牙髓细胞条件培养液对大鼠牙髓干细胞矿化能力影响的研究

目的观察牙髓细胞条件培养液对成年鼠及幼年鼠牙髓干细胞体内矿化能力的影响,以探求牙髓细胞条件培养液调节牙髓干细胞生物学特性的作用。方法取2周龄和4月龄SD大鼠上下颌切牙牙髓组织,采用组织块酶消化法分离培养牙髓干细胞,有限稀释法纯化牙髓干细胞,流式细胞仪检测牙髓干细胞表面标记物基质细胞抗原-1(stromal cell antigen 1,Stro-1),CD90表达情况;用细胞条件培养液分别诱导两个时期的牙髓干细胞,以细胞团的形式移植到大鼠肾被膜下,观察形成矿化组织的能力。结果细胞条件液可以改变两个时期大鼠牙髓干细胞的体内矿化特性,幼年鼠牙髓细胞条件培养液可以增强成年鼠牙髓干细胞形成矿化组织的能力,而成年鼠牙髓细胞条件培养液可减弱幼年鼠牙髓干细胞形成矿化组织的能力。结论牙髓细胞条件培养液可以改变牙髓干细胞的体内矿化能力,为调节由年龄因素带来的细胞生物学特性的改变提供了实验依据。

人牙髓细胞条件培养液对人牙囊细胞成骨分化作用的体外研究

目的:探索人牙髓细胞条件培养液(HDPSCs-CM)对人牙囊细胞(HDFSCs)向成骨分化的作用。方法:利用胶原酶消化法获得HDFSCs,经纯化鉴定后培养于HDPSCs-CM中;CCK-8检测HDFSCs增殖活性,观察细胞形态改变;碱性磷酸酶(ALP)染色、茜素红S染色定性分析细胞成骨能力的改变。qRT-PCR检测HDFSCs中骨膜蛋白(POSTN)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、碱性磷酸酶(ALP)、骨涎蛋白(BSP)以及骨桥蛋白(OPN)的mRNA表达情况。结果:经HDPSCs-CM诱导后,HDFSCs形态发生成牙骨质或成骨样改变;诱导组HDFSCs增殖活性受到明显抑制(P<0.05或P<0.01);诱导组ALP染色强于对照组,茜素红S染色矿化结节多于对照组;诱导组POSTN、Col-Ⅰ、ALP、BSP、OPN的表达量明显增高(P<0.05或P<0.01)。结论:HDPSCs-CM能促进HDFSCs成骨分化。