应用牛型结核菌素检查鹿结核病的初探

利用牛型结核菌素(OT)、提纯结核菌素(PPD)进行变态反应的方法,对鹿做了3个不同组合的试验。得出了以OT点眼法检查鹿结核病为主的结论,为结核病鹿的检疫、净化病鹿场提供了可行的方法。

制备牛型结核菌素高压灭菌模型的建立与应用

为建立牛型结核菌素高压灭菌模型,验证生物安全三级实验室对大量培养的牛分枝杆菌的高压蒸汽灭菌效果,通过型式试验,优化排空、升温、灭菌和排气等阶段的各项参数,最终确认最佳灭菌参数,建立灭菌模型。结果显示:灭菌温度121℃、灭菌时间10 min、排空4次、排气压差12 kPa、冷却温度98℃时,满载的牛分枝杆菌灭菌效果最好。本研究建立了制备牛型结核菌素国家标准品的高压灭菌模型,保证了满载牛分枝杆菌的灭菌效果,为防范人兽共患病原菌扩散,改进牛型结核菌素提纯制备工艺作出了有益探索。

用提纯的牛型结核菌素诊断食蟹猴结核病

食蟹猴(Macaca fascicularis)体型较恒河猴(M.mutalta)小,其生理指标与人类非常接近,在医学研究中作为实验动物需求量日趋增大。由于猴对结核分枝杆菌非常易感,并且与人类接触密切,因而在进出口贸易中对猴结核的检疫已列入必检项目且要求十分严格。在实际工作中对食蟹猴结核病的检疫是参照检测恒河猴的方法进行的,即用旧结核菌素(OT)

二种牛型提纯结核菌素变态反应试验结果比较

为了解不同厂家生产的牛型提纯结核菌素(PPD)对奶牛结核病检疫皮内变态反应试验结果的影响,随机选取二个不同规模奶牛场的100头青年母牛,分别采用国产和荷兰产PPD诊断液2000 IU和3000 IU的剂量,在每头参试牛的左右侧颈部同时进行皮内变态反应试验,并对判定结果进行比较;同时对所有阳性牛肺门淋巴结样品应用细菌培养的方法进行复核。结果显示:二种PPD诊断液均存在非特异性反应,但国产PPD的非特异性反应显著大于荷兰产PPD(P<0.01)。

牛型提纯结核菌素国家标准品的研制

根据《中华人民共和国兽用生物制品规程》2000年版制备牛型提纯结核菌素(牛PPD)国家标准品候选物4批。根据多糖、核酸和氮含量测定结果,筛选200804批制备为待检国家标准品,其检验结果为:物理性状为乳白色疏松团块,加生理盐水后在5s内溶解;无菌检验合格。200804批准检国家标准品于稀释前各样品变异系数为1.4%,冻干后各样品变异系数为4.8%。效价测定:待检国家标准品4个稀释度引起的豚鼠皮肤红肿面积与国际标准品相对应的稀释度引起的皮肤红肿面积的差值平均值都在10%以内,2者的剂量反应曲线基本平行,即待检国家标准品效价与国际标准品基本相同。200804批待检国家标准品于50℃保存21d之内效价下降程度平均值小于10%,保存28d效价下降程度平均值大于10%。其特异性和安全性均符合要求。

高效液相色谱法测定提纯结核菌素效价的研究

为探讨高效液相色谱法测定牛型提纯结核菌素(PPD)效价的可行性,本研究根据PPD中蛋白成分的紫外光吸收波长,采用专用聚苯乙烯/二乙烯苯树脂色谱柱(150 mm×4.6 mm,5μm,300 nm),流动相为乙腈-水-三氟乙酸(25∶75∶0.1),检测波长为271 nm,建立了灵敏、快速的PPD效价的高效液相色谱测定法。在0.4×104 IU/mL～1.1×104 IU/mL的浓度范围内,效价与峰面积呈良好的线性关系,线性回归方程为y=2×106x-6783.6,相关系数R=1.000。将PPD样品用灭菌水稀释后,注入液相色谱仪,测得效价为2.59×104 IU/mg,与传统豚鼠标定法的测定结果(2.91×104 IU/mg)基本一致。该方法简便,灵敏度高,检测速度快,可以较好地控制PPD的质量。

γ-干扰素检测技术和皮内变态反应在奶牛结核病检测中的应用比较

本文对牛型提纯结核菌素（PPD）皮内变态反应试验和新型牛结核杆菌γ-干扰素检测技术进行比较，分析其优劣势。实验结果表明，γ-干扰素检测技术特异性好、敏感性高、操作简便、易于标准化，但价格较高。该方法可作为PPD皮内变态反应的平行试验，用于复核检查目前国家标准方法PPD皮内变态反应阳性牛。

γ-干扰素检测技术和皮内变态反应在奶牛结核病检测中的应用比较

笔者对牛型提纯结核菌素(PPD)皮内变态反应试验和新型牛结核杆菌γ-干扰素检测技术进行比较,分析其优劣。试验结果表明,γ-干扰素检测技术特异性好、敏感性高、操作简便、易于标准化,但价格较高。该方法可作为PPD皮内变态反应的平行试验,用于复核检查目前国家标准方法 PPD皮内变态反应阳性牛。