应用牛型结核菌素检查鹿结核病的初探

利用牛型结核菌素(OT)、提纯结核菌素(PPD)进行变态反应的方法,对鹿做了3个不同组合的试验。得出了以OT点眼法检查鹿结核病为主的结论,为结核病鹿的检疫、净化病鹿场提供了可行的方法。

制备牛型结核菌素高压灭菌模型的建立与应用

为建立牛型结核菌素高压灭菌模型,验证生物安全三级实验室对大量培养的牛分枝杆菌的高压蒸汽灭菌效果,通过型式试验,优化排空、升温、灭菌和排气等阶段的各项参数,最终确认最佳灭菌参数,建立灭菌模型。结果显示:灭菌温度121℃、灭菌时间10 min、排空4次、排气压差12 kPa、冷却温度98℃时,满载的牛分枝杆菌灭菌效果最好。本研究建立了制备牛型结核菌素国家标准品的高压灭菌模型,保证了满载牛分枝杆菌的灭菌效果,为防范人兽共患病原菌扩散,改进牛型结核菌素提纯制备工艺作出了有益探索。

用提纯的牛型结核菌素诊断食蟹猴结核病

食蟹猴(Macaca fascicularis)体型较恒河猴(M.mutalta)小,其生理指标与人类非常接近,在医学研究中作为实验动物需求量日趋增大。由于猴对结核分枝杆菌非常易感,并且与人类接触密切,因而在进出口贸易中对猴结核的检疫已列入必检项目且要求十分严格。在实际工作中对食蟹猴结核病的检疫是参照检测恒河猴的方法进行的,即用旧结核菌素(OT)

二种牛型提纯结核菌素变态反应试验结果比较

为了解不同厂家生产的牛型提纯结核菌素(PPD)对奶牛结核病检疫皮内变态反应试验结果的影响,随机选取二个不同规模奶牛场的100头青年母牛,分别采用国产和荷兰产PPD诊断液2000 IU和3000 IU的剂量,在每头参试牛的左右侧颈部同时进行皮内变态反应试验,并对判定结果进行比较;同时对所有阳性牛肺门淋巴结样品应用细菌培养的方法进行复核。结果显示:二种PPD诊断液均存在非特异性反应,但国产PPD的非特异性反应显著大于荷兰产PPD(P<0.01)。

牛型提纯结核菌素国家标准品的研制

根据《中华人民共和国兽用生物制品规程》2000年版制备牛型提纯结核菌素(牛PPD)国家标准品候选物4批。根据多糖、核酸和氮含量测定结果,筛选200804批制备为待检国家标准品,其检验结果为:物理性状为乳白色疏松团块,加生理盐水后在5s内溶解;无菌检验合格。200804批准检国家标准品于稀释前各样品变异系数为1.4%,冻干后各样品变异系数为4.8%。效价测定:待检国家标准品4个稀释度引起的豚鼠皮肤红肿面积与国际标准品相对应的稀释度引起的皮肤红肿面积的差值平均值都在10%以内,2者的剂量反应曲线基本平行,即待检国家标准品效价与国际标准品基本相同。200804批待检国家标准品于50℃保存21d之内效价下降程度平均值小于10%,保存28d效价下降程度平均值大于10%。其特异性和安全性均符合要求。

复方芸香抗结核菌作用及其对Ⅲ型肺结核疗效

实验结果表明，复方芸香对试管内人型结核菌抑制作用较强，对牛型、鸟型结核菌则作用弱；对小鼠结核病模型疗效显著；对人结核病疗效也显著。

高效液相色谱法测定提纯结核菌素效价的研究

为探讨高效液相色谱法测定牛型提纯结核菌素(PPD)效价的可行性,本研究根据PPD中蛋白成分的紫外光吸收波长,采用专用聚苯乙烯/二乙烯苯树脂色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm,300 nm),流动相为乙腈-水-三氟乙酸(25∶75∶0.1),检测波长为271 nm,建立了灵敏、快速的PPD效价的高效液相色谱测定法。在0.4×104 IU/mL～1.1×104 IU/mL的浓度范围内,效价与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程为y=2×106x-6783.6,相关系数R=1.000。将PPD样品用灭菌水稀释后,注入液相色谱仪,测得效价为2.59×104 IU/mg,与传统豚鼠标定法的测定结果(2.91×104 IU/mg)基本一致。该方法简便,灵敏度高,检测速度快,可以较好地控制PPD的质量。

抗牛型结核杆菌单克隆抗体的研制及其初步鉴定

对人与动物有致病性的主要是结核杆菌,此外,还有少数非典型分枝杆菌。牛型结核杆菌是致人和动物结核病的病原菌之一。建立牛型结核杆菌单克隆抗体旨在为抗酸菌的菌型鉴定,结核病血清学诊断和流行病学调查提供更有效的手段。 本室以自制的牛型结核杆菌超声粉粹物及纯蛋白衍生物(PPD)免疫8周龄BABL/c小鼠。

猪源性牛型结核分枝杆菌分离与鉴定

2003年底和2004年初来自湖北、湖南、江西、广东等省的供港猪在屠宰时发现一定比例的猪有器官肉芽肿性病变。我们在湖北的J猪场、M猪场接种牛型结核菌(10 000IU/头)和禽型结核菌素(2 500IU),均发现牛型结核菌素阳性猪。J猪场共接种1 692头猪,其阳性分布为:种猪阳性率为37%(7/19)。

鹿结核病诊断技术研究新进展

鹿结核病（Deer tuberculosis）是一种慢性、消耗性人兽共患传染病,对养鹿业危害巨大,梅花鹿等多个鹿种均可感染本病,严重制约着养鹿业的健康发展。现有研究表明,牛型结核分枝杆菌（Mycobacterium bovis）是鹿结核病的主要病原体,随着养鹿业的快速发展,作为对鹿养殖业危害巨大的鹿结核病越来越受到社会的重视和关注。

猕猴结核病31例

结核病是严重损害猕猴(Macaca mulatta)健康的传染病,病灶除在肺部出现外,可累及多种脏器,且死亡率高。本中心对1551只猕猴做了结核菌素试验,阳性反应者31只,阳性率2.0％。31只病猴中,雌性14只,雄性17只。其中,2～4岁21只,5～14岁10只。4例因本病死亡,其余27例结合x线胸透确诊后处死;并对其中14例作了尸体解剖及病理组织学检查。现报道如下。

左氟沙星抗结核作用的药效学研究

采用试管二倍稀释法测定试验药的最低抑菌浓度（MIC）,以半数动物存活时间为指标比较药物的疗效。①左氟沙星在所试三种培养基中对人型结核菌(H37RV)、牛型结核菌（Ravenel）和草分枝杆菌（M.phlei）的抑菌活性强于氧氟沙星（OFLX）（其MIC数值为OFLX的1/2）;②左氟沙星在半流体培养基中对人型结核菌(H37RV)和牛型结核菌（Ravenel）的杀菌活性强于氧氟沙星（其MBC数值为OFLX的1/2）;③在本实验条件下,左氟沙星对小白鼠实验性结核病呈显著性或非常显著性疗效,显著优于同剂量OFLX的疗效,左氟沙星1mg/只的疗效近于OFLX的2mg/只的疗效。左氟沙星产品在体内体外均呈显著性抗结核活性。

三抗体间接法Dot—ELISA检测牛副结核病IgG_1抗体的研究

本试验建立了检测副结核病牛血清中特异性抗体的一种新的免疫学诊断方法——三抗体间接法斑点酶联免疫吸附试验(Dot一ELISA)。并与粪便培养法,常规 ELISA,补体结合反应(CFT)及二抗体间接法 Dot一ELISA 进行了比较,试验结果表明,三抗体间接法Dot——ELISA 比常规 ELISA、CFT 和二抗体间接法 Dot——ELISA 显著敏感,而且快速、简易、经济,适用于大规模的现场检疫。

提高结核杆菌培阳率的探讨

一、应用新鲜培养基,选择合适的接种量分离用培养基,应当新鲜,一般在2—6℃冰箱储存一个月效果最佳。我们发现:如果储存时间过长,培基PH降低,颜色变深,再接种经酸处理的标本细菌很难生长,应及时更换培养基。用4％H2So4进行前处理,如果痰液稀薄,加倍量消化液,痰液粘稠可加二倍量消化液。

实验室检测奶牛结核病的方法比较

奶牛结核病属于人畜共患传染病,该病严重危害奶牛养殖业和公共卫生安全,是由牛结核分枝杆菌引起,奶牛是家畜中最易感染该病的动物。多年来,奶牛结核病已成为制约奶牛养殖业发展和危害人类健康的重要因素。为了更好地防控奶牛结核病,用两种方法检测结核病：牛型提纯结核菌素（PPD）皮内变态反应和γ-干扰素检测技术检测比较,分析其优劣,为以后的检测工作提供依据。

简析牛结核病的检测

牛结核病（Bovine Tuberculosis,BTB）是由牛分枝杆菌（Mycobacterium bovis）引起的一种人兽共患的慢性消耗性传染病,可通过感染牛的分泌物或排泌物或牛奶等经消化道或呼吸道传染人或者其它动物,此外,BTB还导致奶牛逐进性消瘦、产乳率和乳质下降、肺结核及其它器官结核和损害等。

奶牛布鲁氏菌病与结核病的检测预防

1检测前准备检测前必须全面普查、核实、登记,根据奶牛存栏数准备牛型结核菌素、虎红平板凝集抗原、虎红平板凝集试验卡片、对照血清等。根据计划、检测数量准备足够的牛型结核菌素注射器、专用注射针头、采血用16号针头、青霉素瓶、稀释结核菌素瓶、剪刀、镊子等,高压消毒。75%酒精、棉签、记号笔、奶牛两病检测登记表、游标卡尺、标签、电动理发剪等;耳标、耳钳、固定牛的麻绳、存放血的纸盒、胶箱等。

γ-干扰素检测技术和皮内变态反应在奶牛结核病检测中的应用比较

本文对牛型提纯结核菌素（PPD）皮内变态反应试验和新型牛结核杆菌γ-干扰素检测技术进行比较，分析其优劣势。实验结果表明，γ-干扰素检测技术特异性好、敏感性高、操作简便、易于标准化，但价格较高。该方法可作为PPD皮内变态反应的平行试验，用于复核检查目前国家标准方法PPD皮内变态反应阳性牛。

卡介苗不良反应研究进展

1907年法国细菌学家卡尔默蒂(Calmeette)和介林(Guerin)将牛乳中分离的一株有毒力的牛型结核菌，用牛胆汁马铃薯培养基传代，每隔2-3周传1次，历经13年，共传230代，至1920年已成为一株毒力稳定的减毒菌株。至此，该菌株接种到任何动物身上，不但不会引起结核病，反而获得了抵抗力.