促红细胞生成素对大鼠牙髓损伤后修复性牙本质形成的促进作用研究

目的:探究促红细胞生成素(Erythropoietin,EPO)对大鼠牙髓损伤后修复性牙本质形成的作用。方法:分离并鉴定人牙髓细胞(Dental pulp cells,DPCs),将DPCs分为对照(control)组、肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)组、TNF-α+EPO组;使用CCK-8法、Transwell法、碱性磷酸酶染色和茜素红染色法检测细胞增殖、迁移、成骨分化能力。将30只大鼠随机分为磷酸缓冲盐溶液(Phosphate buffered saline,PBS)组、氢氧化钙[Ca(OH)2]组和EPO组,对大鼠上颌第一磨牙进行牙髓暴露,分别以含PBS、Ca(OH)2和EPO的胶原蛋白海绵盖髓;术后1个月处死大鼠,micro-CT和苏木精-伊红染色观察修复性牙本质形成;免疫组化染色和Western blot检测牙本质基质蛋白-1(Dentin matrix protein-1,DMP-1)、牙本质涎磷蛋白(Dentin sialophosphoprotein,DSPP)、Runt相关转录因子2(Runt related transcription factor 2,Runx2)、Osterix(Osx)水平。结果:与control组相比,TNF-α组DPCs增殖、迁移、成骨分化能力降低(P<0.05);与TNF-α组相比,TNF-α+EPO组DPCs增殖、迁移、成骨分化能力提高(P<0.05)。与PBS组、Ca(OH)2组相比,EPO组露髓处形成连续完整的钙化桥及大量修复性牙本质,DMP-1、DSPP、Runx2、Osx水平升高(P<0.05)。结论:EPO通过提高DMP-1、DSPP、Runx2、Osx水平促进牙髓损伤大鼠修复性牙本质形成。

修复性牙本质形成的大鼠模型

目的 :建立修复性牙本质形成的动物实验模型 ,观察修复性牙本质形成的组织形态学特征。方法 :在Wistar大鼠第一磨牙近中面制备窝洞 ,分别观察 3、15、30d ,标本切片 ,HE染色 ,显微镜下观察。结果 :术后 3d未见修复性牙本质形成。 15d后可见修复性牙本质形成 ,并可见骨样牙本质。窝洞下原代成牙本质细胞由新分化的成牙本质细胞样细胞取代。 30d后 ,修复性牙本质明显增加。新分化的成牙本质细胞样细胞发生极化。结论

牙本质非胶原蛋白诱导兔修复性牙本质形成的实验研究——Ⅱ.修复牙本质形成的动物实验观察

将牙本质非胶原蛋白充填于兔切牙人工窝洞中,2周后修复性牙本质的形成明显快于对照组,提示牙本质非胶原蛋白有促进修复性牙本质形成的作用。

1-α羟化酶基因敲除导致小鼠牙本质形成和前期牙本质矿化障碍

目的:探讨1,25二羟维生素D在小鼠牙本质形成和前期牙本质矿化的作用。方法:利用组织学,免疫组织化学和RT-PCR比较分析了6周龄野生型和1-α羟化酶基因敲除小鼠牙本质形成和矿化的差异。结果:与野生型小鼠相比,1-α羟化酶基因敲除小鼠的牙量、Ⅰ型胶原和骨钙素在牙本质的沉积和骨钙素在成牙本质细胞表达均明显降低,而前期牙本质则明显增加。结论:1,25二羟维生素D在小鼠牙本质形成和前期牙本质的矿化过程中起重要作用。

内源性1,25(OH)_2D_3缺乏对哺乳期小鼠牙齿矿化和牙本质形成的影响

目的:研究内源性1,25(OH)2D3缺乏对哺乳期小鼠牙齿矿化和发育的影响。方法:利用X线检测、HE染色、组织化学、免疫组织化学以及real-time RT-PCR等方法检测2周龄同窝的WT和1α(OH)ase-/-小鼠下颌牙齿。结果:和2周龄WT小鼠相比,1α(OH)ase-/-小鼠下颌磨牙的X线透光率明显增加;1α(OH)ase-/-小鼠下颌第一磨牙及下颌切牙前期牙本质厚度与WT小鼠厚度有统计学差异。1α(OH)ase-/-小鼠下颌磨牙总胶原阳性面积与WT小鼠有统计学差异;1α(OH)ase-/-小鼠下颌第一磨牙牙本质I型胶原阳性面积与WT小鼠有统计学差异(P<0.05);OCN在1α(OH)ase-/-小鼠下颌第一磨牙的牙本质和牙髓相对阳性面积与WT小鼠相对阳性面积有统计学差异(P<0.01);Biglycan在1α(OH)ase-/-小鼠下颌第一磨牙的牙本质相对阳性面积与WT小鼠相对阳性面积有统计学差异(P<0.01);OCN与ALP在1α(OH)ase-/-小鼠下颌切牙牙髓细胞中mRNA的表达水平较WT小鼠有明显降低,有统计学差异(P<0.05)。结论:内源性的1,25(OH)2D3缺乏导致哺乳期小鼠牙齿的牙本质矿化不良和牙本质的形成减少。

L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体对人牙本质形成的影响研究

目的:采用人牙齿切片体外器官培养的方法研究L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体对牙本质形成的影响。方法:收集年轻人健康前磨牙,用慢速切锯制备2 mm厚的牙齿横切片,将在L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体中浸泡过的琼脂糖微球与在PBS液中浸泡过的琼脂糖微球对称放置在牙片上,将切片用含琼脂糖的半固体培养基包被后采用Trowel器官培养方法培养1周,观察其对牙本质形成和矿化的影响。结果:L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体组四环素线状荧光带较对照组变细,von Kossa染色前期牙本质处球状矿化也较对照组减少,I型胶原免疫组化染色显示实验组与对照组无明显区别。结论:L型钙离子通道α1亚基D亚型多克隆抗体能够影响牙本质的矿化,但对牙本质基质的合成和分泌无明显影响。该结果提示成牙本质细胞膜上的L型钙离子通道α1亚基D亚型对牙本质矿化过程中的钙离子转运有重要作用。

牙本质陶瓷粉、非胶原蛋白及其复合材料对修复性牙本质形成作用的研究

目的 :观察牙本质陶瓷粉 (ceramicdentinpowder,CDP)、CDP与非胶原蛋白 (noncollagenouspro teins,NCPs)复合材料 (CDP/NCPs)对修复性牙本质形成的作用。方法 :牙本质粉煅烧后与人牙本质NCPs复合 ,用SD大鼠牙作直接盖髓实验 ,并用组织学方法评价修复性牙本质形成的效果。结果 :术后 14d ,CDP组 :穿髓下方可见少许成牙本质细胞。CDP/NCPs组 :穿髓孔周围见成纤维细胞增殖 ,呈团块状包绕穿髓孔。术后 2 8d ,CDP组 :穿髓下方可见少量修复性牙本质团块形成。CDP/NCPs组 :可见大量修复性牙本质形成。结论 :CDP/NCPs能促进大鼠牙体、牙髓组织修复。

咬合创伤后牙本质形成相关细胞的形态学变化

目的:探讨大鼠咬合创伤牙齿牙本质形成相关细胞以及牙本质的变化。方法:制备大鼠下颌第一磨牙咬合创伤,观察7d、15d、30d、90d时间点牙本质的形成与吸收,牙髓组织中与牙本质形成相关的细胞的形态和数目变化。结果:实验性咬合创伤的早期,牙髓组织中成牙本质细胞和多细胞层细胞增生活跃,牙本质形成增多现象,增生区域的牙体硬组织表面为坚硬组织破坏和牙本质暴露。后期可以出现细胞萎缩现象,牙本质吸收明显。结论:咬合创伤影响牙本质的形成功能,这种影响可能与相应区域牙本质是否暴露无关。

纤维粘连蛋白在牙本质形成中的作用

纤维粘连蛋白(fibronectin,Fn),是一种多功能高分子量糖蛋白,广泛存在于胞外基质中,在发育和损伤修复中调节细胞附着、移行和分化。近年来在牙齿发育和牙髓修复过程中,Fn在诱导成牙本质细胞及成牙本质细胞样细胞分化,促进牙本质形成过程中发挥重要的调控作用,本文就Fn在牙本质形成中的作用研究进展作一综述。

尼莫地平对人牙本质形成的影响

目的采用人牙齿切片体外器官培养的方法研究尼莫地平对牙本质形成的影响。方法收集年轻人健康前磨牙,用慢速切锯制备2mm厚的牙齿横切片,将在尼莫地平溶液中浸泡过的琼脂糖微球与在PBS液中浸泡过的琼脂糖微球对称放置在牙片上,将切片用含琼脂糖的半固体培养基包被后采用器官培养方法培养1周,观察其对牙本质形成的影响。结果尼莫地平处理后四环素线状荧光带较对照组变细、变淡,Von-Kossa染色前期牙本质处球状矿化也较对照组减少,透射电镜显示实验组成牙本质细胞内的分泌小泡与对照组相比略有增多,但是Ⅰ型胶原免疫组化染色显示实验组和对照组无明显区别。结论尼莫地平能够影响牙本质的矿化形成,但对牙本质基质的合成和分泌无明显影响。

活化蛋白A受体1在成牙本质细胞极化和牙本质形成中的作用

目的:研究活化蛋白A受体1(ACVR1)对成牙本质细胞极化及牙本质形成的影响。方法:以Cre-LoxP系统建立牙源性间充质特异性Acvr1基因敲除小鼠模型,取"Osterix-Cre;Acvr1 fx/-基因型小鼠"为实验组,同窝"Osterix-Cre;Acvr1 fx/+基因型小鼠"为对照组。取新生小鼠,通过HE染色观察小鼠下颌切牙的牙本质形成和成牙本质细胞形态;天狼星红染色观察下颌切牙的牙本质胶原排列;免疫荧光染色检测高尔基体(GM130)在下颌切牙成牙本质细胞中的定位。结果:HE染色结果显示,与对照组相比,实验组小鼠下颌切牙有牙本质形成缺陷,牙尖处可见骨样牙本质;从颈环至牙尖,成牙本质细胞形态由多角形变为高柱状,又变为多角形,极性从无到有,再逐渐消失,最终牙尖处部分细胞极性完全丧失。天狼星红染色结果显示实验组小鼠切牙的牙尖处胶原排列紊乱。GM130免疫荧光染色结果显示实验组小鼠切牙的近牙尖处成牙本质细胞中,高尔基体-细胞核相对位置发生变化。结论:Ⅰ型BMP受体ACVR1可维持成牙本质细胞极性并促进牙本质的有序形成,在调控牙本质形成中具有重要作用。

ACVR1对成牙本质细胞极性及牙本质形成的作用

目的研究Ⅰ型骨形态发生蛋白(BMP)受体活化素A受体1(ACVR1)调节小鼠成牙本质细胞极性及促进牙本质形成的作用机制。方法通过Cre-loxP系统,以Osterix为启动子激活Cre重组酶,敲除小鼠牙源性间充质细胞的Acvr1基因。于小鼠出生后21 d收集标本,观察成牙本质细胞形态、排列及牙本质的形态;免疫荧光染色检测小鼠极性相关标记物及高尔基体的定位;天狼星红染色评价牙本质的胶原形成。结果Acvr1基因敲除后,矿化牙本质和前期牙本质之间以及前期牙本质和成牙本质细胞层之间的分界线曲折不平,牙尖处有骨样牙本质形成;成牙本质细胞高柱状形态丧失,细胞间紧密连接和顶端极性相关蛋白定位异常,高尔基体与细胞核的相对位置改变,牙本质胶原排列不规则,胶原成熟度降低。结论小鼠牙源性间充质中的ACVR1通过促进成牙本质细胞的极性,进而促进牙本质的形成。

正畸力对幼鼠牙本质中DSP表达的影响

目的:探讨正畸力对牙齿发育过程的牙本质中DSP表达的影响。方法:选取5周龄雄性SD大鼠,建立正畸牙齿移动模型。分别于加力后1、3、7、14、21d处死动物,取含双侧上颌第一磨牙的上颌标本,制作石蜡切片,进行HE染色和DSP免疫组化染色。结果:牙冠部牙本质小管、前期牙本质、成牙本质细胞和牙根部成牙本质细胞DSP染色阳性。其中,牙尖部位的牙本质小管和前期牙本质呈强阳性染色,14d时达到高峰,21d时阳性染色有所减弱;根部成牙本质细胞在实验初期呈弱阳性染色,随时间的延长阳性染色逐渐增强。正常对照组DSP的表达明显弱于实验组。结论:对处于发育晚期的年轻恒牙施加适当的正畸力会促使成牙本质细胞进入活跃状态,牙本质中DSP表达上调,从而在一定程度上加速牙本质的形成及矿化。

iRoot BP Plus盖髓剂充填在年轻恒牙活髓切断术患儿中的应用效果

目的:观察iRoot BP Plus盖髓剂充填在年轻恒牙活髓切断术患儿中的应用效果。方法:选取2019年6月至2020年5月该院收治的120例行年轻恒牙活髓切断术治疗的患儿进行前瞻性研究,按随机数字表法将其分为研究组与对照组各60例。对照组使用氢氧化钙糊剂作为盖髓剂充填,研究组使用iRoot BP Plus盖髓剂充填,比较两组手术相关指标水平、治疗成功率、术后牙本质桥形成率和牙齿变色发生率。结果:研究组手术时间、肿胀持续时间、疼痛持续时间均短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);术后3、6个月,研究组治疗成功率均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);研究组牙本质桥形成率均高于对照组,牙齿变色发生率均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:iRoot BP Plus盖髓剂充填应用于年轻恒牙活髓切断术患儿可提高治疗成功率和牙本质桥形成率,缩短手术时间、肿胀持续时间、疼痛持续时间,降低牙齿变色发生率,其效果优于氢氧化钙糊剂充填。

碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中的表达

目的 :探讨碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中表达和意义。方法 :用免疫组化方法检测碱性成纤维细胞生长因子及其受体在人牙髓中的表达。结果 :碱性成纤维细胞生长因子在成牙本质细胞层强阳性表达 ,在牙髓其它细胞和血管内皮细胞阳性表达 ;碱性成纤维细胞生长因子受体在成牙本质细胞层弱阳性表达 ,牙髓其它细胞为阴性。结论

牙髓自身修复潜能的研究进展

牙髓组织在损伤、感染于一定程度范围内,具有自身修复潜能。这是牙髓组织固有的一种生物学机能。本文综述了与其相关因素的研究进展。提示,只有当牙髓细胞生长旺盛,有效成分活力丰富,该潜力才得以充分发挥。这对于临床上牙髓活髓保存治疗的成功与否有重要意义。

乳磨牙MTA直接盖髓术后即刻充填的临床观察

目的评价乳磨牙MTA直接盖髓术后即刻充填临床疗效。方法用MTA对4-8岁儿童的36颗深龋洞去腐露髓或意外穿髓的乳磨牙进行直接盖髓术后即刻充填治疗，治疗后6个月和2年后随访，观察盖髓后患牙症状、牙髓活力、X线片等疗效指标。结果MTA治疗36颗乳磨牙，经6个月和2年后随访，其中34颗成功，牙髓活力正常，可见X线片修复性牙本质形成；2颗失败。结论MTA应用于儿童乳磨牙直接盖髓术是有效的盖髓剂。