病理资料及预后之间的相关性。在体外,利用CCK-8实验、Transwell迁移和侵袭实验检测lncRNA PEG10的表达对CRC细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果与癌旁正常对照组织相比,lncRNA PEG10在CRC肿瘤组织中的表达显著升高(P<0.01),并且与CRC患者的肿瘤浸润深度(P=0.017)、淋巴结转移情况(P=0.009)及TNM分期(P<0.001)显著相关。此外,lncRNA PEG10高表达是CRC患者预后的独立危险因素,与CRC患者总生存期(P=0.0037)和无进展生存期(P=0.0019)的减少密切相关。CCK-8细胞活性实验表明,lncRNA PEG10表达干扰能够抑制CRC细胞系HCT-116和DLD-1的增殖能力(均P<0.01);Transwell细胞侵袭实验表明,lncRNA PEG10表达干扰能够抑制CRC细胞系HCT-116和DLD-1的浸润能力(P<0.05或P<0.01);Transwell细胞迁移实验表明,lncRNA PEG10表达干扰能够抑制CRC细胞系HCT-116和DLD-1的转移能力(P<0.05或P<0.01)。结论lncRNA PEG10与CRC患者预后不良密切相关,并且促进CRC细胞的增殖、浸润和转移。lncRNA PEG10靶向治疗或许能够为CRC患者预后的改善带来巨大的益处。

人肝癌父系表达基因10的遗传印记状态

目的研究人肝癌组织及肝癌细胞株中父系表达基因10（PEG10）的遗传印记状态。方法从40例肝癌及其癌旁组织、15例正常肝组织、5株肝癌细胞（PLC／PRF／5、SMMC7721、HepG2、Hep3B、SK—HEP—1）、2株正常肝细胞（changliver、HL7702）中提取基因组DNA，针对PEG10基因单核苷酸多态性位点设计引物进行PCR，扩增片段经测序分析基因型，从杂合样本中提取总RNA进行RT—PCR，对扩增产物测序以检测等位基因表达状态，同时进行实时荧光定量RT—PCR检测PEGl0表达水平。计量资料以均数±标准差（x-±s）表示，组间比较用t检验与方差分析；两组率的比较用x2检验。结果40例肝癌及其癌旁组织中16例呈杂合状态，15例正常肝组织中3例呈杂合状态，肝癌细胞HepG2扩增片段测序检测到一杂合突变位点，其余组织及细胞株均为纯合状态。杂合样本中，82．4％（14／17）肝癌样本（包括组织及肝癌细胞株）中PEG10基因呈双等位基因表达，发生印记丢失；17．6％（3／17）肝癌样本呈单等位基因表达，提示印记存在。PEG10在癌旁及正常肝组织中几乎不表达。发生印记丢失的肝癌组织与印记存在的肝癌组织相比，PEG10表达水平的差异无统计学意义（t=1．311，P〉0．05）。结论大多数肝癌组织中存在PEG10印记丢失现象，PEG10印记状态与其在肝癌组织中的表达水平无明确关系。

PEG10基因与Wnt/β-catenin信号通路在肝癌发病机制中的相互关系

遗传印记基因10(PEG10)在绝大多数肝癌中特异性高表达,PEG10和SIAH1基因在肝癌细胞中相互作用,过表达的PEG10可抑制SIAH1介导的细胞凋亡,同时SIAH1可显著抑制PEG10的表达,失平衡的二者可能通过抑制细胞凋亡参与肝癌形成。Wnt/β-catenin信号通路的异常激活在肝癌形成中起重要作用;而SIAH1降解该通路的关键因子β-连环素(β-catenin),诱导肝癌的细胞凋亡和生长停滞,在抑制肝癌形成中起重要作用。PEG10和β-catenin均与SIAH1密切联系,PEG10的致癌作用很可能部分归因于Wnt/β-catenin信号通路。