论作品的设计创意和表现手法——兼谈《牛气冲天壶》

紫砂最大的特征就是全手工成型的更多可能性,可以把艺人们的设计创意和抟制技巧更好地展示出来。从整体上来看这件作品《牛气冲天壶》,能够看到从方器的设计抟制到花器的点缀工艺,直观地体现出作者在长期紫砂实践过程之中的不断尝试和把控力度,通过这样一把小小的紫砂壶,能够让我们广大的壶友们感受到紫砂艺术的无限可能和精益求精的态度,以及从中传递出来的更为丰富的表现形式和人文情怀。

牛气管抗菌肽在毕赤酵母中的表达及条件优化

根据已发表的牛气管抗菌肽(bTAP)序列和酵母密码子偏爱性设计并合成一段bTAP DNA序列,将其与毕赤酵母pPIC9K质粒连接后构建了分泌表达载体pPIC9K-bTAP。获得重组质粒经SalⅠ酶切线性化后电转化毕赤酵母GS115,通过G418抗性筛选获得了阳性转化重组菌。通过对重组菌培养条件的进一步优化,揭示了重组蛋白bTAP可在含2%酸水解酪蛋白的BMMY培养基中经0.5%甲醇在28℃诱导表达72h后获得最优表达。抑菌试验表明bTAP对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果。

牛气管抗菌肽的原核表达、体外抗菌活性及其组织分布分析

本文旨在对牛气管抗菌肽(tracheal antimicrobial peptide,TAP)基因进行原核表达,以及研究重组蛋白的抗菌活性,并分析TAP在各组织的表达分布情况,为开展转TAP基因抗乳腺炎奶牛研究提供技术资料。作者采用RT-PCR从荷斯坦奶牛气管扩增TAP基因,分析其序列后根据大肠杆菌表达系统对密码子的偏好性,人工合成牛TAP基因,构建pET32a(+)-TAP重组质粒;然后转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导表达并纯化。对表达蛋白进行SDS-PAGE、Western Blot鉴定;在线软件分析目的蛋白表达量。采用滤纸片法测定重组牛TAP的体外抗菌活性,并用RT-PCR法分析牛各组织中TAP表达情况。测序结果表明,扩增到114bp目的基因片段,可编码含38个氨基酸残基的成熟蛋白。SDS-PAGE分析表达的融合蛋白相对分子质量为24ku,重组蛋白以可溶性方式存在,表达量占菌体总蛋白的52.1%。Western Blot检测只出现单一条带。抗菌效价分析表明0.115μg·μL-1重组蛋白对牛源金黄色葡萄球菌有一定的抗菌活性。TAP基因在奶牛咽喉、肺、气管、小肠、肝、心脏及口腔黏膜中均有表达,在鼻黏膜和舌黏膜中微量表达,在皮肤中几乎不表达。作者成功表达了牛TAP基因,重组牛TAP蛋白在大肠杆菌中实现高效表达,并具有一定的抗奶牛乳腺炎致病菌的活性,为未来培育抗乳腺炎转基因奶牛及相关基因工程产品的开发奠定了基础。

高表达牛气管防御素的真核重组载体的构建及其鉴定

根据GeneBank中牛TAP的序列设计了1对特异性引物,采用RT-PCR方法从牛气管组织扩增牛TAP基因,并克隆到pEASY-T3载体。测序结果表明,扩增的片段含有144 bp核苷酸,编码48个氨基酸,与已报道的bTAP有1个氨基酸不同。该基因与真核表达载体FG9重组,经过PCR,酶切和测序鉴定,筛选牛TAP基因重组真核表达载体。使用脂质体法将FG9-TAP重组质粒转染293T细胞,斑点ELISA检测结果表明,成功构建了高表达牛TAP基因的真核表达载体,为抗金黄色葡萄球菌转牛TAP基因奶牛培育研究奠定基础。

牛气管抗菌肽在毕赤酵母中的表达与鉴定

为了在毕赤酵母中获得牛气管抗菌肽(bTAP)的表达,根据已发表的牛气管抗菌肽序列和毕赤酵母对密码子的偏爱性设计2对引物,采用重叠延伸PCR法获得bTAP DNA序列,将其与毕赤酵母(Pichia pastoris)pPIC9K质粒连接,构建表达载体pPIC9K-bTAP。用SalⅠ酶切线性化pPIC9K-bTAP质粒后电转化毕赤酵母GS115,经G418筛选阳性克隆,并用甲醇诱导其表达。SDS-PAGE分析结果表明表达的重组蛋白质分子量正确,抑菌试验结果表明表达的重组蛋白质bTAP对金黄色葡萄球菌具有良好的抑菌效果。

牛气管抗菌肽在山羊乳腺组织中的表达

根据已经发表的牛气管抗菌肽(bTAP)cDNA序列设计4条短的寡核苷酸片段,以重叠延伸PCR的方法合成bTAP基因,将其克隆至pMD-18T载体,序列测定正确后,构建bTAP基因的乳腺组织特异性表达载体pBcp-bTAP,将其溶于生理盐水后直接注射山羊乳腺小叶,使bTAP基因在乳腺组织内表达,收集注射质粒前后的奶样,测试奶样对金黄色葡萄球菌,大肠杆菌的抑制能力,结果显示注射pBcp-bTAP后的奶样表现出对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌具有明显的抑制作用,这种抑制活性可以持续至20h以上。

牛气管抗菌肽cDNA的克隆与表达

目的:开发一种有效抑制动物细菌感染的重组抗菌肽。方法:根据已发表的牛气管抗菌肽(bTAP) mRNA序列设计引物,用RT-PCR从奶牛气管上皮细胞总RNA中扩增出214bp的bTAP cDNA,将其克隆入pUCm-T载体进行序列测定,将此cDNA分别克隆入真核表达载体pcDNA3和原核表达载体pGEX-6p-1进行表达研究。结果:测序结果与已发表的bTAP序列有3个碱基差异,其中2个导致氨基酸替换;经微球菌溶解试验证明,注射在小鼠皮下的重组质粒pcDNA-tap能表达有活性的bTAP;抗体测定结果显示重组质粒pcDNA-tap经5次免疫后家兔产生的抗hTAP抗体效价达1:800;经IPTG诱导后,含重组质粒pGEX-tap大肠杆菌能表达预计大小的GST-bTAP融合蛋白,且能被兔抗bTAP识别。结论:本研究克隆的bTAP cDNA可用于表达研究及相关基因工程产品的开发。

牛气管黏膜抗菌肽成熟肽基因的克隆及序列分析

目的:获得牛气管黏膜抗菌肽(bTAP)成熟肽的基因序列,为后续的研究工作奠定基础。方法:从新屠宰的黄牛气管黏膜中提取总RNA,反转录获得cDNA,以此cDNA为模板进行PCR扩增目的片段,并将其克隆至pMD18-T载体中,经鉴定随机挑选1个阳性重组子进行测序,将测序结果与已报道的序列进行比较,并做NCBIBlast比对。结果:PCR扩增出bTAP成熟肽基因,核苷酸序列测定验证了其正确性;NCBIBlast比对表明,与bTAP成熟肽基因同源性较高的分别是牛β-防御素11、牛β-防御素12、牛β-防御素402、牛β-防御素403、绵羊β-防御素1、绵羊β-防御素2、山羊β-防御素1及山羊β-防御素2,核苷酸序列同源性分别为78.07%、78.95%、80.70%、83.33%、83.33%、80.70%、81.58%和81.58%,氨基酸序列同源性分别为68.42%、65.79%、68.42%、76.32%、71.05%、63.16%、63.16%和68.42%。结论:成功克隆了bTAP成熟肽的基因序列,NCBIBlas比对表明bTAP与防御素可能来自一个共同的祖系基因。

GDP破2万亿,苏州何以“牛气冲天”?

2020年,对苏州而言,是标志性的一年。统计数据显示,苏州2020年GDP达20170.5亿元,迈入“2万亿”时代。这一数字不仅超过省会城市南GDP破2万亿,苏州何以“牛气冲天”?《中国经济周刊》记者王红茹京,在江苏省内排名第一,也超过了成都、杭州、武汉等省会城市,甚至超过直辖市天津,在全国城市排名中,居第6位。

论紫砂壶“牛气冲天”的文化蕴意

紫砂壶是传统的艺术,是中国的艺术,身为一名紫砂艺人,应有弘扬传统文化的责任和担当,在提升自身审美水平的基础上,从传统文化中汲取创作灵感,为作品融入文化内涵,使之具备浓厚的传统文化特色,让传统文化通过紫砂壶融入人们的生活中,让中华文明走出国门、走向世界。本文以紫砂壶“牛气冲天”为例,浅谈其造型设计和文化内涵,探析其艺术魅力。

牛气肿疽的诊治

以特殊的临床症状,流行病学和病理解剖变化为依据进行诊断,结合与恶性水肿,炭疽和巴氏杆菌病的鉴别,进行诊断。并结合多年临床经验,采取防治和中西医结合治疗,收到较好的治疗效果。

牛气肿疽的诊治与体会

牛气肿疽是牛的一种急性败血性传染病,以在肌肉丰满的部分发生黑色的炎性气性肿胀、按压有捻发音为特征。该病在新宁县岭区为常见多发病。本文就牛气肿疽的诊断与治疗谈谈笔者的一些粗浅看法,与同行们探讨。

牛气肿疽病的诊治

介绍了牛气肿疽病的病原、流行病学、发病机理、症状、病理变化、临床诊断,提出综合防治措施,以期为该病的防治提供参考。

浅析紫砂作品牛气冲天壶的造型特色

牛的创世神话,牛的图腾崇拜,牛的民俗故事、牛的祥瑞色彩,牛,走进了中国的历史发展,被赋予了很多美好的象征意义。在紫砂艺术创作中,牛文化是常见的素材,出现了很多以牛为主角的经典名作,其中尤以牛盖壶为最。在紫砂壶艺发展的历史长河中,牛盖壶被历代紫砂艺人或仿制或改制,在继承与创新中不断的被赋予新生,形成了以牛为题材的牛壶系列。生肖纪年在循环,牛年在人们的期盼中轮回,紫砂艺人对牛壶在造型上的传承与创新从未止步,本文中的牛气冲天壶便是其中一个缩影,既有牛盖壶的传承痕迹,又有了突破与创新,并且极具造型特色,令人耳目一新。

浅谈牛气肿疽病的诊断与防治

牛气肿疽病病程短,死亡率高。近几年,该病发病范围和发病数趋增加之势,严重危害到养牛生产。笔者经过多年的临床摸索,采取对疫点重点免疫和中西医结合的方法,取得较理想的治疗效果。

牛气肿疽病的诊断及防治

牛气肿疽病也称黑腿病,是一种由气肿疽梭菌引发的热性败血型传染病。该病在我国流行区域逐年增大,给养牛业带来巨大的不良影响及经济损失。本文对牛气肿疽病的诊断及防治方法展开综述,以期为养牛户防治牛气肿疽病提供参考。

牛气肿疽病的免疫与防治

辽宁省绥中县万家动物卫生监督所在本文中对牛气肿疽病进行了简要分析，研究牛气肿疽病的免疫，并对其提出有效防制。

牛气肿疽的诊断与防治

牛气肿疽是由气肿疽梭菌引起的一种急性败血性传染性疾病,其只对反刍动物发挥作用,具有高死亡率的特征,一旦发生会对养殖户造成严重的经济利益损失。为此,文章对牛气肿疽的诊断与防治进行了分析,以便养殖户能够掌握基本的诊断知识与有效的防治方法。

汉源县一例牛气肿疽的诊断与防制

1病例发生情况2020年9月初,在汉源县永利彝族乡发生一起疑似黄牛气肿疽病例,主要以肌肉丰满的部位如颈侧、肩前、腰部、后肢上部、臀部等处出现炎性水肿,挤压有捻发音为特征。汉源县动物疫病预防控制中心接到永利乡人民政府报告后,立即组织专业技术人员到现场核实情况,并及时采取相关处置措施。

牛气肿疽病的诊断与防治

气肿疽病又名'黑腿病''鸣疽病',是牛的急性、败血性、发热性传染病。其特征是在牛肌肉丰满的部位如颈侧、肩前、腰部、后肢上部、臀部等处发生炎性、气性肿胀,挤压有捻发音,所以又称'鸣疽病',并常有跛行。主要发生于黄牛。地处高山潮湿的山谷牧场和草场的气肿疽病老疫区,夏季会在黄牛中有规律地重新发病。