牛源肝素钠的工艺研究与结构分析

为研究筛选出牛源肝素钠氧化的最优工艺参数,对成品的质量进行检测,并对其结构进行分析。采用正交试验法,对牛源肝素钠氧化步骤的工艺参数进行优化筛选,并对关键指标进行检测,再对二糖组成进行分析。结果表明,牛源肝素钠工艺氧化步骤的最佳反应条件为反应温度40±2℃,pH值9.0±0.2,双氧水加量2.5%,反应时间6 h。按最优氧化条件,该步骤的脱色率为94.6%,效价收率为97.3%,二糖组成表明牛源肝素与猪源肝素在结构上有所差异,该工艺稳定且高效。

牛源肝素钠特性与病毒灭活研究

对牛源肝素钠特性及制备工艺的病毒去除/灭活能力进行研究。采用分子排阻色谱法、羊血浆法、SAX-HPLC法等对牛源肝素钠与猪源肝素钠的分子量、效价、双糖等特性进行分析研究;通过核磁共振(NMR)波谱法对牛源肝素钠、猪源肝素钠进行分析,并对获得的^(1)H-NMR谱和^(13)C-NMR谱进行对比;采用指示病毒,验证高温、高pH、离子交换、氧化处理等步骤的病毒去除/灭活能力。相对于猪源肝素钠,牛源肝素钠重均分子量(M_(r))低约5%,效价低约23%,其主要双糖含量、NMR波谱图也有一定差别;病毒去除/灭活验证表明,处理前后病毒感染性滴度下降值达4个Log_(10)值以上。特性研究表明牛源肝素钠与猪源肝素钠存在一定差别,病毒去除/灭活验证研究证明制备工艺能够有效去除/灭活病毒。