复方片仔癀肝宝对酒精诱导的慢性肝损伤氧化应激的保护作用研究

目的:探讨复方片仔癀肝宝对酒精性肝病(Aleoholie Liver Disease,ALD)模型大鼠氧化应激的保护作用。方法:60只SPF级SD大鼠,随机分为正常对照组、模型组、阳性药对照组及肝宝低、中、高剂量组,每组10只。除正常对照组外其余各组用酒精联合高脂饲料喂养2周,造ALD模型,连续给药4周后取材。全自动生化仪检测血清中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)的含量变化;检测肝组织中超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的表达;HE染色,观察肝组织病理变化。结果 :模型组血清中ALT、AST、ALP、LDH的活性较正常对照组均有明显的上升,且肝组织中MDA水平明显上升,SOD、GSH-Px水平明显下降(P<0.01)。与模型组相比,肝宝各组ALT、AST、ALP、LDH的活性及MDA水平明显降低,而SOD、GSH-Px水平明显上升(P<0.05)。HE染色结果显示复方片仔癀肝宝不同剂量组对肝组织脂肪变性、肝内脂类聚集有明显的改善作用,并且存在剂量效应关系。结论:复方片仔癀肝宝能显著减轻酒精和高脂诱导的肝损伤,其机制可能与提高肝组织的抗氧化能力有关。

复方片仔癀肝宝对乙醇代谢的影响

目的:探讨复方片仔癀肝宝对乙醇代谢的影响。方法:SD雄性大鼠随机分为正常对照组、模型组、海王金樽组(阳性对照)和复方片仔癀肝宝高、中、低剂量组,每组8只。给药后0.5 h除了正常对照组,其余各组灌胃白酒。采用顶空气质联用法(HS-GC-MS)测定给酒后0.5、1、2、3、5 h大鼠血液中的乙醇浓度,运用ELISA法检测乙醇达到峰值时乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的含量。结果:复方片仔癀肝宝组在不同时间点大鼠血液中的乙醇、乙醇脱氢酶和乙醛脱氢酶的浓度均低于模型组(P<0.05)。结论:复方片仔癀肝宝促进乙醇代谢,达到解酒的目的。

复方片仔癀肝宝对酒精性肝病的抗炎作用

目的观察复方片仔癀肝宝对酒精性肝病模型大鼠的抗炎作用。方法 60只SPF级SD大鼠,随机分为空白对照组、模型组、阳性药对照组、肝宝低、中、高剂量组,每组10只,制作酒精性肝病大鼠模型,检测血清TG、ALT、AST、TBi L、ALP、LDH、LDL-c,HDL-c的含量变化;Elisa检测IL-1β、IL-4、IL-8、IL-10的表达,观察肝脏组织的病理变化。结果模型组TG、ALT、AST、TBIL、ALP、LDH、LDL-c、IL-1β、IL-4、IL-8、IL-10活性较阳性对照组明显上升(P<0.05),HDL-c水平明显下降(P<0.01)。与模型组比较,肝宝3组的TG、ALT、AST、TBi L、ALP、LDH、IL-1β、IL-8活性明显降低,HDL-c水平明显上升(P<0.05),IL-4含量下降,并存在量效关系,肝脏病理学观察,复方片仔癀肝宝各剂量组和阳性对照组能有效改善大鼠肝脏的颜色及质地。结论复方片仔癀肝宝对酒精性肝病有一定的治疗作用,其机制是降低炎症介质的产生,发挥抗炎作用。

片仔癀肝宝对慢性肝损伤凋亡的影响

目的:探讨片仔癀肝宝(肝宝)对CCl4诱导大鼠慢性肝损伤凋亡的影响。方法:60只SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、西利宾胺组、肝宝低剂量组、肝宝中剂量组、肝宝高剂量组,每组10只。除正常对照组外,SD大鼠腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液1 ml/kg,2次/周,连续8周。于造模第四周开始给药,设正常对照组(生理盐水)、模型组(生理盐水)、阳性药对照组(西利宾胺,50 mg/kg),肝宝低剂量组(150 mg/kg)、肝宝中剂量组(300 mg/kg)、肝宝高剂量组(600 mg/kg),1次/d,连续4周。于末次给药24 h后,HE染色观察肝宝对肝组织病理学的影响,TUNEL法观察肝组织凋亡情况,比色法检测Caspase-3和Caspase-9的变化,western blot检测肝宝对Bax和Bcl-2蛋白表达的影响。结果:HE染色发现,各用药组均可不同程度缓解CCl4诱导的肝损伤;肝宝抑制肝细胞凋亡;降低Caspase-3和Caspase-9的活力;下调Bax表达,上调Bcl-2表达。结论:片仔癀肝宝可以抑制CCl4诱导的肝细胞凋亡。

复方片仔癀肝宝对急性肝损伤的保护作用研究

目的探讨复方片仔癀肝宝(GB)对急性肝损伤的保护作用。方法将60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、西利宾胺组(阳性对照)、GB低剂量组、GB中剂量组、GB高剂量组,每组10只。连续给药7 d后,采用CCl4诱导急性肝损伤模型,24 h后检测GB对ALT、AST、ALP的影响;HE染色观察GB对肝组织病理学的影响;Elisa法检测GB对TNF-α和IL-1β的影响。结果各实验组ALT、AST、ALP的活性显著降低,观察肝脏病理切片各实验组与模型组比较,肝损伤均有减轻的趋势;血清中TNF-α和IL-1β的含量降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 GB能显著减轻CCl4诱导的急性肝损伤,可能与GB的抗炎症反应有关。

复方片仔癀肝宝对大鼠慢性酒精性肝损伤肝脏脂质代谢关键因子表达的影响

目的观察复方片仔癀肝宝对慢性酒精性肝损伤大鼠肝脏脂质代谢CCAAT/增强子结合蛋白(C/EBP)及过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)等关键因子表达的影响,探讨其通过调节肝脏脂肪酸合成和脂肪细胞分化的分子机制。方法将60只SD雄性大鼠随机平均分为正常组、模型组、对照组、复方片仔癀肝宝低、中、高剂量组6个组,采用梯度增加酒精浓度灌胃制备大鼠慢性酒精性肝损伤模型,同时分别灌服对照药水飞蓟宾葡甲胺片0.03 g/(kg·d)和不同剂量的复方片仔癀肝宝0.15,0.3,0.6 g/(kg·d)进行干预。给药4周后,取肝组织测定甘油三酯(TG)水平,并用western blot检测肝组织核转录因子kappa B(NF-κB)、C/EBP、PPAR-γ、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)及脂肪酸合酶(FASN)的蛋白表达情况。结果与模型组大鼠比较,复方片仔癀肝宝低、中、高剂量组能不同程度地降低C/EBP、ACC1、FASN、PPAR-γ及NF-κB的蛋白表达(P<0.05)。结论片仔癀肝宝能够通过调节脂肪酸合成相关基因而下调脂肪的合成,下调PPAR-γ和NF-κB的表达影响脂肪细胞分化和炎症损伤,这可能是其起到保护肝脏作用的分子机制之一。

复方片仔癀肝宝调控MicroRNA-155及IL-6、IL-10防治肝损伤的分子机制研究

目的:基于MicroRNA-155(miR-155)靶点探讨复方片仔癀肝宝(GB)对大鼠急性肝损伤保护作用及下游白细胞介素-6(Interleukin-6,IL-6)/白细胞介素-10(Interleukin-10,IL-10)信号通路调节的分子机制。方法:SD大鼠60只按随机数字表法分为空白组、模型组、西利宾胺组(阳性对照组)、GB低剂量组、GB中剂量组和GB高剂量组,各实验组按照不同剂量灌胃给药0. 5ml/100g,连续7 d,每日1次。除空白组外其他各组末次给药1h后按2ml/kg给予50% CCL4花生油溶液腹腔注射造模,空白组腹腔注射2ml/kg花生油,检测血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)活性和IL-6、IL-10含量,观察肝组织病理学变化,Q-PCR法检测肝组织中IL-6、IL-10、miR-155表达。结果:GB能降低转氨酶的活性,显著抑制IL-6和miR-155的表达,升高IL-10的表达。结论:GB可能通过调节miR-155及其下游靶基因IL-6、IL-10的表达,降低肝损伤的炎症反应以达到抗肝损伤的作用。

复方片仔癀肝宝片治疗慢性肝炎肝胆湿热证59例

目的观察复方片仔癀肝宝治疗慢性肝炎肝胆湿热证的临床疗效。方法将同期119例慢性肝炎肝胆湿热证患者按数字表法随机分为治疗组59例和对照组60例,对照组口服易善复,治疗组口服复方片仔癀肝宝片,比较2组ALT复常率、AST复常率、退黄疗效及中医证候积分改善情况及疗效。结果治疗组ALT复常率(57.62%)、AST复常率(72.22%)、退黄疗效(26.66%)、中医证候积分改善及中医证候疗效均优于对照组,2组比较有统计学意义(P<0.05)。结论复方片仔癀肝宝片治疗肝胆湿热证慢性肝炎疗效肯定。

ICP-MS测定片仔癀肝宝中6种重金属的含量

目的:建立电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)测定片仔癀肝宝中铬(Cr)、铅(Pb)、镉(Cd)、砷(As)、汞(Hg)、铜(Cu)6种重金属的含量。方法:样品微波消解处理后,采用电感耦合等离子体质谱法测定。结果:Cr、Cu、As、Cd、Hg、Pb标液的工作曲线线性良好,相关系数大于0.999 3。其中Cr的平均回收率101.2%,相对标准偏差(RSD)7.6%;Cu的平均回收率96.4%,RSD3.5%;As的平均回收率101.3%,RSD1.8%;Cd的平均回收率100.2%,RSD0.3%;Hg的平均回收率100.5%,RSD4.2%;Pb的平均回收率104.2%,RSD5.6%。结论:该方法稳定可靠,灵敏度高,重现性好,可用于测定片仔癀肝宝中Cr、Cu、As、Cd、Hg、Pb 6种重金属的含量。

复方片仔癀肝宝对化学性肝损伤抗氧化作用研究

目的:探讨复方片仔癀肝宝(GB)对化学性肝损伤的保护作用。方法:将60只SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组、模型组、GB(高、中、低)剂量组、西利宾胺组各10只。正常对照组腹腔注射橄榄油溶液1mL/kg,其余各组腹腔注射50%CCl4橄榄油溶液1 mL/kg,连续8周,2次/周。于造模第4周开始给药,模型组和正常对照组给予生理盐水;西利宾胺组给予西利宾胺3.3 mg/kg;GB低、中、高剂量组分别按GB 150、300、600 mg/kg给药,1次/d,连续4周。末次给药后禁食24 h,检测MDA、SOD、GSH和TBARs,HE染色观察肝组织病理学的影响,Real-time PCR和Western Blot检测肝组织CYP2E1的表达。结果:与模型组比较,各用药组中MDA、TBARs的活性均降低,SOD、GSH的活性升高,差异均有统计学意义(P<0.05);肝脏病理切片中,各用药组与模型组比较,肝损伤均有减轻的趋势,均下调CYP2E1的表达,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:GB能显著减轻CCl4诱导的化学性肝损伤,可能与GB的抗氧化应激有关。

复方片仔癀肝宝对大鼠慢性酒精性肝损伤肝脏SREBP2和HMGCR表达的影响

目的观察复方片仔癀肝宝对慢性酒精性肝损伤大鼠肝脏SREBP2-HMGCRa表达的影响,探讨其调节肝脏胆固醇合成通路的机制。方法将60只SD雄性大鼠随机平均分为正常组、模型组、对照组、复方片仔癀肝宝低、中、高剂量组6个组,采用梯度增加酒精浓度灌胃制备大鼠慢性酒精性肝损伤模型,同时分别灌服对照药水飞蓟宾葡甲胺片(0.03 g·kg^(-1)·d^(-1))和不同剂量的复方片仔癀肝宝(0.15,0.3,0.6 g·kg^(-1)·d^(-1))进行干预。给药4周后,取血清用全自动生化分析仪检测肝功能(AST、ALT、LDH、TB)和肝组织TG、TC水平,并用Western blot检测肝组织SREBP2、HMGCRa、HMGCRb和HMGCRS1表达情况。结果与模型组大鼠相比较,复方片仔癀肝宝低、中、高剂量组能不同程度地降低AST、ALT、LDH、TB(P<0.05或P<0.01);能降低SREBP2和HMGCRa的蛋白表达(P<0.05)。结论复方片仔癀肝宝能够一定程度上改善酒精性肝损伤的肝功能并能够通过抑制酒精引起的SREBP2和HMGCRa蛋白表达的升高,从而起到保护肝脏的作用。