组织工程牙周膜的体外构建

背景:利用牙周膜干细胞的多向分化潜能修复牙周缺损是近来研究的热点课题。目的:探讨利用可吸收生物材料冻干胶原膜和犬牙周膜干细胞在体外构建组织工程牙周膜的可行性。设计、时间及地点:单一样本观察,于2003-11/2004-10在解放军第四军医大学口腔医院组织工程实验中心完成。材料:生物膜为冻干胶原膜由解放军第四军医大学口腔医院组织工程实验中心提供。从4只1周岁犬的下颌前牙中分离培养牙周膜干细胞。方法:取第3代犬牙周膜干细胞扩增至1×107数量级,种植在冻干胶原膜的表面,形成细胞-生物材料复合物,每日更换培养液,倒置相差显微镜动态观察细胞形态和黏附生长状况,体外培养1周左右,组织做扫描电镜、透射电镜和苏木精-伊红染色,观察细胞在冻干胶原膜材料中的生长、增殖以及基质分泌情况。主要观察指标:①光镜观察细胞接种后生长状况。②电镜和组织学观察细胞支架复合结果。结果:培养6d后,犬牙周膜干细胞分泌的基质与支架材料形成网状结构。复合物体外培养1周,细胞黏附在生物支架上,细胞增殖和生长良好,分泌大量基质并形成纤维状结构,细胞复层生长,伸入膜的内部,增殖的细胞和分泌的基质与膜交接成一整体,复合物成为纤维网状组织,基本具备牙周膜的纤维状结构。结论:利用冻干胶原膜为支架,犬牙周膜干细胞为种子细胞,可在体外成功构建组织工程化牙周膜。

自体骨髓干细胞移植狗牙周缺损处引导组织再生的实验观察

目的本文对应用自体骨髓干细胞移植引导组织再生的动物实验的观察进行评价。方法6只成年狗,实验组,对照组各18颗牙。分别在每条狗抽取骨髓1ml,在实验室内进行原代骨髓干细胞培养,培养液为内含15%小牛血清(FCS)和0.5%青-链霉素抗生素的a-MEM培养液。第1代细胞转移到18块大小为6×2mm2胶原膜上,约每张胶原膜上1×107个细胞,培养24小时后相差显微镜下观察细胞在膜上附着情况。在人工制造的牙周缺损中进行体外培养的自体骨髓干细胞移植结合GTR方法(实验组)和单纯GTR方法(对照组)。在6周后切片行牙周组织学观察。结果实验组新生牙槽骨新生牙周膜组织及新生牙骨质的修复再生的效果明显好于对照组(P<0.05),形成了的牙周结构,只是引导再生的牙周组织基本恢复到正常的牙周组织高度。实验组牙槽骨再生高度平均为4.50±0.13mm;对照组为3.09±0.28mm。结论应用自体骨髓干细胞移植结合e-pTFE膜引导牙周组织再生可促进牙周组织的再生、加快正常骨结构组织的建立并缩短修复再生时间。

衰老对人牙周膜干细胞的多能性和再生潜能的影响

多潜能的成体干细胞可以从人牙周膜（PDLs）组织中分离和大规模扩增，为牙周再生的临床治疗提供可靠的种子细胞来源。目前，衰老对问充质干细胞（MSC）及其细胞性能的影响尚不明确。本项研究旨在探讨不同年龄组的阻生第三磨牙牙周膜干细胞（PDLSCs）的特点，并比较它们的多能性和再生能力。将来自90颗新鲜拔除的第三磨牙牙周膜组织，根据捐献者年龄分为四组。

人牙周韧带细胞和β-磷酸三钙多孔生物陶瓷的牙周组织工程研究

目的:以多孔β-磷酸三钙(β-TCP)生物陶瓷材料作为组织工程支架,以人牙周韧带细胞(PDLCs)作为种子细胞,探索构建组织工程化牙周膜的可行性。方法:将体外培养7d的PDLCs和β-TCP的复合物,植入裸鼠背部一侧皮下,在对称部位植入单纯的β-TCP作为空白对照。术后4周、8周、12周分别取材,进行组织学检测。结果:实验组8周后支架材料部分吸收,可见未降解的支架材料孔洞内广泛分布着新生组织,其内可见小血管、腺体等结构;12周时支架材料大部分吸收,取而代之的是大量片状的新生结缔组织。空白组组织形成较少,支架材料降解与实验组相似。结论:体外培养的PDLCs与β-TCP复合后,能在体内增殖、分化,形成结缔组织,从而证明以β-TCP作为支架材料进行的牙周组织工程是可行的。

碱性成纤维细胞生长因子与牙周组织再生的研究进展

碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)通过改善牙周炎症状态,促进牙周相关干细胞的迁移、增殖,促进血管、牙周膜样组织生成以及在调节骨/牙骨质的形成等方面表现出优越的生物学功能,在牙齿发育、修复和再生中起重要作用。bFGF能够与种子细胞和支架材料联合应用于牙周组织再生,并在多项实验研究中获得验证。然而,bFGF作为药物单独应用于临床治疗的应用方式需要进一步研究。

纤维蛋白粘合胶及其在牙周手术中应用的研究进展

纤维蛋白粘合胶是一种生物粘合剂,有较强的粘合作用及较好的组织相容性,并可促进牙周膜细胞的增殖与迁移。本文就纤维蛋白粘合胶在牙周组织愈合及再生中的研究进展加以综述。