应用SGBG/PHBV复合材料构建牙本质牙髓复合体样结构的初步研究

目的初步研究溶胶-凝胶生物活性玻璃(SGBG)/聚羟基烷酸酯(PHBV)与猪牙乳头细胞的生物相容性,为构建牙本质牙髓复合体样结构的组织工程支架材料提供选择依据。方法通过体外细胞培养实验和扫描电镜观察细胞在材料表面生长增殖的情况。结果细胞在SGBG/PHBV三维支架上贴附及生长良好。结论 SGBG/PHBV作为支架材料有望应用于牙本质牙髓复合体样结构的组织工程修复。

牙髓⁃牙本质复合体再生的研究进展

本文将简要论述牙髓干细胞等牙源性干细胞对牙髓牙本质复合体再生的作用,以及细胞外基质蛋白、细胞外信号分子和生物支架材料等在其中可能的调控作用,以期促进干细胞或干细胞衍生物介导的牙髓牙本质复合体修复再生。

大鼠第一腮弓细胞构建组织工程牙本质-牙髓复合体样结构

目的观察胚胎12.5d(E12.5d)大鼠第一腮弓上皮及外胚间充质细胞离散后肾被膜下移植的成牙能力。方法切取E12.5d大鼠第一腮弓(下颌突),酶消化离心后与明胶海绵支架复合植入大鼠肾被膜下,4周后收获移植物,对移植物进行组织学观察和免疫组化抗牙本质涎蛋白(dentin sialoprotein,DSP)检测。结果种植4周,植入细胞在肾被膜下形成牙本质-牙髓复合体样结构。DSP在新生的牙本质组织中呈阳性表达。Masson三色法显示绿色矿化基质形成。结论E12.5d大鼠第一腮弓细胞部分保留了牙齿自然发育的遗传信号,在肾被膜下可以构建形成牙本质-牙髓复合体样结构。

小分子化合物促进牙髓牙本质复合体损伤修复的研究进展

龋病、外伤、医源性刺激等均可引起牙髓牙本质复合体损伤,保存活髓、促进牙髓牙本质复合体的损伤修复对临床治疗至关重要。近年来研究发现,各类小分子化合物可通过细胞内关键信号通路和代谢途径等机制调控炎症,促进牙髓干细胞迁移、增殖、分化,促进血管、神经再生,从而促进牙髓牙本质复合体的损伤修复。该文旨在对近年来小分子化合物在促进牙髓牙本质复合体损伤修复中的应用研究作一综述。

全冠牙体预备后影响牙髓-牙本质复合体反应因素的研究

目的:观察全冠牙体预备后牙髓牙本质复合体的反应及剩余牙本质厚度和修复时间对牙髓的影响。方法:选择因正畸需要拔除的健康第一前磨牙38颗,根据牙体制备的深度不同分为3组,暂时冠修复后分别于术后1,3,6周后拔除观察牙髓的炎症反应及剩余牙本质厚度。结果:全冠牙体预备后,牙髓组织主要表现为轻、中度的炎症反应。6周左右可见修复性牙本质形成。剩余牙本质厚度影响牙髓的反应,牙本质越厚,牙髓重度炎症的发生率越低(P<0.05)。结论:术后观察时间对牙髓预后的影响是以剩余牙本质的厚度为前提,剩余牙本质小于2mm时,时间与牙髓反应关系密切(P<0.01)。剩余牙本质为2～2.5mm时,时间与牙髓的反应相关(P<0.05)。但剩余牙本质厚度大于2.5mm时,时间与牙髓反应无关。

活髓保存治疗的生理和病理学基础——牙本质-牙髓复合体的防御和修复再生能力

在牙髓治疗学中,活髓保存治疗是最符合生物学观点的治疗方法。虽然间接盖髓术、直接盖髓术和切髓术的适应证、手术方法等不同,但具有相同或相似的生理和病理学基础,即牙本质-牙髓复合体的防御和修复再生能力。本文从牙本质-牙髓复合体的硬组织反应、软组织反应以及临床意义等方面进行了论述。

牙本质牙髓复合体损伤修复大鼠动物模型的建立

目的:建立大鼠实验性牙本质-牙髓复合体损伤修复模型,观察牙本质-牙髓复合体损伤后修复的组织病理学反应。方法:选择28只wistar大鼠,平均分为7组,每组4只,随机取一组作为对照组,另6组在双侧第一磨牙备洞。分别于术后、即刻、6h、1、3、7、14d处死取牙齿标本,经固定、脱钙、切片、HE染色光镜观察组织病理变化。结果:术后6h血管扩张明显,3d可见炎症细胞聚集在备洞下方牙髓,7d炎症程度降低牙本质-牙髓复合体修复活跃可见新生血管、成纤维细胞增生活跃、新生牙本质样细胞。14d备洞下方可见修复性牙本质。结论:备洞法可观察牙本质牙髓复合体损伤后自然修复过程,是研究牙本质牙髓复合体损伤修复的一个良好模型。

牙髓牙本质复合体体外培养模型的建立

目的 建立牙髓牙本质复合体体外培养模型。方法 取20～30岁成人新鲜、健康、完整的第三磨牙，纵向将牙齿切成厚约2mm的片状结构，每片牙片均包含牙釉质、牙本质和牙髓，运用DMEM培养液进行体外培养，隔天换液，连续培养21d。分别在培养的第7、14、21天，通过光镜和电镜观察，并行免疫组化检测，对模型进行鉴定。结果 光镜和电镜观察显示，成牙本质细胞和牙髓细胞在培养的第7天和第14天时，均保持良好的细胞形态；培养第21天时，部分细胞开始发生变性。免疫组化检测表明，成牙本质细胞牙本质涎磷蛋白表达阳性。结论 该模型能够在体外进行较长时间的培养，为人类牙髓牙本质复合体的体外研究提供了一种新的方法。

牙髓牙本质复合体纤维粘连蛋白的免疫组织化学研究与定量分析

目的 研究纤维粘连蛋白在牙髓牙本质复合体内的表达 ,探讨其分布与功能间的关系。 方法 免疫组织化学染色与图像定量分析。结果 纤维粘连蛋白免疫反应 (- IR)普遍存在于牙髓、前期牙本质和成熟牙本质的牙本质小管与成牙本质细胞突起 ,以成牙本质细胞层 ,牙髓血管与神经周围最为丰富。冠髓和冠部牙本质纤维粘连蛋白的积分光密度分别为 :0 .49± 0 .33,0 .5 0± 0 .2 9;线密度分别为 :38.44± 2 0 .7,19.34± 18.72 ;体密度分别为 :2 4.5 6± 10 .8,44 .5 2± 2 8.5。 结论 纤维粘连蛋白 - IR不仅见于牙髓与前期牙本质 ,而且也见于成熟牙本质的牙本质小管与成牙质细胞突起 ,它对维持牙髓牙本质复合体各结构的正常位置 。

成体干细胞在组织工程化牙本质牙髓复合体中的应用研究与展望

牙髓干细胞(dentalpucpstemcells,DPSCs)是一种成体干细胞。有关成体干细胞的研究进展,尤其是骨髓基质干细胞(bonemarrowstromalstemcells,BMSSCs)的研究,为牙髓干细胞的研究提供了可以借鉴的思路和方法。DPSCs也有相对特异的识别途径和特点,其中重要的特征之一是一定条件下能形成牙本质牙髓复合体。这将为其应用于组织工程中重建牙本质牙髓复合体,展示了巨大的优越性和可行性,也为其在牙髓生理、病理、牙髓病的生物治疗方面的研究提供了重要的应用价值。

牙本质龋损下牙本质-牙髓复合体的反应

目的探讨牙本质龋损进展过程中,牙本质-牙髓复合体的变化特点及规律。方法选择即刻拔除的第三磨牙65颗,其中牙本质浅龋27颗(急性龋15颗,慢性龋12颗);牙本质深龋28颗(急性龋16颗,慢性龋12颗);无龋损的正常牙10颗。常规固定、脱钙、切片(厚4μm),光学显微镜下观察牙本质龋病损下方牙髓的组织病理学改变,并用多功能图象分析仪对相应部位的成牙本质细胞的数目、浆核比、前期牙本质面积等进行测量分析。结果随龋损深度的增加,成牙本质细胞数目显著减少,细胞形态由高柱状变为立方状直至扁平状,前期牙本质变薄甚至消失,第三期牙本质变厚且发生率增加,血管扩张充血,炎症细胞增多,主要为淋巴细胞与浆细胞;牙本质浅龋阶段,成牙本质细胞浆核比显著下降,慢性龋成牙本质细胞样细胞分化、迁移活跃,胶原纤维增多。牙本质深龋阶段出现修复性牙本质,急性龋炎症细胞聚集明显。结论牙本质-牙髓复合体对龋损的反应与龋损深度及活动性有关;龋损深度增加,损伤反应加重;龋损活动性降低时修复与防御反应加强。

Runx2/Cbfa1在出生后小鼠牙髓牙本质复合体形成中的作用研究

目的探讨Runx2/Cbfa1在出生后小鼠成牙本质细胞分化及牙本质形成中时间和空间的分布特点及意义。方法采用免疫组化SABC法检测Runx2/Cbfa1在出生后BALB/c小鼠牙本质、成牙本质细胞及牙髓细胞中不同发育时期的表达及特点。结果Runx2/Cbfa1在成牙本质细胞的发育成熟过程中具有时空特异性,在牙根尚未发育之前的牙胚钟状晚期,Runx2/Cbfa1只在前期牙本质中有表达,在牙髓细胞及成牙本质细胞中皆为阴性;约从第11天开始,随着牙根的发育,Runx2/Cbfa1在根部成牙本质细胞、牙髓细胞中表达为阳性,在冠部成牙本质细胞中表达为阴性。结论Runx2/Cbfa1参与牙本质的形成和矿化及成牙本质细胞和牙髓细胞的发育,可能对它们起重要作用。

以牙髓干细胞构建组织工程化牙本质牙髓复合体修复牙髓损伤

背景:研究证明,牙髓干细胞具有高度增殖、多向分化的干细胞特征,体外实验证明其在一定条件下可诱导分化成多种功能细胞或组织。目前,利用牙髓干细胞构建组织工程化牙本质牙髓复合体移植对牙体缺损进行修复有望成为可能。目的:观察牙髓干细胞构建组织工程化牙本质牙髓复合体移植对大鼠牙体缺损的修复作用。方法:建立去髓牙齿模型大鼠,随机分为模型组及牙髓复合体移植组。建模后,复合体移植组于模型大鼠髓腔中植入牙本质牙髓复合体,模型组大鼠不作处理。移植后3,5,7周采集标本,对大鼠牙齿组织切片苏木精-伊红和免疫荧光染色,采用图像软件系统测量大鼠牙本质厚度。结果与结论:(1)牙髓细胞形态:牙髓细胞贴壁生长,大多数呈成长梭形、椭圆形,部分呈多角形;第3代细胞长梭形,呈纤维样生长,形态均一,免疫组织化学染色后,细胞核呈现为深蓝色,卵圆形,呈梭形着色深细胞为成纤维细胞样细胞,波形丝蛋白染色呈现为阳性;(2)大鼠牙齿组织苏木精-伊红染色:模型组大鼠牙齿牙本质细胞出现空泡状变性,髓腔内可见被破坏牙髓组织和碎屑,残留不规则的组织条梭,髓腔出现大量红细胞聚集和炎细胞,血管明显扩张。移植后7周,牙本质基质样组织层内可见成牙本质细胞成束装排列,原发性牙本质与再生牙本质界限明显;(3)免疫荧光染色:移植后3周,复合体移植组髓腔内细胞数量明显增多(P<0.05);移植后5周,髓腔内细胞数量明显大量增加,并分布于髓壁;(4)测定牙本质厚度:与模型组相比,牙本质牙髓复合体移植组在相同时间点大鼠牙本质厚度均明显较大(P<0.05),复合体移植组不同时间点牙本质厚度相比均差异有显著性意义(P<0.05);(5)结果证实,牙本质牙髓复合体能促进牙本质的再生和修复。

人前磨牙牙髓牙本质复合体层粘连蛋白的免疫组织化学研究

目的 研究层粘连蛋白在牙髓牙本质复合体内的表达 ,探讨其分布与功能的关系。 方法 收集不同年龄新鲜健康人前磨牙 6 0颗 ,固定 ,脱钙 ,石蜡包埋 ,层粘连蛋白免疫组织化学染色。 结果 层粘连蛋白免疫反应性 ( IR)普遍存在于牙髓、前期牙本质和成熟牙本质小管与成牙本质细胞突起之间 ,以牙髓的神经与血管周围最为丰富 ,冠髓较根髓密集。 结论 层粘连蛋白 IR不仅见于牙髓与前期牙本质 ,而且也见于成熟牙本质 ,它对支持、固定牙髓牙本质复合体各结构的正常位置。

体外牙髓-牙本质复合体观察模型的初步构建

目的体外构建牙髓-牙本质复合体模型,通过对生长于其内的牙髓细胞生长情况的观测,评价该模型的构建效果。方法构建可动态观察细胞形态的牙髓-牙本质复合体模型。将增殖稳定的人牙髓细胞接种于模型内培养,检测细胞在髓腔环内与牙本质髓腔内壁的关系和形态学表现,以及结构内细胞的增殖活性等。结果人牙髓细胞可以在本研究构建的模型内稳定增殖生长。结论本研究成功构建了体外牙髓-牙本质复合体动态观察模型,人牙髓细胞可在其内稳定增殖生长。

人前磨牙牙髓牙本质复合体Ⅰ型和Ⅲ型胶原的来源及分布

目的 探讨牙髓牙本质复合体Ⅰ型和Ⅲ型胶原的来源与分布。 方法 收集人前磨牙 ,固定、脱钙、石蜡包埋、切片、用SABC法进行免疫组织化学染色 ,显示Ⅰ型和Ⅲ型胶原蛋白。 结果 Ⅰ型胶原在牙髓内十分丰富 ,聚集成束 ,根髓中致密 ,以粗纤维束沿神经血管纵行分布 ;冠髓中纤维束较细、大量分支、变细 ,随意分布 ,交织成疏松的纤维网。从根尖至牙冠 ,从牙髓中央至周边 ,纤维束由粗变细 ,沿途分支 ,大部分终止于牙髓基质 ,少部分经成牙本质细胞间进入前期牙本质。此外成牙本质细胞、成纤维细胞与血管内皮细胞亦见Ⅰ型胶原蛋白表达。前期牙本质Ⅰ型胶原染色深 ,与牙髓基质和成牙本质细胞突起内者相延续 ,成熟牙本质近髓 1 3可见Ⅰ型胶原阳性免疫反应物。Ⅲ型胶原在牙髓牙本质复合体的表达基本与Ⅰ型胶原类似 ,仅数量和密度略少。 结论 牙髓牙本质复合体内的Ⅰ型和Ⅲ型胶原可能由成牙本质细胞、成纤维细胞和血管内皮细胞产生 ;不仅牙髓内存在Ⅰ型和Ⅲ型胶原 ,而且前期牙本质也有Ⅰ型和Ⅲ型胶原。

牙本质牙髓复合体的形成研究(二) 牙本质牙髓复合体的在体形成研究

牙本质牙髓复合体在体形成研究包括牙齿发育完成后在各种因素下形成的第三期牙本质和成牙组织、细胞在口腔以外部位形成牙齿样结构两方面。一些细胞外基质分子和生长因子形成的网络调控在其形成中发挥关键性作用。对这些分子机理的研究将为临床牙髓病的生物保髓治疗和牙髓、牙齿再生替代治疗奠定了基础。

牙髓牙本质复合体的nNOS阳性神经纤维

目的:研究神经型一氧化氮合酶（nNOS）在牙髓牙本质复合体中的表达,探讨其分布与功能的关系。方法:收集新鲜健康人前磨牙60颗,经固定、脱钙、石蜡包埋、切片,nNOS免疫组织化学染色。结果:在根髓nNOS阳性神经纤维呈粗大束状,向颈部逐渐变细,分支少;在颈部,束状纤维呈放射状至冠髓;在冠髓束状纤维大量分支呈网状,部分围绕于血管,部分止于牙髓基质,部分经成牙本质细胞层进入前期牙本质和成熟牙本质近髓1/3牙本质小管。结论:nNOS阳性神经纤维存在于人牙髓牙本质复合体中,部分围绕于血管周围,可能与血管功能调节有关,部分止于牙髓基质、前期本质和牙本质小管内,可能与牙内因素和牙外因素引起的感觉有关。