Milliplex方法在人炎症牙髓组织中多种细胞因子的检测应用

目的采用Milliplex多因子检测技术检测人恒牙炎症牙髓组织中多种炎性细胞因子的表达,探讨炎症因子变化能否作为辅助评估牙髓炎症程度的指标。方法选取2019年3月至2021年3月,128名就诊于首都医科大学附属北京口腔医院的患者,按临床牙髓炎症程度由轻到重分为四组:正常牙髓组(正常组,n=30)、轻度牙髓炎组(轻度组,n=32)、中度牙髓炎组(中度组,n=31)、重度牙髓炎组(重度组,n=35)。收集患牙穿髓孔处的牙髓组织渗出液,用Milliplex多因子检测技术检测样本中GM-CSF、IFN-γ、IL-10、IL-17A、IL-1β、IL-6、IL 8以及TNF-α的浓度并进行统计分析。结果随着牙髓炎症程度的加重,牙髓组织渗出液中促炎因子IL-6、IL-8浓度各组间浓度差异明显,呈明显递增趋势,组间两两比较均有显著性差异;IL-1β浓度总体呈递增趋势,重度组明显增高,正常组、轻度组、中度组与重度组间、正常组与中度组间有统计学差异;TNF-α、IL-17A浓度在重度组有所增高,较正常组、轻度组和中度组有显著性差异,但各组间数值差异较小;IFN-γ、GM-CSF、IL-10各组间浓度变化不明显。结论随着牙髓炎症的进展,牙髓组织渗出液中IL-6、IL-8浓度呈明显递增趋势,有可能作为评估牙髓炎症状态的指标,IL-8灵敏度最高,可能成为关键指标。IL-1β浓度在重度牙髓炎中明显升高,可能与牙髓炎症的急性发展有关。

牙髓血运重建术后血清CX3CL1,TLR4水平表达与牙髓组织再生的关系

目的分析牙髓血运重建术后血清CX3C趋化因子(CX3CL1)、Toll样受体4(TLR4)水平表达与牙髓组织再生的关系。方法回顾性选取我院自2017年2月至2020年6月接受的76例牙髓坏死患者作为观察组,并收集同一时期接受体检的健康志愿者80例作为对照组,其中观察组患者给予牙髓血运重建术,分别比较治疗前后各组CX3CL1、TLR4及牙髓组织再生相关指标[骨形成蛋白(BMP)、转化生长因子-β(TGF-β)]之间的差异,探讨牙髓血运重建术后血清CX3CL1、TLR4水平表达与BMP、TGF-β的关系。结果治疗前观察组与对照组相比,CX3CL1、TLR4、BMP及TGF-β水平比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后观察组血清CX3CL1、TLR4、TGF-β水平均较治疗前显著下降(P<0.05),BMP显著提高(P<0.05);经多元逐步回归分析显示血清CX3CL1、TLR4与TGF-β水平均呈正相关(P<0.05),与BMP均呈负相关(P<0.05)。结论牙髓血运重建术是牙髓坏死患者首选治疗方案,经治疗后血清CX3CL1、TLR4水平及牙髓组织再生均会发生显著改善,可以认为血清CX3CL1、TLR4水平表达与牙髓组织再生具有明显相关性,即CX3CL1、TLR4水平降低能直接影响牙髓组织再生过程,因此可将CX3CL1、TLR4水平作为牙髓坏死诊治及预后观察的重要参考指标。

OPG/RANK/RANKL在牙周炎联合血管钙化大鼠牙髓组织中的表达及意义

目的 :研究OPG/RANK/RANKL在牙周炎联合血管钙化大鼠牙髓组织中的表达及其可能的作用。方法 :取36只SPF级雄性Wistar大鼠,随机分为4组,正常对照组(C组)、牙周炎组(CP组)、血管钙化组(VDN组)和牙周炎血管钙化联合组(CP+VDN组),并按照相应的方法建立动物模型。模型建立成功后,取含上颌第二磨牙的上颌骨,H-E染色观察牙髓组织的变化;免疫组织化学Envision法检测牙髓组织中OPG和RANKL蛋白质的表达及OPG/RANKL比值的变化。采用SPSS19.0软件包对数据进行统计学分析。结果:牙髓组织H-E染色观察显示,CP组、VDN组和CP+VDN组牙髓组织不同程度破坏,牙髓内可见中性粒细胞浸润,牙髓血管充血,成牙本质细胞空泡性变,牙髓坏死。其中,CP+VDN组最为显著,其次为CP组、VDN组。免疫组织化学染色结果显示,C组大鼠牙髓组织OPG强阳性表达,CP组、VDN组和CP+VDN组的平均吸光度值显著低于正常对照组(P<0.05),其中以CP+VDN组OPG阳性表达率最低;CP组、VDN组和CP+VDN组大鼠牙髓组织RANKL强阳性表达,各实验组的平均吸光度均显著高于C组(P<0.05),其中CP+VDN组RANKL阳性表达率最高;OPG/RANKL值C组最高,CP+VDN组最低,差异显著(P<0.05)。结论:牙周炎和血管钙化均对牙髓组织产生一定损伤,牙周炎合并血管钙化可加重这一损伤;OPG/RANKL/RANK可能在牙周炎和血管钙化对牙髓组织的影响中发挥重要作用。

牙髓组织工程和再生中生物支架材料的进展

胶原、聚酯纤维、藻酸盐和羟基磷灰石等目前常用的生物支架材料,复合干细胞后虽都实现了连续的软组织和新生牙本质的形成,近年来研究开发的自组装多肽水凝胶和细胞膜片技术作为新型的细胞支架构建方法,具有独特的优势,有望为真正意义上的牙髓再生开辟新的空间。本文就上述相关内容作一综述。

纳米复合树脂(Filtek^(TM) Z350)与犬牙髓组织的生物相容性

背景:复合树脂无机填料的纳米化,使材料的机械性能得以明显改善,但其对牙髓组织的影响目前尚不清楚。目的:采用组织学方法评价纳米复合树脂(FiltekTM Z350)与犬牙髓组织的生物相容性。设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-04/2008-04在解放军南京军区福州总医院动物实验中心完成。材料:选择3只成年雄性Beagle犬,共60颗健康牙。方法:将犬牙人工制备颊面近髓V类深窝洞模型,将窝洞随机分为4组,分别用FiltekTM Z350、Dyract-AP复合体、TPH复合树脂及玻璃离子水门汀充填,充填前各组均使用可乐丽菲露SE BOND自酸蚀粘结系统处理。以未备洞的余留健康牙作为正常空白对照。主要观察指标:对各组样本牙的牙髓状态进行组织学评价,并测量所有样本的洞底剩余牙本质厚度。结果:术后7d,大部分样本的牙髓组织均出现轻度炎症反应;术后30及90d,除TPH复合树脂组外其余各组大部分样本的牙髓组织恢复正常,TPH复合树脂组仍有部分样本存在牙本质细胞层结构紊乱,其"组织结构紊乱"指标的评级高于其他组(P<0.05)。各组的平均剩余牙本质厚度无显著差别(P>0.05)。结论:该实验条件下,FiltekTM Z350纳米复合树脂的生物相容性和Dyract-AP复合体及玻璃离子水门汀相似,优于TPH树脂。

牙髓组织增龄变化的组织学定量研究

采用组织学定量方法及组化与免疫组化手段,对各年龄组的各类牙齿进行研究,进一步了解到牙髓组织各成分的老化过程,其中牙髓细胞随年龄而递减的趋势十分明显,它的变化及组织退变可能是牙髓老化的标志。

正常及炎症牙髓组织中IL-6的表达

目的：通过检测ＩＬ－６在人牙髓组织中的表达，探讨ＩＬ－６与正常及炎症牙髓组织的关系。方法：采用免疫组化（ＡＢＣ）法，检测正常组８个牙及炎症牙髓组１０个牙中ＩＬ－６的表达。结果：正常人牙髓组织ＩＬ－６染色为阴性，炎症牙髓组织中ＩＬ－６染色均呈阳性，主要表达细胞为单核－巨噬细胞，少量血管内皮细胞和成纤维细胞。结论：ＩＬ－６与牙髓组织的炎症反应密切相关，是重要的炎症介质之一。

缝隙连接蛋白及其在牙髓组织中的表达和作用

缝隙连接作为电突触的结构基础及相邻细胞间的通讯通道,近年来倍受关注,其主要组成蛋白——缝隙连接蛋白参与了多种疾病的发生发展,从而为预防和治疗疾病提供了重要的依据。本文就缝隙连接蛋白及其在牙髓组织中的表达和作用作一综述。

人滞留乳牙牙髓组织中一氧化氮合酶的分布特征及图像分析

目的:进一步研究一氧化氮与牙髓组织自身修复潜能的可能关系。方法:采用黄递酶组织化学的方法,观察人滞留乳牙牙髓组织中一氧化氮合酶(NOS)的分布特征,并采用图像分析的方法,进行半定量研究。结果:NOS阳性反应的产物呈深蓝色均质沉淀,在牙髓组织中主要分布于成牙本质细胞层、血管内皮细胞以及神经纤维的Schwann′s细胞;而在滞留乳牙牙髓组织中可见到在神经纤维束和血管内皮细胞中均具有NOS阳性反应沉淀,但其着色程度减弱。并且,在Schwann′s细胞,阳性反应信号的散在颗粒均匀分布在胞核及胞浆中,无明显胞核结构。结论:在滞留乳牙牙髓组织中存在(L-Arg)-NO-NOS途径,NOS可以作为反映牙髓活力的一个重要指标;进一步证实,NO对于维持牙髓组织自身稳定,在牙髓自身修复过程中可能发挥重要作用。

咬合创伤牙髓组织中CGRP免疫阳性纤维的变化

目的：探讨咬合创伤对牙髓组织中降钙素基因相关肽（ＣＧＲＰ）的影响。方法：利用免疫组织化学方法，观察大鼠牙齿在咬合创伤后 １天、３天、７大、１５天、１个月等不同实验期牙髓组织中 ＣＧＲＰ免疫阳性纤维的变化。结果：咬合创伤引起大鼠牙髓组织中ＣＧＲＰ免疫反应阳性纤维出现形态、分布、密度的改变。结论：咬合创伤可使牙髓组织中的神经末梢释放ＣＧＲＰ，ＣＧＲＰ可能参与了创伤所致的牙髓炎症及修复过程。

重度牙周炎患牙龈沟液与牙髓组织细菌内毒素浓度检测

目的:检测重度牙周炎患牙的龈沟液与牙髓组织的细菌内毒素(LPS)浓度,研究龈沟液与牙髓组织LPS的相关性,探讨尚未出现牙髓炎症状的重度牙周炎患牙是否需进行牙髓治疗。方法:选择无牙髓炎症状的重度牙周炎患牙(实验组)、有牙髓炎症状的重度牙周炎患牙(阳性对照组)、牙周健康且牙髓活力正常的正畸牙(阴性对照组)各10例,采用鲎试剂法定量检测其龈沟液和牙髓组织的LPS浓度。结果:各组龈沟液和牙髓组织中均有LPS。阴性对照组牙髓组织与龈沟液的LPS浓度相关系数r=0.409(P=0.288),相关性不显著。实验组牙髓组织的LPS浓度明显高于龈沟液,相关系数r=0.099(P=0.003),相关性有显著意义。阳性对照组牙髓组织的LPS浓度明显高于龈沟液,相关系数r=0.146(P<0.0001),相关性有显著意义。阳性对照组、实验组的龈沟液和牙髓组织的LPS含量均显著高于阴性对照组,差异有统计学意义(P<0.0001);阳性对照组龈沟液和牙髓组织中的LPS含量均显著高于实验组,差异有统计学意义(P<0.0001)。结论:有(无)牙髓炎症状的重度牙周炎患牙牙髓组织的LPS与龈沟液的LPS有相关关系。对于尚无牙髓炎症状的重度牙周炎患牙,宜结合临床检查结果,密切观察,必要时行完善的根管治疗。

牙髓组织中降钙素基因相关肽和P物质的研究现状

近十年来 ,国内外学者对牙髓组织中CGRP和SP两种神经肽作了比较深入的研究。本文就降钙素基因相关肽CGRP、P物质 (SP)阳性纤维在牙髓组织中的分布、CGRP和SP在牙髓组织中的作用 ,以及牙髓组织中这两种神经肽的临床意义作了简要综述。指出这两种神经肽在炎症、损伤、咬合创伤等情况下 。

乳牙深龋的临床表现与牙髓组织学变化的分析

目的 :分析深龋乳牙临床症状体征与牙髓组织病理学变化的关系。方法 :选择深龋乳磨牙治疗前做详细的患儿主诉和临床检查记录 ,术中切除冠髓作组织病理学检查 ,比较二者的相关性。结果 :深龋乳牙的患儿主诉和常规临床检查与其牙髓病理改变无显著关系 ;乳牙邻面深龋冠髓炎症发生率显著增高 (P <0 0 1 )。结论 :临床治疗乳牙深龋尤其是邻面深龋 ,应考虑到牙髓炎症改变 。

IL-8和TNF-α在创伤后牙髓组织中表达的实验研究

目的 :研究IL - 8和TNF -α在狗颌面部火器伤间接损伤牙髓中的表达情况。方法 :采用直径 5 .80mm制式枪弹致伤狗下颌部的模型 ,利用免疫组化染色及定量分析方法及检测颌面部火器伤后不同时间、下颌不同牙齿的牙髓组织中IL - 8和TNF -α的动态变化。结果 :IL - 8和TNF -α在伤后牙髓组织中有阳性表达 ,并随时间的改变 ,呈动态变化过程。结论 :IL - 8和TNF -α可能参与火器性牙髓炎症发生、发展 ,并与牙髓损伤。

蟾毒制剂与蟾酥制剂对狗牙髓组织的影响

目的：与砷剂作比较观察狗牙髓直接封蟾毒制剂、蟾酥制剂后的组织学变化。方法：实验动物采用狗，在光镜下观察标本。结果：封药１～４ｈ，砷剂与蟾酥制剂组牙齿牙髓血管扩张、充血明显；封药１ｄ，砷剂组牙齿冠髓坏死，根髓小血管破裂、出血，蟾毒制剂组牙齿冠髓组织严重水肿、细胞变性，但根髓出血较少；封药３～５ｄ，砷剂组牙齿牙髓呈出血性坏死，蟾毒制剂组牙齿牙髓以液化性坏死为主，而蟾酥制剂组牙齿兼有上述两种变化特征。结论：砷剂对牙髓的损伤以血管毒性为主，蟾毒制剂以原生质毒性为主，而蟾酥制剂兼有上述两种毒性作用。

干扰素刺激基因在人牙髓组织及牙髓细胞中表达的研究

目的:研究干扰素刺激基因(STING)在人牙髓组织和细胞中的表达。方法:分别采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测STING在体外培养的人牙髓细胞中的表达,免疫细胞化学和免疫组化技术检测STING在人牙髓组织的表达和定位。结果:STING mRNA在人牙髓细胞中有显著表达;而在牙髓组织中,STING主要表达于牙髓组织表面的成牙本质细胞的胞浆中。结论:在人牙髓组织中,STING在基因和蛋白水平均呈高表达,且主要定位于成牙本质细胞的胞浆中;提示STING调节通路可能对宿主的天然免疫反应发挥调节作用。

半导体激光美白程序对牙髓组织及P物质影响的研究

目的:观察使用半导体激光美白程序对大鼠牙髓组织的影响及其牙髓组织中P物质(SP)表达的变化。方法:将3月龄雄性SD大鼠100只随机分为3组,A组(n=10)不作任何处理,直接取样;B组(n=40)用半导体激光美白程序中的7 W、20 Hz、15 s连续频率、C组(n=40)用7 W、20 Hz、30 s、1/2间断频率照射其上颌第一、二磨牙,于术后即刻、1 d、3 d、7 d时B、C组各处死大鼠10只;取上颌骨制作组织切片,用HE染色、免疫组化染色观察牙髓组织的变化及牙髓组织中SP表达的变化。结果:B、C各组的牙髓组织充血情况均高于A组(P<0.05),B组高于C组。B、C各组牙髓组织中的P物质表达水平均高于A组(P<0.05),且从即刻组开始升高,3 d组达最高,然后开始降低;同时段内B组的SP水平高于C组(P<0.05)。结论:半导体激光美白程序连续频率的刺激性高于间断频率,激光照射后3 d内会使牙髓组织中疼痛递质的表达升高。

空气喷砂技术对牙髓组织中P物质作用的实验研究

目的:观察空气喷砂技术去龋时对牙髓组织的SP、CGRP神经反应性的影响。方法:实验组为空气喷砂技术组及高速涡轮机组,未制洞大鼠为空白对照组,制备雌性SD大鼠上颌磨牙,ABC免疫组织化学染色法观察牙髓组织内P物质的反应。结果:空气喷砂组大鼠牙髓SP、CGRP强阳性染色,高速涡轮机组大鼠牙髓SP、CGRP弱阳性染色,实验组间、实验组与对照组间均有差别,差别具有统计学意义(P<0.05)。结论:空气喷砂技术刺激牙髓神经合成SP、CGRP增多,推论该技术在制备窝洞时对牙髓组织刺激性相对较小。

Smad1,4,5在人牙髓组织中的表达分析

目的 :观察骨形态发生蛋白 (BMP)下游信号转导分子Smad1,4,5在正常、龋坏和炎症人牙髓组织中的表达及表达差异 ,探讨Smad1,4,5在牙髓损伤修复过程中的作用。方法 :制备正常、龋坏和炎症人牙髓组织标本 ,采用免疫组化方法检测Smad1,4,5在各类牙髓组织中的表达。结果 :Smad1,4,5在正常和龋坏牙髓的成牙本质细胞层呈强阳性表达 ,在下方的富细胞区及牙髓中心部位为阳性或弱阳性表达 ,炎症牙髓浸润的炎细胞中Smad1,4,5呈强阳性表达。其中Smad4在各类牙髓中表达最强 ,Smad1次之 ,Smad5最弱。结论 :观察到Smad1,4,5在正常、龋坏和炎症人牙髓组织中的表达及其差异 ,提示Smad1,4,5作为BMP的胞内信号转导分子 ,可能参与牙髓组织的自身修复过程。

正常人、龋病和牙髓炎患者牙髓组织中一氧化氮含量的检测分析

目的：对正常人、龋病和牙髓炎患者牙髓组织中一氧化氮（Ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ，ＮＯ）含量进行检测，初步探讨ＮＯ在牙髓组织自身修复中的作用。方法：采用荧光分光光度法检测其中亚硝酸根（ＮＯ２－）含量，以间接确定ＮＯ含量。结果：正常牙髓组织中ＮＯ无性别差异（Ｐ＞０．０５），浅龋组与对照组ＮＯ无显著性差异（Ｐ＞０．０５），而深龋伴慢性牙髓炎组ＮＯ含量则显著高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论：牙髓组织中ＮＯ含量的变化与其炎症反应有一定的联系，ＮＯ可能在牙髓炎症和自身修复过程中起到一定的作用。