牙骨质附着蛋白在牙周组织再生中的作用

牙周病是一种常见的口腔疾病,在老年人中发病率高。牙骨质为覆盖在牙根表面的一层硬组织,维持着牙周组织的稳定与健康。新生牙骨质的形成对于牙周组织再生具有重要意义,与老年人牙周病的治疗密切相关。牙骨质附着蛋白(CAP)是牙骨质中的一种特异性蛋白〔1〕,具有促进牙骨质形成的作用〔2〕,因此CAP在牙周组织再生中发挥着重要作用。CAP的发现是牙周组织再生机制的一个重要补充。

牙骨质附着蛋白对牙周膜细胞黏附、伸展及增殖的影响

目的观察牙骨质附着蛋白（CAP）对体外培养的人牙周膜细胞（hPDLCs）黏附、伸展和增殖活性的影响。方法组织块培养法获得人hPDLCs。培养液中分别加入不同浓度的CAP（0、0.125、0.25、0.5、1.0、2.0μg/mL）。细胞计数法检测不同浓度CAP对hPDLCs黏附的影响;同时通过计数检测视野中伸展的细胞数,计算hPDLCs在培养1、4、7h后的伸展率;MTT比色法测定、比较不同浓度CAP处理组hPDLCs细胞的增殖活性。结果0.5、1.0μg/mLCAP处理组hPDLCs的黏附力明显强于空白对照组（CAP浓度为0）（P〈0.01）;不同浓度CAP处理组与空白对照组对细胞伸展影响的比较无明显差异。CAP对hPDLCs的促增殖作用呈浓度和时间依赖性,0.5-2.0μg/mL的CAP均能显著促进hPDLCs的增殖（P〈0.05）。结论CAP对体外培养的hPDLCs具有促黏附及促增殖作用,但对其细胞伸展无显著影响。

牙骨质附着蛋白的研究进展

目的 :牙骨质是维持牙齿稳固及牙周组织健康的重要矿化组织 ,但由于其局部解剖结构独特等原因导致目前对其仍缺乏了解 ,也在很大程度上限制着我们对于成牙骨质细胞生物学特性的认识。本文综述了近年来日益受到关注的牙骨质特异性蛋白—牙骨质附着蛋白 (CAP)的相关研究进展 ,就其发现、历史、生物活性以及作用机制等方面进行介绍 ,以供我国学者参考。

牙骨质附着蛋白的提取及纯化

目的探讨提取和纯化牙骨质附着蛋白的实验方法。方法拔除2龄牛健康牙齿，刮下牙骨质，分别制取牙骨质基质醋酸和胍2种提取物。采用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法分析2种提取物的蛋白组分。用刀片将牙骨质基质胍提取物经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳后M65000的蛋白条带切下，经洗脱和浓缩后，即得到牙骨质附着蛋白，鉴定纯度。结果得到纯度>95％的牙骨质附着蛋白。结论所采用的牙骨质附着蛋白提取及纯化方法是可行的，且较以往的方法有所简化。

牙骨质附着蛋白对牙囊细胞增殖的影响

目的:了解牙骨质附着蛋白对牙囊细胞增殖的作用。方法:分别采用MTT比色法和酶动力学方法观察牛牙骨质附着蛋白对体外培养人牙囊细胞增殖及其碱性磷酸酶活性影响。结果:牙骨质附着蛋白对牙囊细胞的增殖无显著影响,但高浓度的牙骨质附着蛋白可增强牙囊细胞碱性磷酸酶活性。结论:牙骨质附着蛋白对牙囊细胞的增殖无促进作用。

牛牙骨质附着蛋白N末端氨基酸序列分析

目的 :对牛牙骨质附着蛋白进行N末端氨基酸序列分析 ,为牙骨质附着蛋白的克隆表达提供一定的理论依据。方法 :应用乙酸和盐酸胍提取法获取牛牙骨质附着蛋白 ,鉴定纯度后进行N末端氨基酸序列分析。结果 :所获得的牛牙骨质附着蛋白纯度 >95 % ,N末端 15个氨基酸残基为 :Ile、Pro、Leu、Asp、Pro、Val、Ala、Gly、Cys、Lys、Glu、Pro、Ala、Ala、Asp。 结论 :测得的氨基酸序列具有特异性。

牙骨质附着蛋白对猴骨髓基质细胞增殖和矿化能力的影响

目的观察牙骨质附着蛋白(CAP)对体外培养的猴骨髓基质细胞增殖及矿化能力的影响。方法抽取猴髂骨骨髓,全血培养法获得骨髓基质细胞。培养液中CAP的浓度分别为0.125、0.25、0.5、1、2μg/ml,以不加CAP为空白对照。MTT法测定各组细胞的增殖活性,同时检测细胞内碱性磷酸酶活性。采用SAS6.12软件对实验数据行单因素方差分析。结果从第3天开始,0.5、1、2μg/mlCAP组与对照组相比能显著促进细胞增殖。对照组与不同浓度CAP实验组对细胞内碱性磷酸酶合成差异无统计学意义。结论0.5～2μg/ml的CAP都能显著促进体外培养的猴BMSCs增殖,但各浓度组CAP对细胞内碱性磷酸酶合成无影响。

牙骨质特异性蛋白研究进展

牙周病是最常见的口腔疾病之一,也是成人牙齿丧失的主要原因之一。牙周治疗的目的是实现牙周组织的再生,恢复牙周组织的结构与功能。牙骨质是牙周组织的重要组成,在牙周再生过程中发挥重要的作用,探索牙骨质的特性、构成及牙骨质形成相关因子在牙周组织再生中的作用,尤其是牙骨质特异性蛋白在牙骨质形成中的作用及其用于牙周组织再生的潜能,成为当前牙周再生研究的热点。本文拟就牙骨质的特性、构成和牙骨质特异性蛋白在牙骨质形成以及促进牙周组织再生过程中的作用进行综述。

保留根面牙骨质对人牙周韧带细胞分化的影响

目的观察保留健康牙骨质对人牙周韧带细胞分化的影响。方法取正畸患者拔除的健康前磨牙,从牙根的近中和远中面釉牙骨质界下2 mm制备对称的5 mm×4 mm的牙片43对,随机分成观察组(保留牙骨质)和对照组(去除牙骨质)各43张。刮取牙周膜组织,按组织块贴壁法培养牙周韧带细胞,分离培养后,取两组各23张牙片,将细胞接种到牙片上共培养,制成PDLC-牙片复合体。7 d后刮除并收集PDLC-牙片复合体上的细胞,采用RT-PCR方法检测成牙骨质标记物牙骨质附着蛋白(CAP)和牙骨质蛋白23(CP-23)表达。取两组剩余的20张牙片制成细胞-牙片复合体放入半透明膜中,植入裸鼠体内,8周后比较两组牙片表面新形成的硬组织情况,并采用免疫组化方法观察骨桥蛋白(OPN)和骨唾液蛋白(BSP)表达。结果观察组CAP和CP-23表达较对照组升高(P均<0.01)。植入裸鼠体内,8周后观察组14张牙片显示原有牙骨质上有牙骨质样基质形成;新旧牙骨质间并未观察到裂隙。对照组17张牙片在牙根表面有纤维组织形成,并且新纤维组织和牙本质表面间均可观察到不同宽度的裂隙。新形成的牙骨质样基质中,骨桥蛋白和骨唾液蛋白均呈阳性。结论保留健康牙根表面的牙骨质可能促进人牙周韧带细胞向成牙骨质细胞分化,有利于牙周组织愈合。