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牛支原体感染牛巨噬细胞对线粒体途径介导凋亡的影响
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作者 唐恬 王振 +6 位作者 余梦环 徐坤 何瑞丽 秦田哲 陈创夫 马忠臣 王勇 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3625-3634,共10页
[目的]探究牛支原体石河子分离株感染牛巨噬细胞(BoMac)能否通过线粒体凋亡途径影响细胞增殖活力和凋亡。[方法]通过培养基培养及测定颜色变化单位(CCU)绘制牛支原体菌株生长曲线,确定其最高活力的培养时间;使用处于活力最高时的牛支原... [目的]探究牛支原体石河子分离株感染牛巨噬细胞(BoMac)能否通过线粒体凋亡途径影响细胞增殖活力和凋亡。[方法]通过培养基培养及测定颜色变化单位(CCU)绘制牛支原体菌株生长曲线,确定其最高活力的培养时间;使用处于活力最高时的牛支原体以不同感染复数(MOI)和不同感染时间感染牛巨噬细胞,分别利用实时荧光定量PCR和Western blotting试验检测线粒体凋亡通路核心分子Bax和Bcl-2的表达情况,通过CCK8试验检测细胞增殖活力水平,流式细胞术检测细胞凋亡率。[结果]生长曲线分析结果显示,牛支原体石河子分离株12~54 h处在对数生长期,54~84 h处在平台期(滴度为109 CCU/mL),因此,选用培养54 h的牛支原体石河子分离株感染细胞。实时荧光定量PCR与Western blotting检测结果一致,即随感染时间和MOI的增加,促凋亡蛋白Bax基因及其蛋白表达量呈现上升趋势,抑凋亡蛋白Bcl-2基因及其蛋白表达量呈现下降趋势,其中牛支原体石河子分离株感染24 h时,Bax基因表达量极显著增加(P<0.01),Bcl-2基因表达量显著降低(P<0.05),Bcl-2/Bax显著下降(P<0.05);当MOI为1000时Bax蛋白表达量极显著增加(P<0.01),Bcl-2蛋白表达量显著降低(P<0.05),Bcl-2/Bax极显著下降(P<0.01)。CCK8试验结果显示,随着感染时间和MOI的增加,牛巨噬细胞活力极显著降低(P<0.01),增殖抑制率为35%~45%。流式细胞术检测结果显示,感染后,牛巨噬细胞凋亡率为25%~45%。[结论]随着感染时间和MOI的增加,牛支原体石河子分离株可通过线粒体凋亡途径标志因子Bax和Bcl-2的表达诱导牛巨噬细胞凋亡,为进一步解析牛支原体的致病机制提供理论基础。 展开更多
关键词 牛支原体 牛巨噬细胞 线粒体凋亡途径 细胞增殖
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黄连素对β-羟丁酸诱导的牛巨噬细胞炎症反应的影响
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作者 高佳序 张辉 谢光洪 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2019年第24期120-123,共4页
为了研究黄连素对β-羟丁酸(β-HB)刺激牛巨噬细胞炎症反应的影响,试验先利用CCK-8法检测黄连素及β-HB处理牛巨噬细胞后对牛巨噬细胞活性的影响,然后采用不同浓度(5,7.5,10μmol/L)的黄连素预处理牛巨噬细胞1 h后,加入β-HB(2.4 mmol/L... 为了研究黄连素对β-羟丁酸(β-HB)刺激牛巨噬细胞炎症反应的影响,试验先利用CCK-8法检测黄连素及β-HB处理牛巨噬细胞后对牛巨噬细胞活性的影响,然后采用不同浓度(5,7.5,10μmol/L)的黄连素预处理牛巨噬细胞1 h后,加入β-HB(2.4 mmol/L)刺激24 h,用CCK-8法检测细胞活性,用荧光定量法检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素1β(IL-1β)的mRNA表达水平,采用Western-blot方法检测NF-κB信号通路相关蛋白的表达。结果表明:黄连素(5,7.5,10μmol/L)及β-HB(2.4 mmol/L)不会对牛巨噬细胞的活性产生影响。黄连素能够抑制炎性细胞因子IL-1β、IL-6、TNF-αmRNA的表达水平,同时黄连素通过下调IκB和P65磷酸化水平,抑制NF-κB信号通路的激活。说明黄连素能够在体外抑制牛巨噬细胞的炎症反应。 展开更多
关键词 黄连素 Β-羟丁酸 炎症 牛巨噬细胞 NF-ΚB
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Effect of Chaiqinchengqi decoction on inositol requiring enzyme 1α in alveolar macrophages of dogs with acute necrotising pancreatitis induced by sodium taurocholate 被引量:4
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作者 Guo Jia Wang Xiaoxiang +4 位作者 Luo Ruijie Zhang Xiaoxin Yang Xiaonan Xia Qing Xue Ping 《Journal of Traditional Chinese Medicine》 SCIE CAS CSCD 2015年第4期434-439,共6页
OBJECTIVE: To investigate the effect of Chaiqinchengqi decoction(CQCQD) on inositol requiring enzyme 1α(IRE1α) in alveolar macrophages(AMs)of the dog model of acute necrotising pancreatitis(ANP) induced by sodium ta... OBJECTIVE: To investigate the effect of Chaiqinchengqi decoction(CQCQD) on inositol requiring enzyme 1α(IRE1α) in alveolar macrophages(AMs)of the dog model of acute necrotising pancreatitis(ANP) induced by sodium taurocholate.METHODS: Fifteen beagle dogs were randomised into a control group,ANP group and CQCQD group(n = 5 per group). ANP was induced by a retrograde duct injection of 50 mg/kg of 5% sodium taurocholate. The dogs in the control group received injections of the same volume of saline as the sodium taurocholate. After the models were induced,the dogs in the CQCQD group were administered 10 m L/kg CQCQD every 2 h for 6 h. Two hours after the last administration of either CQCQD or saline,they were sacrificed by anaesthesia. AMs were collected to determine the IRE1α and Interleukin-1β(IL-1β)m RNA and protein expression,and pancreatic tissues were collected for histopathology analysis.RESULTS: Compared with the ANP group,the m RNA and protein expression of IRE1α and the protein expression of IL-1β of AMs in the CQCQD group were significantly down-regulated,and the pancreatic histopathology score of the CQCQD group also was lower. There was no significant difference in the m RNA expression of IL-1β of AMs between the two groups.CONCLUSION: The CQCQD-induced down-regulation of the IL-1β protein expression may involve the down-regulation of the m RNA and protein expression of IRE1α in AMs. 展开更多
关键词 IRE1alpha protein dog Pancreatitis Macrophages Alveolar Chaiqinchengqi decoction
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